 |
Отбор проб и доставка фекалий (кала)
|
|
|
|
Паразитологические методы лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов. Методические указания. МУК 4.2.735-99
Текст документа по состоянию на июль 2011 года
В настоящих Методических указаниях использованы ссылки на:
- Санитарные правила и нормы СанПиН 3.2.569-96 "Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации". Госкомсанэпиднадзор России. М., 1988;
- Санитарные правила СП 3.1/3.2.558-96 "Общие требования по профилактике инфекционных и паразитарных заболеваний". Госкомсанэпиднадзор России. М., 1997;
- Инструкция по проектированию санитарно-эпидемиологических станций. СН 535-81. Госгражданстрой. М., 1982;
- Система аккредитации испытательных лабораторий (центров) Государственной санитарно-эпидемиологической службы Российской Федерации. Минздрав России и Госстандарт России, Федеральный центр госсанэпиднадзора России. М., 1997;
- Санитарные правила СП 1.2.731-99 "Безопасность работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности и гельминтами". Федеральный центр госсанэпиднадзора Минздрава России. М., 1999.
Настоящие Методические указания являются обязательными при выполнении лабораторных исследований биологического материала от людей с целью обнаружения паразитирующих в организме гельминтов и простейших.
Насчитывается свыше 250 видов паразитирующих у человека гельминтов, вызывающих заболевания - гельминтозы. На территории нашей страны обнаружено около 100 видов гельминтов, из них более 20 имеют широкое, практически повсеместное распространение. К паразитарным заболеваниям относятся также протозойные инвазии, возбудителями которых являются простейшие одноклеточные организмы. В настоящее время известно около 50 видов простейших, способных вызывать у человека заболевания.
|
|
|
Важность качественной лабораторной диагностики паразитарных заболеваний определяется во многих случаях трудностью их клинической и эпидемиологической диагностики. Многие инвазии у людей, в т.ч. у детей, нередко протекают субклинически, латентно.
В связи с этим грамотная лабораторная диагностика инвазий приобретает неоценимое значение. Качество лабораторной диагностики и уровень выявляемости зависят от тщательного выполнения всех требований любой методики, правильного выбора материала для исследования, знания циклов развития гельминтов, простейших, а также путей выделения из организма человека, морфологического строения яиц гельминтов и различных форм простейших. На результат анализа также влияет: неправильный забор материала или длительное его хранение, а также отсутствие подготовки больного лечащим врачом перед лабораторным обследованием.
Разнообразие возбудителей, форм паразитирования и способов выделения диагностических стадий определяет достаточно широкий спектр методов диагностики.
Методы лабораторной диагностики паразитарных заболеваний применяются:
- с диагностической целью;
- для контроля эффективности лечения паразитарных заболеваний;
- для оценки качества проведения комплекса противопаразитарных мероприятий;
- с целью выявления источников заражения;
- для установления уровня пораженности населения.
Данный документ включает паразитологические методы лабораторной диагностики наиболее распространенных паразитарных заболеваний.
ОТБОР ПРОБ И УСЛОВИЯ ДОСТАВКИ МАТЕРИАЛА В ЛАБОРАТОРИЮ ДЛЯ ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ
Материалом для лабораторных паразитологических исследований на гельминтозы и протозоозы служит различный биологический материал от человека: дуоденальное содержимое, кал, ректальная слизь, моча, мокрота, отделяемое бронхов, кровь, биопсийные ткани и др.
|
|
|
Отбор проб и доставка фекалий (кала)
Фекалии после дефекации отбирают из разных участков в количестве не менее 50 г (объем примерно от чайной до столовой ложки).
Помещают в чистую (прокипяченную), сухую, стеклянную или пластмассовую посуду с крышками.
Стерильная стеклянная (пластиковая) посуда требуется при заборе кала для исследования на амебиаз.
Кал должен быть доставлен в лабораторию и исследован в день дефекации, поэтому, как правило, доставляется утренний кал.
Для обнаружения яиц стронгилоидеса кал доставляется и исследуется не позднее 1 ч после дефекации.
Для обнаружения личинок стронгилоидеса, яиц анкилостомид и трихостронгилоид исследуется кал не позднее 4 ч после дефекации.
Для обнаружения вегетативных (подвижных) форм дизентерийной амебы необходимо кал доставить и провести исследование не позднее 20 мин. после дефекации или 40 мин., если это время кал сохранялся при температуре 4 °C.
Для обнаружения вегетативных форм кишечных простейших (лямблий, диэнтамебы и др.) в жидком и полуоформленном "стуле" время от дефекации до исследования должно быть по возможности сокращено до минимума (не более 1 - 1,5 ч).
2.1.1. Отбор проб фекалий в консерванты
Используется:
- при невозможности исследования кала сразу же после дефекации или в день поступления материала в лабораторию.
Физический способ хранения фекалий:
- при низкой температуре от 0 до 4 °C не более суток.
Химические консерванты
1. Жидкость Барбагалло: раствор формалина на физиологическом растворе (3 мл формалина 40% + 97 мл физраствора или 1 л дистиллированной воды + 30 мл формалина 40% + 8,5 г хлорида натрия).
2. Раствор формалина 4%-ный.
3. Смесь 4%-ного раствора формалина с равным количеством глицерина.
4. Раствор уксусной кислоты от 3 до 10%.
5. Растворы детергентов 1 - 1,5%-ные - моющие средства типа "Лотос", "Экстра" (кроме биоактивных); перед приготовлением раствора из порошка удаляют влагу, выдерживая в сухожаровом шкафу при 100 °C в течение 2 ч.
Заливается кал одним из приготовленных консервантов в объеме 1:1 или 1 часть фекалий и 2 части раствора консерванта, при этом тщательно перемешивается индивидуальной палочкой.
|
|
|
Хранить фекалии в растворах консервантов можно от нескольких месяцев до года, при более длительном хранении возможно разрушение яиц гельминтов.
6. Для консервации простейших кишечника фекалии можнопоместить в консервант Турдыева: 80,0 мл 0,2%-ного раствораазотистокислого натрия (0,16 г NaNO + 80,0 мл воды 2дистиллированной) + 2,0 мл глицерина + 10 мл концентрированногоформалина (аптечного) + 8,0 мл концентрированного раствора Люголя(см. п. 4.2.4.1).Смешивать в соотношении: 1 часть кала и 3 части консерванта.
7. Химические консерванты для консервации и хранения взрослых гельминтов или их фрагментов:
- формалин 10%-ный;
- спирт 70%-ный;
- жидкость Барбагалло;
- глицерин.
8. Для консервации мышц с личинками трихинелл используется концентрированный раствор хлористого натрия (на 100 мл воды 40 - 50 г NaCl).
2.1.2. Отбор соскобов с перианальных складок
Соскоб с перианальных складок можно забирать у обследуемого в лаборатории, или заранее выдавать пробирки с ватными тампонами, смоченными в глицерине, на шпателях или флаконы с глазными палочками, покрытыми специальным клеевым слоем (п. 4.2.3), предварительно проинструктировав обследуемого (если обследуется ребенок, то родителей ребенка) о способе забора материала и доставке его в лабораторию.
Утром (вечером и утром обследуемому не подмываться) собрать соскоб с перианальных складок вокруг ануса методом "смыва" или "отпечатка" приготовленным ватным тампоном, смоченным в глицерине, или липкой лентой, или глазными стеклянными палочками со специальным клеевым слоем, как описано в п. 4.2.3.
После забора соскоба шпатели вкладываются обратно в пробирку, липкая лента наклеивается на предметное стекло, а глазные палочки вкладываются в соответствующий флакон или специальный контейнер с штативами. Пробирки, флаконы, предметные стекла предварительно маркируются (при массовых обследованиях маркируются цифрами согласно списку обследуемых).
|
|
|
