Главная | Обратная связь | Поможем написать вашу работу!
МегаЛекции

Оптические свойства дисперсных систем




В зависимости от соотношения между диаметром 2 r частиц дисперсной фазы и длиной волны l, оптические свойства меняются.

Если 2 r @ l, в этом случае преобладает дифракционное рассеивание света. Визуально наблюдаем опалесценцию.

Опалесценцию впервые наблюдали в 1857 г. М. Фарадей и в 1868 г. Дж. Тиндаль. Это явление получило название эффекта Фарадея-Тиндаля (конус Тиндаля).

 

Уравнение Рэлея:

 


J, J0 интенсивность рассеянного и падающего света;

Kp константа Рэлея;

Cv частичная концентрация золя;

l - длина волны;

r - радиус частицы.

 

Лабораторная работа № 3

Для студентов 1 курса стоматологического факультета

По дисциплине «Прикладная химия в стоматологии»

Тема: Методы очистки ВМС.

 

Цель: Изучить сущность и условия проведения диализа – как одного

из методов очистки природных биополимеров.

 

 

Ход работы:

Опыт 1. Очистка белков от низкомолекулярных примесей (NaCl).

 

Диализ – это освобождение коллоидов от низкомолекулярных органических и минеральных примесей с помощью диффузии последних через мембраны, практически непроницаемые для коллоидов.

 

Белки в растворе благодаря значительной величине белковых частиц не проходят через полупроницаемую мембрану. Этим свойством белка пользуются для его очистки от низкомолекулярных примесей.

 

Простейший диализатор

1 – стакан с дистиллированной водой

2 – коллодиевый мешочек с раствором белка и NaCl

3 – деревянный зажим

 

1. Проделывают с раствором белка биуретовую реакцию – для этого в пробирку беру 5 капель белка, добавляют 10 капель 10-го % раствора NaOH и 1-2 капли 1-го % раствора CuSO4. Наблюдается сине-фиолетовое окрашивание.

2. Наливают 10-15 мл раствора белка, содержащего NaCl, в коллодиевый мешочек и погружают его с помощью деревянных зажимов в стакан с дистиллированной водой таким образом, чтобы открытый край мешочка выступал над поверхностью воды.

3. Через 1 час берут из стакана 1-2 мл воды и убеждаются в наличии там ионов Cl- (реакция с AgNO3 в присутствии азотной кислоты – белый осадок) и в отсутствии белка (биуретовая реакция отрицательна).

 

Контрольные вопросы

1. Основные методы очистки высокомолекулярных соединений, сущность назначение:

- диализ;

- электродиализ;

- компенсационный диализ.

2. Методы изучения состава ВМС:

- электрофорез;

- электроосмос;

- хроматография.

3. Сефадексы и их использование для очистки белков.

 

Задания для самостоятельной работы

 

1. Написать формулы природных аминокислот, дать названия по ИЮПАК.

 

 

Методическое указание № 4

(для преподавателей)

Тема: Методы разделения и идентификации органических соединений.

Хроматографические методы анализа.

Радильная хроматография аминокислот.

 

Цель: Изучить принципы хроматографического разделения смесей

и провести радиальную хроматографию аминокислот.

 

 

Ход занятия:

 

I. Организационный момент ……………………………………….. 5 мин.

 

II. Разбор теории и практики по вопросам ………………………..10 мин.

1. Задачи хроматографического анализа.

2. Перечислите методы хроматографического разделения аминокислот.

3. Хроматографические методы анализа: принцип адсорбционной и распределительной хроматографии.

4. Как проводится радиальная хроматография на бумаге?

5. Какая цветная реакция лежит в основе хроматографии аминокислот на бумаге?

6. Гель – хроматография.

7. Тонкослойная хроматография.

III. Выполнение студентами лабораторной работы ………………….60 мин.

IV. Анализ хроматограмм…………………………...………………….10 мин.

V. Задание на дом ……………………………………………………….5 мин.

Всего……… 90 минут

 

Хроматографические методы

 

Это физико-химические методы разделения смесей, основанные на их распределении между двумя несмешивающимися фазами, одна из которых является неподвижной, а другая подвижной.

Неподвижная фаза – поверхностно-активное твердое тело или жидкость, закрепленная на поверхности инертного твердого носителя.

Подвижная фаза – газ или жидкость, которые проходят через слой неподвижной фазы.

Метод был открыт в 1903 году Цветом М.С. Он впервые применил данный метод для разделения пигментов листьев растений.

Адсорбционная хроматография – процесс разделения основан на различии в относительном сродстве соединений к твердому адсорбенту (неподвижная фаза), а подвижной фазой служит жидкость (колоночная адсорбционная хроматография, тонкослойная хроматография).

Распределительная хроматография вещества предполагает распределение веществ между двумя жидкими фазами (жидкостная распределительная хроматография). В данном виде неподвижная фаза – хроматографическая бумага; тонкослойная хроматография (пластина из инертного материала, стекло, алюминиевая фольга) или колоночная хроматография (Al2O3) – разделение ионов Cu2+, Fe3+.

Ионообменная хроматография предполагает обратимый обмен ионов, содержащихся в растворе на подвижные ионы ионитов.

Гель-хроматография (метод молекулярных сит). Неподвижной фазой являются малоактивные материалы – гели (сефадексы G – 25, G – 50, G – 100) с заданной пористостью, способные удерживать молекулы вещества с определенными размерами и формой, разделять их по способности проникать в поры геля, т. е. по их способности к диффузии.

Гель-хроматография широко используется для фракционирования биополимеров – белков, очистки белков, концентрирования их.

Афинная хроматография – в ее основе лежит свойство высокомолекулярных и других биологически активных соединений «узнавать» в любой смести свои строго определенные вещества и взаимодействовать с ними … - антиген узнает свое антитело; гормон – свой рецептор, фермент – свой субстрат.

 

Задачи хроматографического анализа:

- разделение и идентификация нескольких компонентов в одном образце (смесь аминокислот);

- количественная оценка веществ;

- удаление веществ, мешающих анализу;

- концентрирование белков-ферментов;

- анализ токсических веществ в окружающей среде.

 

ТСХ (тонкослойная хроматография) является одним из наиболее простых и эффективных экспресс-методов разделения и анализа веществ в биосредах, пищевых продуктах, биоматериалах. Методы не требует сложного оборудования и обладает высокой избирательностью и чувствительностью.

Процесс разделения основан на различии в относительном сродстве компонентов смеси к неподвижной фазе – сорбенту и происходит в результате перемещения подвижной фазы – элюента под действием капиллярных сил по слою сорбента, нанесенного на хроматографическую пластину (алюминиевая фольга).

Скорость перемещения вещества является постоянной величиной Rf (коэффициент распределения).

Rf = J / L

J – фронт, пройденный исследуемым веществом (от линии старта до середины пятна);

L – фронт, пройденный растворителем.

 

  LK


Фронт растворителя

 

 


jjjjjjLKK

Линия старта

 

 

Ассортимент сорбентов очень велик – силикагель, Al2O3, полиамиды, крахмал, гипс, агар-агар, СаSO4, ZnCO3.

Главное требование к сорбентам – отсутствие химического взаимодействия с анализируемым вещество.

Подвижная фаза – смесь растворителей разной полярности.

БУС; пропанол / Н2О

Методы ТСХ позволяет медикам проводить определение токсинов, осуществлять диагностику отравлений, исследовать продукты метаболизма токсических веществ в биологических средах (кровь, слюна, моча, спинномозговая жидкость).

 

Лабораторная работа № 4

Поделиться:





Воспользуйтесь поиском по сайту:



©2015 - 2024 megalektsii.ru Все авторские права принадлежат авторам лекционных материалов. Обратная связь с нами...