 |
Микробиологическое исследование
|
|
|
|
Цель исследования: выявление гонококков и противогонококковых антител.
Материал для исследования
1. Отделяемое слизистой оболочки уретры у мужчин.
2. Отделяемое слизистой оболочки уретры и шейки матки у женщин.
3. Гнойные выделения из глаз.
4. Кровь для получения сыворотки.
Способы сбора материала
Способы сбора материала
Примечание. Для бактериоскопического и бактериологического исследования материал берут: 1) до начала лечения антибиотиками: 2) не ранее чем через 10 дней после окончания лечения антибиотиками; 3) не ранее чем через 2 ч после последнего мочеиспускания; 4) не ранее чем через 2 ч после спринцевания.
Основные методы исследования
1. Микроскопический (главным образом используется при острых формах).
2. Микробиологический.
3. Серологический.
Ход исследования
Первый день исследования
Первый день исследования
Второй день исследования
Вынимают посевы из термостата и просматривают их. Изучают колонии. Делают мазки. При наличии подозрительных грамотрицательных диплококков колонии пересевают на скошенную среду в пробирках (среда должна быть свежеприготовленной и содержать достаточное количество конденсата) и ставят пробу на оксидазу. Для этого пипеткой на колонию наносят каплю 1% раствора диметилпарафенилендиамина, колонии изменяют цвет от темно-коричневого до черного.
Третий день исследования
Вынимают посевы из термостата, делают мазки со скошенного агара, окрашивают по Граму и микроскопируют. Засевают на среды Гисса (лактозу, глюкозу, маннит и мальтозу). Эти углеводы должны содержать 30% сыворотки крови. Засеянные пробирки ставят в термостат.
Четвертый день исследования
|
|
|
Вынимают пробирки из термостата, при отсутствии роста оставляют их в термостате еще на 1-2 дня. При наличии роста учитывают результаты (табл. 28).
Таблица 28. Дифференциация гонококков от других нейссерий
Серологическая диагностика
Третья неделя заболевания. При хроническом течении заболевания и в сомнительных случаях ставят РСК с сывороткой больного (см. главу 12). В качестве антигена используют убитую культуру гонококков, которую готовят в производственных условиях. Можно применить реакцию непрямой гемагглютинации (см. главу 12).
Контрольные вопросы
1. Какой материал служит для выявления гонококков и каким способом его получают?
2. Через сколько времени после мочеиспускания (или спринцевания у женщин) можно брать материал для исследования?
3. Какой метод исследования является основным при острой форме и какой - при хронической форме гонореи?
4. Когда и какую серологическую реакцию ставят при подозрении на гонорею?
5. От каких микроорганизмов необходимо дифференцировать гонококки?
Задание
Получите у преподавателя препарат. Изучите его и зарисуйте гонококки, расположенные внутри лейкоцита и вне его при окраске по Граму.
Питательные среды
Желточная среда. К 100 мл МПА из кроличьего мяса добавляют 15 мл желтка (свежего куриного яйца), 6 мл индикатора фенолового красного, 1,5 мл сахара, растворенного в 1 мл стерильной дистиллированной воды.
Питательная среда асцит-агар. К фильтрату бульона, приготовленного из кроличьего мяса, добавляют 2% агар, 1% пептон и 0,5% хлорид натрия. Нагревают до растворения агара, устанавливают рН 7,4-7,5, подщелачивают 20% гидроксидом натрия. Среду доводят до кипения, фильтруют, разливают в стерильные флаконы и стерилизуют в автоклаве 15 мин при 115° С.
Рецепты безасцитных питательных сред (МПА рН 7,4-7,5).
1) мясной воды из кроличьего мяса или бычьих сердец - 100 мл
гидролизата казеина - 2 мл
|
|
|
дрожжевого аутолизата - 2 мл
сыворотки крови крупного рогатого скота - 20 мл
2) мясной воды из кроличьего мяса или бычьих сердец - 100 мл
5% раствор гемогидролизата - 2 мл
дрожжевого аутолизата - 2 мл
сыворотки рогатого скота - 20 мл
3) мясной воды из кроличьего мяса или бычьих сердец - 100 мл
желтка куриного яйца - 10 мл
сыворотки крови рогатого скота - 20 мл
Рост гонококков на этих средах обильный. Колонии гонококка могут быть выявлены с помощью пробы на оксидазу, при которой они окрашиваются в красный цвет, переходящий в черный.
|
|
|
