Контроль состояния животных при исследовании острой токсичности фармпрепарата

Исследование кумуляции. При выборе доз для исследования хронической токсичности фармакологического вещества следует учитывать его кумулятивное действие. Поэтому до проведения хронических токсикологических экспериментов рекомендуется определить индекс кумуляции фармакологического вещества, т. е. отношение ЛД₅₀ при однократном введении к ЛД₅₀ при кратном введении. Для этой цели можно использовать различные методы, основанные на учете гибели животных при повторном введении фармакологического вещества.

Предпочтение следует отдать изучению кумуляции методом Lim’а с соавторами, позволяющим оценить не только кумулятивные свойства, но и привыкание (Таблица 13).

Схема изучения кумуляции методом субхронической токсичности по Lim’у с соавторами следующая.

Таблица 13

Схема изучения кумуляции методом субхронической токсичности
по Lim’у с соавторами

Суммарная доза за 24 дня = 12,8 ЛД₅₀, максимальная продолжительность эксперимента 24±4 дня.

,

где К_K – коэффициент кумуляции, ЛД₅₀ n – средняя смертельная доза при n-кратном введении, ЛД₅₀1 – средняя смертельная доза при однократном введении.

При этом К_K < 1 говорит о кумуляции, К_K > 1 – характеризует привыкание.

Изучение хронической токсичности

Целью хронических фармакотоксикологических экспериментов является характеристика степени повреждающего действия фармакологического вещества при его длительном введении, выявление наиболее чувствительных органов и систем организма, а также исследование степени обратимости вызываемых им повреждений.

Таблица 14

Продолжительность введения фармакологического вещества экспериментальным животным в зависимости от длительности его применения у человека

Продолжительность введения фармакологического вещества при изучении хронической токсичности зависит от предполагаемой длительности при применении в клинике (Таблица 14).

Пути введения фармвещества. Основным способом введения фармакологического вещества является способ, рекомендованный для клинического изучения. Фармакологическое вещество, предназначенное для применения внутрь, вводят лабораторным животным через зонд в желудок или закладывают на корень языка, т. к. это обеспечивает более точное дозирование, чем добавление фармакологического вещества в корм. Количество фармакологического вещества, получаемого животным за один прием, рассчитывают на единицу массы тела животного в пересчете на действующее вещество, (можно вести расчет на единицу поверхности тела). Фармакологическое вещество вводят в виде субстанции и той лекарственной формы, которая будет передана в клинику.

Исследуемые дозы. Хроническую токсичность фармакологического вещества при его системном применении исследуют в двух-трех (как правило, в трех) дозах. При выборе доз руководствуются результатами, полученными при исследовании острой токсичности фармакологического вещества, его способностью вызывать кумулятивный эффект, а также максимальными суточными дозами, в которых фармакологическое вещество рекомендовано для клинического изучения.

Введение высшей дозы предполагает выявление возможных токсических эффектов и гибель части животных. Эта доза может быть рассчитана с учетом ЛД₅₀, полученной при изучении острой токсичности исследуемого вещества для данного вида лабораторных животных. Минимальная доза должна быть близка к терапевтической дозе, рекомендуемой для клинического изучения. Третья доза является промежуточной. При постановке экспериментов обязательно наличие контрольной группы животных, содержащихся в таких же условиях, как и подопытные, и получающих вспомогательные ингредиенты, входящие в состав исследуемой лекарственной формы фармакологического средства, тем же способом, при котором изучают токсичность самого вещества.

Фармакологические вещества, предназначенные для ежедневного применения у человека, вводят экспериментальным животным 7 дней в неделю.