Главная | Обратная связь | Поможем написать вашу работу!

Знакомство с основными формами микроорганизмов»

Методическая разработка

практического занятия для учащихся отделения

«Медико-диагностическое дело»

по дисциплине «Микробиология с микробиологическими исследованиями»

Практическая работа №1

Тема: «Организация бактериологической лаборатории, правила работы в ней. Правила работы с патогенными биологическими агентами (ПБА).

Знакомство с основными формами микроорганизмов»

Составила преподаватель Солтысова Т.В.

Минск

Практическая работа №1

Тема: «Организация бактериологической лаборатории, правила работы в ней.

Правила работы с патогенными биологическими агентами (ПБА).

Знакомство с основными формами микроорганизмов»

Цель занятия:

Познакомить учащихся с организацией бактериологической лаборатории, общими требованиями к работе в лаборатории, правилами поведения в лаборатории, правилами работы с ПБА, требованиями к средствам индивидуальной защиты; с устройством микроскопа и правилами работы с ним; с основными формами микроорганизмов.

Самостоятельная работа:

I. Знакомство с организацией баклаборатории, правилами и общими требованиями к работе.

II. Изучение правил работы с патогенными биологическими агентами (ПБА) в соответствии санитарными правилами СП 17-129 РБ 2000.

III. Знакомство с требованиями к индивидуальным средствам защиты (СИЗ).

IV. Знакомство с устройством и правилами работы с микроскопом.

V. Знакомство с основными формами микроорганизмов.

Методические указания к практической работе:

Устройство бактериологической лаборатории:

- лаборатория должна располагаться в изолированном блоке лабораторного корпуса;

- обязательное наличие двух выходов: один - для доставки ПБА, второй - для передвижения персонала и доставки проб (исследования на СПМ) и одно передаточное окно - доставки проб для исследования на СПМ;

- в составе лаборатории выделяют «чистую» и «заразную» зоны;

- «заразная» зона включает: помещение для регистрации и приема ПБА, комнаты для проведения бактериологических, паразитологических и серологических исследований; «заразную» автоклавную и моечную;

- «чистая» зона включает: «чистую» автоклавную, моечную, средоварочную, боксы, гардероб, комнаты для персонала, материальную, туалет, лаборатории для проведения исследований на СПМ, душевую, комнаты для хранения уборочного инвентаря и дезинфектантов;

- поверхность стен помещений должна иметь хорошо моющееся покрытие (плитка); полы с плиточным или линолеумным покрытием;

- рабочие помещения должны иметь естественное и искусственное освещение;

- отопление, водоснабжение и канализация централизованные;

- помещения лаборатории должны использоваться строго по назначению.

Правила работы в бактериологической лаборатории:

1. К работе допускаются лица, прошедшие специальный инструктаж по вопросам режима работы в баклаборатории.

2. Каждый сотрудник должен иметь индивидуальную одежду (халат, шапочку).

3. ЗАПРЕЩЕНО выходить из лаборатории в спецодежде и надевать на неё верхнюю одежду.

4. Чистота помещения, рабочего места и строгое выполнение правил личной гигиены в баклаборатории обязательны.

5. Недопустимо курение, приём пищи.

6. Хранение личных вещей должно быть организовано в комнате для персонала.

7. После окончания работы обязательно проведение влажной уборки всех помещений баклаборатории.

8. Запрещено сливать инфицированные жидкости и исследуемый материал в канализацию без предварительного обеззараживания.

9. Не допускать лишних хождений, резких движений, посторонних разговоров.

Правила работы с патогенными биологическими агентами (ПБА):

1. Весь материал, поступающий в баклабораторию, должен рассматриваться как инфицированный.

2. Доставка в лабораторию материала для исследования осуществляется в специальных контейнерах, биксах или сумках-холодильниках; доставляемые емкости с жидким материалом должны быть закрыты резиновыми или пластмассовыми пробками, исключающими выливание содержимого во время транспортирования; дно контейнеров, содержащих емкости с ПБА должно быть покрыто адсорбирующим материалом (марлевая салфетка, ткань, вата и прочее); не допускается доставка материала в хозяйственных сумках, чемоданах, портфелях и др. предметах личного пользования.

3. Прием и сортировка материла, доставленного на исследование, проводится с соблюдением мер предосторожности; персонал диагностических лабораторий должен использовать маску и резиновые перчатки; емкости с ПБА помещаются на поднос или лоток, покрытый многослойной марлевой салфеткой, смоченной дезинфицирующим раствором; запрещается прикасаться руками к исследуемому материалу.

4. В случае аварии при работе с ПБА сотрудники лаборатории обязаны поставить в известность её руководителя и провести под его руководством дезинфекционные мероприятия в соответствии с действующими нормативными документами и санитарными правилами. «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV группы патогенности и гельминтами» (СП 17-129 РБ 2000).

5. При пипетировании необходимо пользоваться только резиновыми грушами или автоматическими устройствами; пипетирование ртом в лаборатории строго запрещено;

6. Во время работы все инструменты, имевшие контакт с ПБА, фламбируются в пламени горелки или сбрасываются в ёмкости с дезинфицирующим раствором или специальные ёмкости для последующего обеззараживания; использованные пипетки полностью (вертикально) погружаются в дезинфицирующий раствор, избегая образования в каналах пузырьков воздуха; емкости для обеззараживания должны быть промаркированы

7. Остатки ПБА, использованная посуда, твердые отходы из «заразной» зоны лаборатории должны собираться в закрывающиеся емкости и передаваться в автоклавную или дезинфицироваться на месте; перенос ПБА и использованной посуды для обеззараживания должен осуществляться в закрывающихся емкостях, исключающих инфицирование во время транспортировки.

8. Пробирки и флаконы со сгустками крови обеззараживаются только с использованием дезинфицирующего раствора; при погружении в дезинфицирующий раствор емкостей со сгустками крови необходимо соблюдать осторожность; емкость берут анатомическим пинцетом так, чтобы одна его бранша вошла немного внутрь, и погружают её в наклонном положении до полного заполнения раствором; при правильном погружении воздушных пузырей не образуется, емкость опускается на дно. После погружения всех емкостей пинцет обеззараживают; запрещается удалять необеззараженные сгустки крови из пробирок и флаконов встряхиванием.

9. По окончанию работы все объекты, содержащие ПБА, должны быть убраны в хранилища (холодильники, термостаты, шкафы); в обязательном порядке производится дезинфекция рабочих поверхностей столов;

Рабочий стол по окончанию работ с ПБА, обрабатывается дезинфицирующим раствором или 70-ти процентным спиртом, или фламбируются горячим факслом;

10. Остатки ИБА уничтожаются автоклавированием или путем погружения в дезинфицирующие растворы, при необходимости сохраняются в опечатываемом холодильнике для хранения про; засеянные питательные среды (посевы) помещают в опечатываемые термостаты, холодильники, шкафы при соответствующих методикам условиях;

11. По окончании отдельных этапов исследования персонал обязан обработать руки 70% раствором спирта или дезинфектантом и вымыть руки с мылом: по окончании рабочей смены следует обработать и вымыть руки, снять специальную одежду и снова вымыть руки; запрещается выходить из рабочих помещений в специальной одежде.

12. В «заразной» зоне лаборатории запрещается: оставлять после окончания работы на рабочих местах нефиксированные мазки или посуду с ПМБ; переливать жидкий инфекционный материал через край сосуда (пробирки, колбы, флакона); содержать комнатные цветы.

13. Запрещается оставлять отработанный материал, содержащий ПБА, на следующий день и сбрасывать в канализацию.

14. Перед уходом необходимо проверить состояние всех лабораторных помещений (окна, форточки, электрооборудование, краны водоснабжения), термостаты и холодильники с инфицированным материалом опечатываются.

Мероприятия при локализации и ликвидации последствий аварии:

- при аварии работу с ПБА немедленно прекращают, ставят в известность руководителя лаборатории или лицо, его замещающее;

- все открытые части тела обрабатывают дезинфицирующим раствором или 70⁰ спиртом; при попадании инфекционного материала на слизистые оболочки их немедленно обрабатывают: глаза – 1% раствором борной кислоты, несколькими каплями и 1% раствора азотнокислого серебра или струей воды; в нос закапывают, а рот и горло прополаскивают 0,05% раствором борной кислоты;

- проводится обезвреживание места аварии; по окончанию работ защитная одежда замачивается в дезинфицирующем растворе; все сотрудники, находившиеся в зоне аварии, должны принять душ;

- при аварии во время работы на центрифуге крышку медленно открывают только через 30-40 минут (после оседания аэрозоля); центрифужные стаканы и разбитое стекло помещают в дезинфицирующий раствор, поверхность крышки, внутренние части центрифуги, ее наружную поверхность дезинфицируют; дезинфекция центрифуги проводится после отключения ее от электросети;

- при аварии с разбрызгиванием ПБА, лица находящиеся в помещении, где произошла авария, покидают помещение, обрабатывают открытые части тела и слизистые, замачивают СИЗ в дезинфицирующем растворе, принимают душ; мероприятия по ликвидации последствий аварии осуществляют сотрудниками лаборатории, одетые в противочумный (хирургический халат), косынку, сапоги (галоши, пластиковые бахилы), резиновые перчатки, очки и респиратор;

- о происшедшей аварии и проведенных мероприятиях зав. лабораторией направляет докладную записку на имя руководителя организации и председателя комиссии по контролю за соблюдением требований биологической безопасности;

- в лабораториях для ликвидации последствий аварии, а также профилактики возможного поражения персонала, необходимо иметь аптечку для оказания экстренной медицинской помощи, запас дезинфицирующих средств, СИЗ;

- если контакт с кровью или другими жидкостями произошел с нарушением целостности кожных покровов (укол, порез) пострадавший должен: снять перчатки рабочей поверхностью внутрь (если они были надеты); выдавить кровь из раны; поврежденное место обработать одним из дезинфектантов (70⁰ спирт, 5% настойка йода., 3% раствор перекиси водорода и другое); руки вымыть под проточной водой с мылом, а затем протереть 70% спиртом; на рану наложить пластырь, надеть напальчники; при необходимости продолжить работу и надеть новые перчатки;

- в случае загрязнения кровью или другой биологической жидкостью без повреждения кожи: обработать кожу одним из дезинфектантов (70⁰ спирт, 3% перекись водорода, 3% раствором хлорамина); обработанное место вымыть водой с мылом и повторно обработать спиртом;

- при попадании биоматериала на слизистые оболочки: полость рта прополоскать 70⁰ спиртом; в полость носа закапать 20-30% раствор альбуцида; глаза промыть водой (чистыми руками), закапать 20-30% раствором альбуцида;

- при попадании биоматериала на халат, одежду, обувь: обеззараживаются перчатки перед снятием одежды; при незначительных загрязнениях биологической жидкостью одежда снимается и помещается в пластиковый пакет и направляется в прачечную; при значительном загрязнении одежда замачивается в одном из дезинфектантов (кроме 6% перекиси водорода и нейтрального гидрохлорида кальция, который разрушает ткани); личная одежда, загрязненная биологической жидкостью, подвергается стирке в горячей воде (70⁰) с моющим средством; кожа рук и других участков тела под местом загрязненной одежды протирается 70⁰ спиртом, затем промывается с мылом и повторно протирается спиртом; загрязненная обувь двукратно протирается ветошью, смоченной в растворе одного из дезинфицирующих средств;

- для оказании экстренной медицинской помощи при аварийной ситуации, сопровождающейся нарушением целостности кожных покровов, попаданием биологического материала на слизистые на рабочем месте, необходимо иметь аптечку с напальчниками (перчатки), лейкопластырем, перевязочными средствами, ножницами, спиртом 70⁰, альбуцидом 30%, настойкой йода 5%, перекисью водорода 3%;

- за лицами, находившимися в помещении, где произошла авария, устанавливается медицинское наблюдение на срок инкубационного периода;

- в лаборатории должен быть журнал регистрации аварий, где отмечается дата, время, место, характер аварии, фамилия, имя и отчество лиц, находившихся непосредственно в зоне ее воздействия, а также проведенные мероприятия.

Требования к порядку использования СИЗ:

- сотрудники лаборатории должны быть обеспечены медицинскими халатами, шапочкой, сменной обувью и другими СИЗ в зависимости от характера выполняемых работ;

- СИЗ храниться отдельно от личной одежды;

- при работе в боксах используется хирургический халат, длиной до нижней трети голени, резиновые перчатки, резиновая обувь;

- смена рабочей одежды производится по мере загрязнения, но не реже 1 раза в неделю;

- перед сдачей в стирку одежда обеззараживается.

Для обнаружения микроорганизмов и изучения их морфологических свойств используют световые, бинокулярные, люминесцентные, фазово-контрастные, электронные микроскопы.

Устройство светового микроскопа:

механическая часть:

а) основание;

б) тубусодержатель;

в) тубус;

г) револьвер;

д) предметный столик с зажимами;

е) макровинт (для поиска объекта и грубой настройки);

ж) микровинт (для тонкой подстройки);

оптическая часть:

а) объектив (сухой, иммерсионный);

б) окуляр;

! Общее увеличение микроскопа равно произведению увеличения окуляра и объектива.

осветительная часть:

а) конденсор (обеспечивает фокусировку света в области рассматриваемого препарата);

б) диафрагма (регулирует поток световых лучей);

в) зеркало (направляет свет от осветителя в конденсор).

Правила работы с микроскопом:

Работа с микроскопом требует строгого соблюдения правил работы с ним. При микроскопировании в качестве источника света используется естественное освещение и искусственные источники света. При рассматривании неокрашенных препаратов пользуются суженой диафрагмой и опущенным конденсором. Окрашенные препараты микроскопируют при поднятом конденсоре и открытой диафрагме.

1. С помощью зеркала, конденсора и диафрагмы обеспечивают хорошее освещение.

2. Помещают препарат на предметный столик микроскопа и, используя объектив х8, получают четкое изображение.

3. На препарат капают иммерсионное масло (не касаясь пипеткой препарата). После смены объектива ×8 на ×90 (иммерсионный объектив) и под контролем глаза с боку, осторожно отпускают его до прикосновения с покровным стеклом.

4. Глядя в окуляр, медленно с помощью макровинта поднимают тубус микроскопа до получения четкого изображения, после чего с помощью микровинта (пол-оборота в одну сторону или другую) добиваются наилучшего изображения.

РЕКОМЕНДУЕТСЯ во избежание утомления зрения оба глаза держать открытыми.

5. По окончании микроскопирования поднимают тубус и снимают препарат. Мягкой чистой салфеткой вытирают иммерсионный объектив, в случае засыхания масла линзу вытирают спиртом или бензином. Конденсор опускают. Микроскоп покрывают чехлом или хранят в футляре для защиты его от света, пыли, влаги. Необходимо бережно обращаться с объективом и другими оптическими частями. При работе с микроскопом нельзя применять большие усилия, нельзя пальцами касаться линз. РАЗБИРАТЬ И СОБИРАТЬ ОБЪЕКТИВЫ ЗАПРЕЩЕНО!

К морфологическим признакам микроорганизмов относятся размеры, форма, расположение, подвижность, спорообразование и капсулообразование. Для изучения морфологических свойств используют микроскопический метод. Размеры микроорганизмов колеблются от 0,4 до 10 мкм.

Различают 3 формы микроорганизмов:

1. шаровидная – кокки: (в зависимости от плоскости деления и расположения клеток после деления)

а) микрококки (деление и расположение беспорядочно);

б) диплококки (деление в одной плоскости, расположение по 2);

в) стрептококки (деление в одной плоскости, расположение цепочкой);

г) тетракокки (деление в двух взаимно перпендикулярных плоскостях, расположение по 4);

д) сарцины (деление в трех взаимно перпендикулярных плоскостях, расположение в виде пакетов по 8-16 штук);

е) стафилококки (располагаются в виде гроздьев винограда).

2. цилиндрическая или палочковидная: ( по способности образовывать споры)

а)бациллы (образуют споры);

б) бактерии (не образуют споры).

В зависимости от плоскости деления и расположения клеток после деления палочковидные микроорганизмы делят на:

а) диплобактерии и диплобациллы (делятся в одной плоскости и располагаются по 2);

б) стрептобактерии и стрептобациллы (делятся в одной плоскости и располагаются цепочкой);

в) большинство палочковидных форм делятся хаотично и располагается по одному.

3. извитая:

а) вибрионы (напоминают запятую или полумесяц);

б) спириллы и спирохеты (имеют винтообразное строение).

Домашнее задание:

- методическая разработка практического занятия;

- С.А. Павлович «Микробиология с микробиологическими исследованиями» с. 14-18, 29-30.