Главная | Обратная связь | Поможем написать вашу работу!
МегаЛекции

Аппаратурная часть исследования




Для выполнения исследования был использован микроскоп Advanced Monocular Research Microscope RMH-4, произведенный Radical Scientific Equipments Pvt Ltd (Индия).

Микроскоп бинокулярный RMH-4 рекомендован для линических исследований в медицине и биологии, предназначен для исследований препаратов в проходящем свете, в светлом поле.

 

Технические характеристики:

· Увеличение, крат - 40х - 1600х;

· Окуляры широкопольные - 10х/18; 16х/16;

· Револьверное устройство на 4 объектива;

· Коаксиальные винты грубой и точной фокусировки;

· Объективы ахроматической коррекции - 4x/0.10; 10x/0.25; 40x/0.65; 100x/1.25МИ;

· Предметный столик механический двухкоординатный с препаратоводителем;

· Размеры предметного столика - 135x120 мм;

· Апланатический конденсор

· Светофильтры: синий, зеленый

· Источник света галогенная лампа, В / Вт - 6/20, с плавной регулировкой яркости, дополнительно укомплектован зеркалом.

Рисунок 1. Микроскоп бинокулярный RMH-4

 

При выполнении контроля оптической плотности суспензии использовался Спектрофотометр ПромЭкоЛаб модель ПЭ-5400 УФ, соответствующий лабораторным требованиям к выполнению фотометрических методик количественного анализа.

Рисунок 2. Спектрофотометр ПромЭкоЛаб ПЭ-5400 УФ

.

 


 

Ход исследования и результаты

Приготовление питательных сред

Плотную питательную среду готовим в соответствии с инструкцией изготовителя. Толщина слоя агара в чашке составляет (4,0±0,5) мм.

Использованы чашки Петри диаметром 100 мм, в каждую чашку внесено 25 мл агара. Перед заполнением расплавленной средой чашки Петри устанавлены на горизонтальную поверхность.

После заполнения чашки оставлены при комнатной температуре для застывания. Перед инокуляцией выполнен контроль отсутствия конденсата жидкости на внутренней поверхности крышек.

Приготовление суспензии исследуемых микроорганизмов

Для приготовления инокулюма мы использовали культуры, заключенные в капсулах биопрепаратов (Таблица ___). В стерильную пробирку объемом 2 мл был добавлен 1мл стерильной воды. Капсула была вскрыта непосредственно перед использованием. Содержимое капсулы постепенно добавляем в пробирку и перемешено с водой стерильной ватной палочкой, доводя плотность инокулюма до 0,5 по стандарту МакФарланда. Контроль оптической плотности суспензии осуществляем спектрофотометрически. Инокулюм используем в течение 15 мин после приготовления.

Инокуляция

Для инокуляции приготовленных чашек с агаром используем стерильную ватную палочку. Погружаем ее в стандартную суспензию микроорганизма, затем избыток инокулюма удаляем, отжав тампон о стенки пробирки. Инокуляцию проводим штриховыми движениями в трех направлениях, поворачивая чашку Петри на 60°. Приоткрытые чашки подсушивают при комнатной температуре в течение 10-15 мин. Выполняем нанесение повторно.

Флаконы с дисками извлекаем из холодильника за 1 ч до начала использования и выдерживаем герметично закрытыми до достижения ими комнатной температуры.

Аппликация дисков

Не позднее чем через 15 мин после инокуляции на поверхность питательной среды наносены диски с АБП. Аппликация дисков проведена с помощью стерильного пинцета, для лучшего контактирования слегка прижаты. Расстояние от диска до края чашки и между дисками выдержано не менее 20 мм. В одну чашку диаметром 100 мм помещено 7 дисков с АБП.

Рисунок ___. Общий вид дисков.

Инкубация;

Непосредственно после аппликации дисков чашки Петри помещены в термостат кверху дном и инкубированы при температуре 36 °С в течение 24 ч для всех тестируемых микроорганизмов.

Поделиться:





Воспользуйтесь поиском по сайту:



©2015 - 2024 megalektsii.ru Все авторские права принадлежат авторам лекционных материалов. Обратная связь с нами...