Главная | Обратная связь | Поможем написать вашу работу!
МегаЛекции

Спектрофотометрическое определение каротинов в моркови




 

Цель работы: Определение каротинов глюкозы в моркови.

 

α, β и γ-каротины являются провитаминами витамина А.

По химическому строению каротины характеризуются триметилциклогексениловых циклов, скрепленных между собой цепью из 22 атомов углерода.

Каротины содержатся в моркови, репе, салате, листьях крапивы и многих плодах и фруктах. Наличие в их моллекулах сопряженных двойных связей обуславливает характерное ярко-желтое окрашивание этих соединений. Попадая в организм человека, каротины под влиянием фермента каротиназы, превращаются в витамин А (ретинол).

Определение каротинов основано на их экстракции органическим растворителем и фотометрии экстракта на длине волны 470 нм.

 

 

Аппаратура и реактивы

 

Спектрофотометр или фотоколориметр;

Стандартный раствор каротина в хлороформе;

Хлороформ.

 

Порядок выполнения работы

 

  1. Ознакомление с работой и устройством прибора по инструкции по эксплуатации прибора.
  2. Подготовка пробы для анализа.
  3. Определить оптическую плотность проб и стандартных растворов каротина.
  4. Определить процентное содержание каротина в моркови (или других овощах его содержащих).

 

Подготовка прбы к анализу

 

 

Отобранную морковь измельчают. Навеску 25 г измельченной моркови помещают в плоскодонную колбу на 250 мл и заливают 100 мл хлороформа. Встряхивают на аппарате для встряхивания проб в течении 30 мин. Полученную смесь фильтруют через складчатый фильтр в мерный цилиндр с протертой пробкой. Отмечают объем V1 хлороформеного экстракта.

 

Фотометрирование хлороформного экстракта

 

На спектрофотометре выставляют длину волны 470 нм. В рабочую кювету наливают хлороформеный экстракт, в сравнительную хлороформ. Выставляют ноль оптической плотности по хлороформу, затем фотометрируют хлороформеный экстракт. Записывают значение оптической плотности А1.

 

Градуировка прибора

 

1 г каротина помещают в мерную колбу на 100 мл, растворяют в 30-40 мл хлороформа, доводят до метки хлороформом и ставят на 30 мин. в темное место. Фотометрируют раствор каротина и определяют его оптическую плотность. Из исходного раствора – каротина готовят новый раствор в хлороформе такой концентрацией C2, чтобы его оптическая плотность А2 не отличалась от А1 более чем на 30%. Такой способ называется методом одноточечной калибровки.

 

Определение процентного содержания каротина

 

Процентное содержание каротинов в моркови определяют по формуле:

, % (1)

 

Контрольные вопросы

 

  1. Выбор длины волны, светофильтра, длины кюветы для измерения концентрации веществ.

 

Литература

 

1. Методическое пособие по физико-химическим методам анализа. Орел ГТУ, 2001.

2. Цитович И.К. Курс аналитической химии. – М.: Высшая школа, 1994.

3. Васильев В.П. Аналитическая химия, ч.2. Физико-химические методы анализа. М.: Высшая школа, 1994.

4. Дорохова Е.П., Прохорова Г.В. Аналитическая химия. Физико-химические методы анализа/ Под ред. О.М. Петрухина. – М.: Химия, 1987.

5. Практикум по физико-химическим методам анализа/ Под ред. О.М. Петрухина. – М.: Химия, 1987.

 

 


 

Лабораторные работы по хроматографическому анализу

 

Лабораторная работа №1

 

Разделение и обнаружение ионов методом бумажной хроматографии

 

Цель работы: Приобретение навыков разделения и обнаружения ионов методом бумажной хроматографии.

 

Для разделения смесей катионов методом бумажной хроматографии используют различие в значении Rr при разделении катионов между подвижной и неподвижной (водой адсорбированной на бумаге) и подвижной(смесью ацетона с соляной кислотой фазами.

 

Аппаратура и реактивы

 

Стеклянный циллиндр с крышкой;

Хроматографическая бумага 20х2 см (можно фильтровальная, с расположением волокон);

Катион Реагент

CO2+ Тиацианат калия KCNS (нас.)

Ni2+ Диметилглиоксим, аммиак (пары)

Cu2+ Гексоцианоферрат (II) калия, 10% раствор

Pb2+ Иодид калия, 10% раствор

Zn2+ Дитизон, 1% раствор в хлороформе

Bi3+ Смесь 8-оксихинолина и иодида калия

Al3+ Ализарин, аммиак (пары)

Cd2+ Сульфид натрия

Растворитель-смесь (по объему) HCl (конц.) – 8%, ацетона – 87% и воды – 5%.

Раствор KOH, 1,25 моль/л;

Конические колбы, водяная баня, бюретки, мерные циллиндры, песочные часы (1 мин).

 

Порядок выполнения работы

 

В стеклянный цилиндр с крышкой наливают 10-15 мл растворителя. На полоске хроматографической бумаги длиной 20 см и шириной 2 см проводят стартовую линию на расстоянии примерно 2 см от края, на которую в центре капилляром наносят каплю исследуемого раствора так, чтобы диаметр пятна не превышал 2-3 мм. Пятно обводят карандашом и высушивают над песчаной баней. Эту операцию повторяют 2-3 раза.

Полоску бумаги с нанесенным раствором опускают в цилиндр так, чтобы ее конец был погружен в раствор (бумажная полоска не должна касаться стенок цилиндра). При комнатной температуре время хроматографирования составляет 1,5-2 ч. После того как растворитель отойдет от линии старта не менее, чем на 10 см, процесс прекращают, полоску бумаги вынимают из циллиндра и тщательно высушивают над песчаной баней. Измеряют расстояние Д между стартовой линией и фронтом растворителя по величине Rf, вычисляют высоту подъема l зоны каждого катиона из заданной комбинации.

 

Катион Ni3+ Al3+ Co2+ Pb2+ Cu2+ Zn2+ Cd2+ Bi2+ Fe3+
Rf 0,13 0,15 0,54 0,70 0,77 0,94 0,1 0,1 0,1

 

Для обнаружения катиона капилляром с реагентом прикасаются к участку хроматограмы на высоте размещения зоны данного компонента. Появление характерной окраски подтверждает присутствие катиона в исследуемом растворе.

Контрольные вопросы

 

  1. Для каких целей применяется распределительная хроматография?
  2. Что в данной работе служит подвижной фазой?

 

Литература

 

1. Методическое пособие по физико-химическим методам анализа. Орел ГТУ, 2001.

2. Цитович И.К. Курс аналитической химии. – М.: Высшая школа, 1994.

3. Васильев В.П. Аналитическая химия, ч.2. Физико-химические методы анализа. М.: Высшая школа, 1994.

4. Дорохова Е.П., Прохорова Г.В. Аналитическая химия. Физико-химические методы анализа/ Под ред. О.М. Петрухина. – М.: Химия, 1987.

5. Практикум по физико-химическим методам анализа/ Под ред. О.М. Петрухина. – М.: Химия, 1987.


 

Лабораторная работа №2

 

Поделиться:





Воспользуйтесь поиском по сайту:



©2015 - 2024 megalektsii.ru Все авторские права принадлежат авторам лекционных материалов. Обратная связь с нами...