 |
Сбор и исследование паразитических насекомых
|
|
|
|
Класс насекомых Insecta включает в свой состав подкласс высших, или крылатых — Рterigata, который представлен насекомыми с полным превращением — Ноlometаbоlа и с неполным превращением — Неmimetabo1а.
Насекомые с полным превращением представляют отряд Dipterа, который включает подотряд короткоусых — Вrасhycera и длинноусых — Nеmatocera.
Подотряд короткоусых насекомых состоит из ряда семейств: оводы подкожные — Нурodermatidae, желудочные —Gastrophilidae, носоглоточные — Оestridaе, слепни — Таbаnidае, кровососки — Нippoboscidае, мухи настоящие—Мuscidае, падальные—Gаlliphoridае и серые мясные — Sarсорhagidае.
Подотряд длинноусых насекомых состоит из семейств: комары — Сulicidae, мокрецы — Сеratopogonidае, мошки — Simuliidае и бабочницы — Рsychodidае.
К насекомым с полным превращением относится и отряд блох — Арhаniptera.
Насекомые с неполным превращением включают отряды вшей — Siphunculata, пухоедов и власоедов — Маllорhаgа, клопов — Неmiptera, тараканов — Вlattoptera.
На животных сбор бескрылых насекомых проводят при осмотре и прочесывании волос гребнем. При этом их снимают пинцетом или кисточкой, смоченной в спирте, и помещают в морилку для умерщвления. Яйца паразитических насекомых собирают вместе со срезанными волосами. При сборе бескрылых насекомых на животных учитывают излюбленные места их обитания и сезоны года. Для ускорения сбора применяют легкое увлажнение волос слабым раствором креолина или лизола, после чего паразиты от основания волос перемещаются к их вершине, что облегчает их сбор.
При сборе пухоедов и их яиц осматривают все участки тела птиц, особое внимание обращая на отдельные перья крыльев. Из мелких животных блох обычно изгоняют керосином. Для этого животное помещают в металлическую емкость, стенки которой смочены керосином. Сверху посуду неплотно прикрывают крышкой, тоже смоченной керосином. Через 10—15 мин из волосяного покрова животного блохи начинают выпрыгивать на стенки сосуда, откуда их собирают кисточкой, смоченной спиртом. Для сбора двукрылых паразитических насекомых существует несколько методов.
|
|
|
Метод Е. Н. Павловского. Для отлова двукрылых паразитических насекомых, спокойно сидящих на животном, применяют специально приспособленный цилиндр. Он представляет собой стеклянную трубку длиной 10 см и шириной 2,5 см. Дно цилиндра конусовидно вдавлено внутрь, на вершине имеется отверстие диаметром 5—6 см. Сверху его закрывают пробкой. Сидящее на животном насекомое накрывают цилиндром, через нижнее отверстие которого оно попадает внутрь сосуда, оттуда его забирают и помещают в морилку или садок.
Для сбора двукрылых паразитических насекомых применяют также учетный колокол (метод А. С. Мончадского и З. А. Радзивиловской). Для сбора слепней можно применять чучело-ловушку (метод К. В. Скуфьяна). Собранных насекомых обычно умерщвляют в специальных морилках. Для умерщвления насекомых применяют хлороформ. Чтобы предотвратить повреждение их в морилке, на дно ее кладут слой ваты толщиной 1—1,5 см, а поверх— полоски фильтровальной бумаги.
Умерщвленных в морилках вшей, власоедов, пухоедов, клопов, личинок двукрылых лучше всего консервировать этиловым спиртом (70°), объем которого должен быть в 50 раз больше объема насекомых. Можно применять для этих целей 4—5%-ный раствор формалина или жидкость Барбагалло (3%-ный раствор формалина на физиологическом растворе).
Консервировать насекомых можно также высушиванием их на энтомологических булавках или на ватных тампонах.
Для определения насекомых используют особенности строения их тела (табл. 15).
Таблица 15. Определение отрядов паразитических насекомых (по С. Н. Никольскому)
|
|
|
| 1 (8). Крылья отсутствуют. |
| 2(3). Тело сплющено с боков - Арhaniptera (блохи). |
| 3(2). Тело сплющено дорзовентрально. |
| 4(7). Голова уже груди. |
| 5(6). Ротовые части колюще-сосущего типа, в покое спрятаны внутри головы и снаружи не видны - Аnoplurа (вши). |
| 6(5). Ротовые части в виде членистого хоботка, подогнутого под голову и грудь, в котором спрятаны колющие щетинки - Неmiptеrа (клопы). |
| 7(4). Голова шире груди - Маllорhаgа (пухоеды). |
| 8(1). Крылья имеются: первая пара развита хорошо, а вторая рудиментирована - Diptera (двукрылые). |
| Определение подотрядов насекомых отряда Diptera (двукрылые) |
| 1(2). Крылья рудиментарные; голова сидит в вырезке переднегруди Рuрiparа (куклородные). |
| 2(1). Крылья хорошо выражены. |
| 3(4). Тело короткое и массивное; сяжки короткие - Вrасhусеrа (короткоусые). |
| 4(3). Тело удлиненное, сяжки длинные, нитевидные Nеmаtocerа (длинноусые). |
| Определение семейств насекомых подотряда Вrасhусеrа (короткоусые) |
| 1(6). Ротовой аппарат самок хорошо развит; у самцов (слепней) часто редуцирован. |
| 2(3). Усики трехчленистые, их II членик имеет вид «площадки», а конечный — «палочки», состоящей из вторичных члеников; ариста отсутствует; радиальная пятая жилка вливается в задний край крыла далеко за его вершиной; большей частью крупные, коренастые мухи; длина тела 7—28 мм. Семейство Таbаnidае (слепни). |
| 3(2). Усики состоят из более или менее однотипных члеников; есть ариста, оперенная до самой вершины; медиальная жилка в вершинной трети крыла часто бывает изогнута дуговидно или под углом, в направлении к сливающимся 4-й и 5-й радиальным жилкам; анальная жилка не доходит до заднего края крыла; мухи средних и малых размеров, реже — крупные; длина тела 2,5—10 мм. Семейство Мuscidae (настоящие мухи). |
| 4(5). Окраска тела металлически-синяя или зеленая, черная или буро-серая; длина тела 4—18 мм. Семейство Саlliphoridae (синие и зеленые мясные мухи). |
| 5(4). Окраска тела, как правило, серая; брюшко с шашечным рисунком или с округлыми черными пятнами; длина тела 4,5—19 мм. Семейство Sarcophagidaе (серые мясные мухи). |
| 6(1). Ротовой аппарат у самок и самцов полностью редуцирован; голова большая; тело густо покрыто волосками различной окраски. |
| 7(8). Самки рождают живых личинок, паразитирующих в носовой полости, глотке и лобных пазухах животных; крупные и среднего размера, коренастые мухи; длина тела 8—16 мм. Семейство Оestridае (полостные оводы). |
| 8(7). Самки откладывают яйца, прикрепляют их на волосы копытных млекопитающих. |
| 9(10). Личинки паразитируют под кожей крупного рогатого скота и северных оленей; длина тела взрослых особей 12—16 мм. Семейство Нуроdermatidае (подкожные оводы). |
| 10(9). Самки приклеивают яйца либо на волосы однокопытных животных, либо на окружающие предметы и растения; личинки паразитируют в ротовой полости, желудке, двенадцатиперстной кишке хозяина; длина тела взрослых особей 9-16 мм. Семейство Gastrophilidае (желудочные оводы). |
Определение семейств насекомых подотряда Нетаtocerа (длинноусые) (по С.Н.Никольскому)
|
|
|
| 1(2). Ветвей жилок, упирающихся в край крыла, не менее 9 костальная жилка обходит все крыло, по заднему краю крыла она значительно тоньше, чем по переднему, хоботок заметнодлиннее головы. Семейство Culicidaе (комары). |
| 2(1). Ветвей жилок, упирающихся в край крыла, менее 9, костальная жилка развита лишь по переднему краю крыла, доходя только до его вершины, хоботок короче головы. |
| 3(4). Усики многочлениковые, не длиннее или лишь незначительно длиннее головы членики усиков тесно прилегают один к другому и покрыты тонкими волосками вилка Си без стебелька. Семейство Simuliidае (мошки). |
| 4(3). Усики значительно длиннее головы (исключение составляет род Leptoconos, у которого длина усиков равна длине головы) некоторые членики усиков несут у основания волоски вилка Си на длинном стебельке. Семейство Неlеidае (мокрецы). |
Определение семейств насекомых отряда пухопероедов
(по Н. Н. Плавильщикову)
| 1(2). Нижнечелюстные щупики есть; усики булавовидные или головчатые, 4—5 члениковые, расположены в бороздках боковых частей головы; паразиты птиц. Семейство Меnороnidае (пухоеды). |
| 2(1). Нижнечелюстных щупиков нет; усики обычно нитевидные, 3 или 5 члениковые, открыто выступают по бокам головы, в бороздки не спрятаны. |
| 3(4). Усики 5 члениковые, лапки с двумя коготками; паразиты птиц. Семейство Рhilopteridае (пероеды). |
| 4(3). Усики 3 члениковые; лапки с одним коготком; паразиты млекопитающих. Семейство Тrichodectidae (власоеды). |
|
|
|
У животных каждого вида паразитируют насекомые специфических видов этих семейств, например из семейства Тrichodectidае у собак паразитирует Тrichodectes canis, у лошади — T.egui, у овцы — Т. оvis, у крупного рогатого скота — Т. bоvis, у козы — Т. сарrае.
Из семейства Меnoponidaе на утках паразитирует вид Тrinotоn guerguedulae, на курах — Меnopon gallinае; на курах и индейках—М.stramineus, М. biseriatum, М. раllidum.
Из семейства Рhilopteridае у кур паразитируют: Goniocotes gigas и G. hologaster; у голубей—G. bidentatus; у уток—Аnаticolа crassicornis. Кроме того, у кур паразитируют Lipeurus pеterographus, L.variabilis и Goniodes dissimilis.
МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ ОБЪЕКТОВ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ
НА НАЛИЧИЕ ПАРАЗИТОВ
В современный период обострения экологических проблем важное значение приобретают вопросы охраны природы. Тем более, что в наше время воздействие человека на природу приобретает огромные размеры и нередко оказывает отрицательное влияние. Среди составных его немаловажное значение имеет биологическое загрязнение среды вирусами, бактериями, яйцами и личинками гельминтов, вредными насекомыми, клещами и т. д. Для контроля зараженности окружающей среды возбудителями паразитозов существует ряд методов исследований. Некоторые из них будут изложены ниже.
Исследование на наличие гельминтов проб почвы, воды, травы и навоза
Исследование проб почвы. С целью определения загрязненности яйцами и личинками гельминтов почвы ее берут около помещений, на пастбищах, прогонах и в других местах на глубине до 15—20 см. С каждого участка через каждые 10 м берут около 50 г почвы, перемешивают ее и со средней пробы отбирают 100 г почвы.
А. И. Корчагин (1984) с целью выявления в почве или в соскобах с твердых покрытий животноводческих помещений яиц аскаридат или стронгилят предлагает из отобранных образцов брать по 15—25 г почвы, а в качестве флотационной жидкости применять раствор нитрата аммония плотностью 1,3 или нитрата натрия плотностью 1,38. Пробу почвы помещают в центрифужную пробирку емкостью 250 мл, добавляют 100 мл 3%-ного раствора едкого натрия, перемешивают стеклянной палочкой и центрифугируют 3—5 минут со скоростью 1000 об/мин. После этого надосадочную жидкость сливают, а к осадку добавляют 150 мл воды, опять хорошо перемешивают и повторно центрифугируют. Надосадочную жидкость сливают, а к осадку добавляют 150 мл раствора нитрата аммония, перемешивают и фильтруют через капроновое или металлическое ситечко с размерами ячеек0,5х0,5 мм в другую пробирку и опять центрифугируют. После этого пробирки со смесью ставят в штатив и в каждую из них доливают раствор нитрата аммония до уровня ниже края пробирки на 2—4 мм. После этого берут предметные стекла размером 6х6 см, покрывают ими пробирки, в которые пипеткой добавляют раствор нитрата аммония до соприкосновения его с нижней поверхностью стекла. Через полчаса стекла снимают и подсчитывают количество яиц гельминтов в пробе.
|
|
|
При исследовании соскобов пробу берут в количестве 15—25 г с разных мест пола, нижних участков стен, перегородок через каждые 5 м. Для исследования соскобов применяют те же флотационные растворы и аналогичные подходы, что и при исследовании почвы.
Для выявления в почве личинок нематод применяют метод Бермана. С этой целью 30—40 г почвы помещают на молочные фильтры в воронки аппарата Бермана, заполняют теплой водой (40 °С). Через 3—4 ч содержимое переливают в пробирки, центрифугируют 1—2 минуты со скоростью 1000 об/мин, верхний слой жидкости в пробирках сливают, а осадок микроскопируют.
Исследование проб навоза на наличие яиц и личинок гельминтов проводят теми же методами, что и исследование почвы, но при исследовании навоза на наличие яиц гельминтов пробы фильтруют через металлические ситечки, чтобы крупные частицы не мешали при микроскопировании поверхностной пленки.
Жидкие и плотные фракции навоза на наличие яиц гельминтов исследуют по модифицированному методу А. А. Черепанова (1972). Из плотной фракции отбирают 100 г навоза, из жидкой фракции — 0,5 кг. Пробу плотной фракции навоза смешивают с небольшим количеством воды, растирают в ступке и фильтруют через марлю под напором струи воды из водопровода. Фильтрат помещают в пробирки и центрифугируют 3 мин со скоростью 1500 об/мин. Надосадочную жидкость в пробирке сливают, а к осадку добавляют раствор нитрата натрия или аммиачной селитры и повторно центрифугируют. После этого в пробирки наливают доверху флотационный раствор, покрывают предметными стеклами и через 20-25 минут их микроскопируют. После фильтрации жидкую фракцию навоза исследуют аналогичным образом.
Методика Н. А. Акулина для исследования травы на выявление личинок стронгилят. Перед началом исследований готовят оборудование: тазы диаметром 36 см и высотой 15 см; стеклянные воронки диаметром 20 см, к которым прикрепляются пробирки с помощью резиновых трубок; штатив для воронок; микроскопы; сита диаметром 31 см с высотой боковой стенки 12 см, размер ячеек сетки сита 1 мм; глазные пипетки, предметные стекла, раствор Люголя.
Отбирают пробы травы по 100—120 г и помещают их в сито. Его ставят в таз с теплой водой (22—24 °С). Между сеткой сита и дном таза должно оставаться расстояние в 5—7 см. Через 24 ч сито с травой вынимают из таза, а через полчаса воду из таза осторожно сливают, оставляя осадок в количестве примерно 1,5 л. После этого в штатив вставляют воронки с прикрепленными к ним пробирками и в воронки выливают осадок из таза, перед этим хорошо перемешав его. Через 2 ч пробирки от воронок отделяют и осадок в них исследуют с помощью микроскопа. При необходимости обездвиживания личинок применяют раствор Люголя, добавляя одну каплю его к капле исследуемой на предметном стекле жидкости. В пастбищный сезон для выявления личинок диктиокаул траву рекомендуется исследовать один раз в неделю, а для обнаружения стронгилят желудка и кишечника жвачных — через каждые две недели.
Исследование воды для обнаружения яиц и личинок гельминтов. При исследовании воды крупных водоемов в различных местах берут пробы в объемах от 0,5 до 10 л. С поверхности воды пробы берут малыми емкостями — 0,5-1 л через каждые 3-5 минут, чтобы через час средняя проба составила 10 л. Из колодцев, водопровода проба воды должна быть не менее 25 л. Целесообразно пробы воды брать в различные сроки дня и в различные периоды года для установления динамики загрязненности ее личинками и яйцами гельминтов.
Метод исследования воды по 3. Г. Васильковой (1955). Отбирают пробу воды и фильтруют ее через крупнопористые фильтры (диаметр пор 3—5 мкм). При этом задерживаются яйца и личинки гельминтов. В ветеринарной лаборатории воду можно фильтровать через воронку Гольдмана с применением насоса Комовского. В полевых условиях применяют ручной насос, при этом за 1 ч фильтруют 10 л воды, используя 10—20 фильтров. После этого фильтры помещают на большие предметные стекла и микроскопируют.
Для фильтрации можно применять также бумажные фильтры для исследования речной и сточной воды. При этом за 1 ч удается исследовать 2—3 л воды с применением около 50 фильтров.
Если нет фильтров, воронок Гольдмана и другого оборудования, в полевых условиях воду просто отстаивают в 10-литровой посуде, осадок сливают в пробирки, центрифугируют и исследуют.
Все описанные выше методы исследований почвы, навоза, воды и травы могут быть применены при гельминтологической оценке пастбищ при многих геогельминтозах.
|
|
|
