 |
Основные методы исследования
|
|
|
|
1. Микроскопический.
2. Бактериологический (с микроскопией).
3. Серологический.
4. Биологический.
Ход исследования
Ход исследования
Контрольные вопросы
1. Что служит материалом для исследования при подозрении на лептоспироз?
2. Перечислите основные методы исследования.
3. Расскажите как ставят биологическую пробу.
Питательные среды
Среда Терских. Готовят фосфатную смесь: 1) фосфат натрия двузамещенный - 11876 г; 2) дистиллированная вода - 1 л; 3) фосфат калия однозамещенный - 9078 г (приготовленные растворы хранят в темном месте). Смесь стерилизуют и добавляют 10% прогретой сыворотки кролика. После посева среду покрывают слоем жидкого парафина или вазелинового масла.
Среда Ферворта - Вольфа. На 1 л среды: 1) пептон - 1 г; 2) натрия хлорид - 0,5 г; буферная смесь Зермсена - 100 мл; 4) дистиллированная вода - 900 мл; 5) 10% инактивированная сыворотка кролика.
Риккетсии - Ф. К. Черкес
Риккетсии - это особая группа полиморфных бактерий, которые являются внутриклеточными паразитами. Они включены в семейство Rickettsiaceae.
Первого представителя этой группы выявил в 1909 г. американский ученый Риккетс при изучении этиологии лихорадки Скалистых гор. От этого заболевания он погиб.
В 1913 г. чешский ученый Провацек в крови больных сыпным тифом также обнаружил подобные микроорганизмы. Заразившись сыпным тифом, ученый тоже погиб.
А в 1916 г. португальский ученый Роша-Лима на основании длительных наблюдений установил, что возбудителями мексиканского тифа, европейского сыпного тифа и других подобных заболеваний являются разновидности микроорганизмов, обнаруженных Риккетсом, и в честь первооткрывателя назвал их риккетсиями. А в память Провацека возбудителя сыпного тифа назвал риккетсиями Провацека.
|
|
|
Большой вклад в изучение сыпного тифа внесли А. А. Кронтовский, М. А. Кронтовская, П. Ф. Здродовский, Е. С. Галиневич и др.
Среди риккетсии имеются разновидности, патогенные для человека, животных и членистоногих.
У человека риккетсии обусловливают различные лихорадочные заболевания,% называемые риккетсиозами.
По П. Ф. Здродовскому, риккетсиозы человека делятся на 5 групп: группа сыпного тифа, группа клещевых пятнистых лихорадок, группа цуцугамуши, группа Ку-лихорадки, группа пароксизмальных риккетсиозов.
Классификация риккетсиозов основана на ряде признаков: свойств возбудителя, эпидемиологии и клиники заболевания.
На территории СССР встречаются некоторые из риккетсиозов: эпидемический сыпной тиф (европейский), болезнь Брилла, эндемический сыпной тиф, Ку-лихорадка.
Морфология. Риккетсии это мелкие (0,2-1 мкм), полиморфные микроорганизмы, среди которых встречаются палочковидные, кокковидные и нитевидные (длиной 10-30 мкм) представители.
Риккетсии не имеют спор, капсул, неподвижны. Грамотрицательны. По Романовскому - Гимзе и по способу Здродовского окрашиваются в красный цвет. Строение клеточной стенки сходно со строением стенки грамотрицательных бактерий.
Культивирование. Риккетсии размножаются внутри клетки хозяина. Аэробы. Обладают собственным метаболизмом, ведут себя в клетке самостоятельно. Однако являются энергетически зависимыми от клетки паразитами.
В клетке хозяина каждый вид риккетсии размножается только в определенных местах: в цитоплазме, ядре или вакуолях клеток. Они хорошо размножаются в тканях чувствительных к ним животных и членистоногих. В лабораторной практике наиболее часто используется метод заражения куриных эмбрионов и культуры тканей.
Ферментативные свойства. Не выражены.
Токсинообразование. Риккетсии образуют термолабильный эндотоксин.
|
|
|
Антигенная структура. Риккетсии имеют два антигена: групповой термостабильный и специфический термолабильный.
Устойчивость к факторам окружающей среды. К высоким температурам риккетсии мало устойчивы. Исключением являются возбудители Ку-лихорадки. К низким температурам и к высушиванию все риккетсии устойчивы. Они чувствительны к антибиотикам. Сульфамиды не ингибируют их роста.
Глава 41. Возбудители сыпного тифа
Сыпной тиф
Возбудителем сыпного тифа является Rickettsia provazekii.
Еще задолго до открытия возбудителя сыпного тифа русский врач О. О. Мочутковский в опытах на себе показал, что возбудитель этого заболевания циркулирует у больного в крови.
Морфология. Возбудители эпидемического сыпного тифа - риккетсии Провацека - полиморфны. Чаще они имеют форму кокков или гантелей, встречаются нитевидные формы. Средние размеры от 0,8-2,0 × 0,3-0,6 мкм. При окраске по методу Здродовского они приобретают красный цвет.
Культивирование. Размножаются в цитоплазме клеток хозяина, эпителии кишечника вши, эндотелии сосудов. Чаще их культивируют в желточном мешке куриного эмбриона. В месте размножения на 8-13-й день образуется мутная бляшка. Оптимальная температура для их развития 35° С.
Токсинообразование. Риккетсии Провацека образуют эндотоксин. В чистом виде он не получен. Однако его чувствительность к температуре (при нагревании он быстро разрушается) дает право предположить, что он белкового происхождения. Токсин, при проникновении риккетсии в организм, поражает клетки эндотелия сосудов, что приводит к увеличению проницаемости капилляров.
Антигенная структура. Риккетсии Провацека содержат два антигена. Один из них поверхностный, термолабильный. По химическому составу он представляет собой липидополисахаридобелковый комплекс. Этот антиген невидоспецифичен и является общим с антигенами возбудителей эндемического сыпного тифа, а также с антигенами протея OX19, OX2. Второй - белковополисахаридный комплекс является видоспецифичным и находится в глубине клетки.
Э. Вейлем и А. Феликсом была обнаружена способность Proteus ОХ 19 давать положительную реакцию агглютинации с сывороткой больных сыпным тифом. Эта реакция, названная именем ученых, широко использовалась с диагностической целью. Авторы полагали, что и возбудителем сыпного тифа является Proteus ОХ 19. Однако по мере накопления материала и доказательства этиологической роли риккетсии при сыпном тифе было установлено: 1) Proteus OX 19 не является возбудителем сыпного тифа; 2) Proteus OX 19 дает положительные реакции агглютинации, с сыворотками больных сыпным тифом потому, что имеет общий с риккетсиями Провацека антиген; 3) реакция Вейля - Феликса не всегда специфична, и при диагностике сыпного тифа ее перестали использовать, заменив в реакции агглютинации антиген диагностикумом из риккетсии Провацека.
|
|
|
Устойчивость к факторам окружающей среды. При высокой температуре, особенно во влажной среде, риккетсии Провацека погибают быстро.
В высушенных фекалиях вшей риккетсии сохраняются длительно. Обычные растворы дезинфицирующих веществ губят их быстро.
Восприимчивость животных. В экспериментальных условиях можно заразить белых мышей, морских свинок и обезьян. На обезьянах воспроизводят клиническую картину сыпного тифа. У зараженных белых мышей возникает специфическая пневмония.
Источники инфекции. Больной человек.
Пути передачи. Трансмиссивный. В 1909 г. французский ученый Николь в опытах на обезьянах установил, что риккетсии Провацека передаются платяными вшами. В дальнейшем было показано, что головные вши также могут быть переносчиками.
Механизм заражения. Насосавшись крови больного, вошь становится заразной на 4-5-й день. За это время риккетсии размножаются в клетках эпителия кишечника вши. Накопившись там, они разрушают эпителиальные клетки, попадают в просвет кишки и в большом количестве выделяются с фекалиями вши. Попав на кожу здорового человека, вошь кусает его и тут же выделяет риккетсии с фекалиями. Человек расчесывает место укуса и втирает в ранку риккетсии. Так возбудители оказываются во внутренней среде организма человека.
Патогенез. Попавшие в организм человека риккетсии внедряются в клетки эндотелия сосудов. Размножаются, губят клетки, попадают в большом количестве в кровь - возникает риккетсиемия. Процесс в сосудах характеризуется воспалением и образованием тромбов, что приводит к закупорке мелких кровеносных сосудов. Вокруг затромбированных сосудов головного мозга происходит образование гранулем - воспаления типа менингоэнцефалита.
|
|
|
Сыпной тиф начинается остро, отмечается высокая температура, общие явления интоксикации, сильная головная боль и появляется розеолезно-петехиальная сыпь.
Иммунитет. Антимикробный и антитоксический. После перенесенного заболевания - пожизненный. В крови обнаруживают антитела, нейтрализующие токсин, агглютинины, комплементсвязывающие антитела, и др.
Заболевания сыпным тифом часто были связаны с народными бедствиями (война, голод и т. д.) и завшивленностью.
Болезнь Брилла
В последние годы накопился ряд данных о длительном сохранении риккетсий Провацека в организме человека, переболевшего сыпным тифом. При снижении резистентности организма они могут вызвать повторное заболевание много лет спустя (10-30 лет), т. е. это эндогенный рецидив эпидемического сыпного тифа. Впервые болезнь эту описал Н. Брилль, а Н. Цинссер доказал, что возбудителем ее являются риккетсий Провацека. Болезнь Брилла характеризуется легким, доброкачественным течением. Особенностью диагностики при этом заболевании является отрицательная реакция агглютинации с протеем ОХ 19 (Вейля - Феликса) и положительная агглютинация с риккетсиями Провацека. Существует и другое мнение, что болезнь Брилла - это реинфекция, т. е. повторное заражение, а легкое течение обусловлено наличием иммунитета, приобретенного в результате ранее перенесенного заболевания.
Профилактика. Изоляция больных и уничтожение вшей. Специфическая профилактика. В настоящее время разработана химическая вакцина, приготовленная из концентрированного поверхностного антигена риккетсий Провацека.
Контрольные вопросы
1. Дайте характеристику риккетсий и способы их культивирования.
2. Перечислите возбудителей основных риккетсиозов.
3. Расскажите об источнике заболевания, путях передачи и механизме заражения эпидемического сыпного тифа.
4. Что такое болезнь Брилла?
Эндемический блошиный тиф
Возбудители эндемического сыпного тифа были открыты X. Музером в 1928 г. и в его честь были названы риккетсиями Музера. Сейчас их называют R. typhi
Морфология. Мелкие кокковидные (в пределах 1 мкм в диаметре) или палочковидные (0,3-0,6 × 1,5 мкм) микроорганизмы. Они менее полиморфны, чем риккетсий Провацека. По способу Здродовского окрашиваются в красный цвет. Грамотрицательны.
|
|
|
Культивирование. Риккетсий Музера хорошо размножаются в желточном мешке куриного эмбриона при температуре 35° С. Рост характеризуется образованием бляшек. У членистоногих они размножаются в ядре и цитоплазме клеток эпителия кишечника.
Токсинообразование. Риккетсий Музера образуют эндотоксин, который отличается от токсина риккетсий Провацека, что можно выявить реакцией нейтрализации.
Антигенная структура. Риккетсий Музера имеют два антигенных комплекса. Один - термостабильный - общий с антигеном риккетсий Провацека и антигенами против ОХ19 и ОХ2. Второй - термолабильный, видоспецифический, который позволяет отдифференцировать риккетсий Музера от риккетсий Провацека.
Устойчивость к факторам окружающей среды. Риккетсий Музера мало устойчивы во внешней среде, но в высушенном состоянии и при низких температурах они длительно сохраняются. Обычные концентрации дезинфицирующих растворов губят их быстро.
Восприимчивость животных. Эндемическим сыпным тифом болеют грызуны, в основном мыши и крысы. Из экспериментальных животных чувствительны морские свинки, при внутрибрюшиыном заражении у них развивается периорхит (скротальный феномен).
Источники инфекции. Эндемический сыпной тиф - зоонозная инфекция. Основными источниками в природе являются крысы и мыши.
Пути передачи. Трансмиссивный, пищевой, контактно-бытовой, Переносчиками, могут быть крысиные блохи и клещи (клещи передают риккетсий трансовариально).
Патогенез. Эндемический сыпной тиф представляет собой кровяную инфекцию. Патогенез сходен с патогенезом сыпного тифа. Клинически протекает легче. Болезнь характеризуется лихорадкой и появлением сыпи. Заболевание носит эндемический характер.
Иммунитет. После болезни развивается стойкий иммунитет за счет антимикробных и антитоксических защитных факторов.
Профилактика. Уничтожение насекомых, грызунов и улучшение санитарно-гигиенических условий. Специфическая профилактика осуществляется иммунизацией вакциной, содержащей убитые риккетсии Музера. Вакцинируют людей, живущих в эндемических очагах и подвергшихся опасности заражения.
Лечение. Антибиотики тетрациклинового ряда.
Контрольные вопросы
1. Какие Вы знаете источники инфекции и пути передачи эндемического сыпного тифа?
|
|
|
