Возбудитель псевдотуберкулеза (Y. pseudotuberculosis)

Задачи:

1. Познакомиться с основными возбудителями кишечных инфекций.

2. Охарактеризовать эпидемиологию, основные клинические признаки, патогенетические процессы кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза.

3. Изучить общие направления лабораторной диагностики иерсиниозов.

План:

1. Общая характеристика энтеробактерий (семейство Enterobacteriaceae) 3

2. Энтеропатогенные иерсинии. 4

2.1. Возбудитель псевдотуберкулеза (Y. pseudotuberculosis) 5

2.2. Возбудитель кишечного иерсиниоза (Y. enterocolitica) 8

2.3. Микробиологическая диагностика иерсиниозов. 10

Вопросы для повторения:

1. Какие возбудители вызывают кишечные инфекции?

2. Какими биохимическими и культуральными свойствами обладают иерсинии?

3. Какие препараты применяются для лечения псевдотуберкулеза?

4. Какие методы используют при лабораторной диагностики иерсиниозов?

Литература для подготовки:

1. Воробьёв А.А., Быков А.С., Пашков Е.П., Рыбакова A.M. Микробиология (Учебник).- М: Медицина, 1998.

2. Медицинская микробиология (Справочник) под ред. В.И.Покровского, Д.К.Поздеева. - М: ГОЭТАР, «Медицина», 1999.

3. Микробиология с вирусологией и иммунологией / Под ред.Л.Б.Борисова, А.М.Смирновой. – М., 1994

4. Микробиология и иммунология / Под ред.А.А.Воробьева.- М., 1999

5. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии / Под ред. Л.Б.Борисова.- М., 1984.

6. Вирусология. В 3-х тт./ Под ред.Б.Филсца, Д.Найпа.- М, 1989.

7. Вирусные, хламидийные и микоплазменные заболевания. В.И.Козлова и др.- М.: «Авиценна», 1995.

Лектор Митрофанова Н.Н.

Общая характеристика энтеробактерий (семейство Enterobacteriaceae)

Семейство Enterobacteriaceae является самым многочисленным семейством патогенных и условно-патогенных бактерий. Объединяет более 20 родов, более 100 видов Гр(-). Роды: Escherichia, Shigella, Salmonella, Yersinia, Klebsiella, Proteus, Enterobacter, Erwinia.

Оно включает в себя подвижные (перетрихии) или неподвижные спорообразующие палочки. Некоторые имеют капсулы. Энтеробактерии аэробы или факультативные анаэробы. Большинство растёт на простых питательных средах. Образуют S-колонии, иногда R-формы (характерны для шигелла Зонне). Большинство энтеробактерий не пигментировано, хотя некоторые виды имеют розовую, красную, желтую, голубую пигментацию. Для идентификации энтеробактерий используют следующие биохимические тесты: оксидазный тест, каталазный тест, ферментация, углеводов, восстановление нитратов, реакция с метиловым красным (РМК), образование индола, утилизация цитрата, гидролиз мочевины, образование сероводорода, тест на подвижность, реакция Фогеса-Проскауэра (РФП) и др. Для всех энтеробактерий характерно каталаза+, оксидаза-, разлагают глюкозу и др. углеводы, многоатомные спирты с образованием кислоты и газа (некоторые виды образуют только кислоту), все восстанавливают нитраты.

Антигенная структура. Все виды семейства имеют соматический О-антиген, жгутиковый Н-антиген, у некоторых имеется К-антиген.

Факторы патогенности. 1) экзотоксины: цитотоксины, энтеротоксины (термостабильные, термолабильные); 2) эндотоксины; 3) факторы инвазивности; 4) факторы адгезии; 5) ферменты.

Семейство обладает большой степенью гетерогенности. Процент ГЦ-пар в ДНК, определяющих степень гетерогенности, варьирует от 38-42 % (роды Proteus, Providencia) до 52-60 % (роды Klebsiella, Entetrobacter). Центральное положение занимает род Escherichia (50—52 % ГЦ-пар), который является типовым родом семейства. Близкородственное к нему положение занимают роды Shigella (50—52 % ГЦ-пар) и Salmonella (50-53 % ГЦ-пар).

Условно-патогенные энтеробактерии составляют 80% всез изолятов, с которыми работают в лаборатории. Вызывают до 50% всех септицимий, 70% гастроэнтеритов, 70% инфекций мочевого пузыря.

Энтеробактерии обитают на растениях, в почве, входят в состав микробных ассоциаций кишечника человека и животных. Имеются классические патогенны и условно-патогенные виды. Энтеробактерия Эрвиния не встречается в желудочно-кишечном тракте человека, обитает на растениях. Но при попадании к человеку с раствором вызывает септицимию и летальный исход. Поднимается температура, понижается артериальное давление. Повторное проникновение эндотоксина может вызвать кишечное кровотечение. Меняется формула крови. Сначала – лейкопения, затем – лейкоцитоз.

Энтеропатогенные иерсинии

К энтеропатогенным иерсиниям относят возбудителей псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза: Y. pseudotuberculosis и Y. enterocolitica соответственно. Дифференциация между видами осуществляется по биохимическим свойствам и антигенной структуре. Особенность экологии. Энтеропатогенные иерсинии являются сапронозами. Способны существовать в окружающей среде. Обладают свойствами, которые определяют особенности эпидемиологии вызываемых ими заболеваний:

1) способностью к сапрофитическому существованию в окружающей среде;

2) психрофильностью.

Оптимум роста +22...—25 °С. Сохраняют жизнеспособность при температурах —15...— 25 °С. Размножаются при температуре +4 °С. Энтеропатогенные иерсинии способны размножаться в воде, почве, растениях, в которые они через корневую систему попадают из почвы. Размножение при низких температурах сопровождается многомесячной (до полугода) продолжительностью стационарной фазы, что способствует накоплению большой биомассы бактерий. Популяция иерсинии во внешней среде поддерживается свободноживущими инфузориями вида Tetrahymena pyriformis. При этом происходит селекция устойчивых к фагоцитозу бактерий.

Генетическая детерминация синтеза факторов патогенности и их температурная регуляция обеспечивают возможность перехода эн-теропатогенных иерсинии из внешней среды к существованию внутри организма.

Начальные этапы инфекции, а именно трансцитоз слизистой кишечника через М-клетки (IV тип), осуществляется за счет функционирования inv-гена хромосомной локализации, который функционирует при температурах ниже 37 °С, вырабатывая белок наружной мембраны клеточной стенки, необходимый для взаимодействия с М-клетками. Распространение микробов по организму связано с функционированием генов плазмиды (молекулярная масса 45 мДа), которые активны при температуре 37 °С. Эти гены детерминируют синтез цитотоксина, повреждающего клетки стенки кишечника, и V- и W-антигенов, обеспечивающих размножение микробов в фагоцитах, что вызывает незавершенный фагоцитоз.

Возбудитель псевдотуберкулеза (Y. pseudotuberculosis)

Псевдотуберкулез — инфекционное заболевание, характеризующееся полиморфностью клинической картины, затяжным течением, аллергинацией организма.

Возбудитель псевдотуберкулеза Y. pseudotuberculosis впервые был описан в 1883 г. Л. Маляссе и В. Виньялем.

Морфология. Палочка, с биполярным окрашиванием, размером 0,8-2x0,4-0,6 мкм, подвижная, т. е. имеет жгутики, при температурах ниже 37°С. Образует капсулу.

Культуральные свойства. Хорошо растет на простых питательных средах. Оптимум размножения 22-28 °С. При температурах ниже 37°С на плотных средах образует колонии в S-форме. При температуре 37°С — колонии в R-форме. На жидких средах образует пленку.

Физиология. Биохимически активен. Основные биохимические признаки, необходимые для идентифиации:

— продукция уреазы,

— ферментация рамнозы,

— отсутствие ферментации сахарозы,

— отсутствие продукции индола,

— отрицательная реакция Фогеса—Проскауэра.

Биохимически внутри рода однороден.

Возбудитель устойчив во внешней среде: в воде при комнатной температуре выживает до 1,5 месяцев, при +4 °С — до полугода; в овощах (капуста, морковь, лук) и фруктах выживает несколько месяцев. Малоустойчив к нагреванию при 60°, при кипячении, к УФ-свету, к дезинфектантам.

Антигенная структура. Обладает О-антигеном. на основании строения которого подразделяется на 8 сероваров, а также Н-антигеном.

Эпидемиология. Резервуаром возбудителя в природе являются многие виды млекопитающих (рогатый скот, кошки) и птиц, грызуны (мыши, крысы), выделяющие микроб с испражнениями, а также вода, почва, в которых происходит накапливание микроба. Человек заражается водным и алиментарным путями Основными факторами передачи являются вода и овощи. Овощи заражаются Y. pseudotuberculosis в результате их загрязнения в хранилищах испражнениями инфицированных возбудителем мышей, а также непосредственно из почвы и воды. Заражение человека от больного или носителя не происходит. Естественная восприимчивость людей к возбудителю высокая. Болезнь распространена повсеместно, возникает в виде спорадических и эпидемических вспышек имеет сезонность (февраль-март). В районе Дальнего Востока РФ заболевание протекает в виде эпидемических вспышек в генерализованной форме под названием Дальневосточная скарлатиноподобная лихорадка.

Патогенез и клиника заболевания. Инкубационный период 3-10 дней. Заболевание протекает в виде локальной и генерализованной форм. Начало острое или подострое, сопровождается лихорадкой. Инвазировав слизистую кишечника трансцитозом через М-клетки, выделяя при этом цитотоксин, Y. pseudotuberculosis вследствие незавершенности фагоцитоза попадает в мезентериальные лимфатические узлы, вызывая мезентериальный лимфаденит. Следствием развития мезентериального лимфаденита являются боли в эпи-гастральной области, симптомы раздражения брюшины, которые имитируют симптомы острого аппендицита.

В случае прорыва лимфатического барьера наступает бактериемия, в результате которой микроб разносится по организму, вызывая образование гранулем и микроабсцессов в макрофагальных элементах печени, селезенки, легких, суставов. При этом происходит аллергизация организма. На 1-6-й день появляется розеолезная сыпь. Возможен летальный исход.

Иммунитет. Непрочный, нестерильный. Антитела не обладают протективной активностью. В организме происходит развитие ГЗТ.

Микробиологическая диагностика. Применяют бактериологический и серологический методы исследования. Материалами для исследования при бактериологическом методе являются испражнения, кровь, желчь, суставная жидкость, бронхиальная жидкость. Материал помещают в фосфатный буфер и подвергают холодовому обогащению при температуре 4°С в течение 21 дня, периодически делая высев на плотные среды (Эндо, Серова).

Серологическое исследование проводят на 2-й неделе и 3—5-й неделе постановкой РНГА и ИФА.

Профилактика и лечение. Специфическая профилактика не разработана. Лечение — этиотропная антибиотикотерапия.

Не специфическая профилактика включает: постоянный санитарный контроль за водоснабжением, технологическим режимом обработки и хранения пищевых продуктов, борьбу с грызунами.