Лабораторная диагностика синдрома липидной пероксидации.

Лабораторное исследование перекисного окисления и антиокислительной активности. Исследование активности антиокислительных ферментов, диагностическое значение.

Принципы построения диагностической панели для оценки показателей ПОЛ

1. Измерение ПОЛ должно производиться по нескольким показателям (диагностическая панель)
2. Параллельно необходимо исследовать показатели АОА
3. Интегральная оценка проводится путем суммирования и усреднения полученных данных по формуле
4. От момента забора биообразца до момента исследования – строго определенное время при стандартных условиях
5. Исследование патологического процесса и его коррекции проводить в динамике – начало, середина, хвостовая реакция
6. Единицы измерения показателей – на 1 л сыв. (плазмы) крови, г об. белка, г об. липида, г фосфолипида или ЖК, Т (10¹²) эритроцитов, г гемоглобина
7. Одновременное исследование ранних и поздних продуктов ПОЛ, водо и липидо- растворимых антиоксидантов, ферментативных и неферментативных АО.
8. Синхронное изучение биообразцов в контрольной и исследуемой группе пациентов
9. Соблюдение и учет всех общих принципов лаб диагностики (стабильность метаболического состояния, предупреждение ошибок пре-, аналитического и пост- аналитического этапа).
10. Статистический анализ полученных данных непараметрическими и параметрическими методами

Лабораторные показатели ПОЛ

• МДА –малоновый диальдегид

• ДК – диеновые конъюгаты

• ГП – гидроперекиси

• ХЛ – хемилюминесценция

• а.спонтанная в.индуцированная

• Шиффовы основания

• Газы – этан, пентан

Лабораторные показатели АОА

• Активность антиокислительных ферментов

• Витамины С, Е, А

• Мочевая кислота

• Глутатион

• Церулоплазмин

• Трансферрин

• Ферритин

• Лактоферрин

 

Синдром липидной пероксидации, причины, патохимия, принципы коррекции.

Синонимы: окислительный стресс, оксидативный стресс (липидная триада?) – клинико – патогенетический симптомокомплекс, являющийся неотъемлемой частью большинства патологий, развивающийся в связи с относительным преобладанием интенсивности ПОЛ над АОЗ и сопровождающийся выгоранием легкоокисляемых липидов, повышением проницаемости клеточных мембран, инактивацией ферментов, повреждением макромолекул, гемолизом, нарушением пролиферации ткани и ускоренным старением и нуждающийся в целенаправленной коррекции антиоксидантами (автор).

- активация ПОЛ при неизменном или сниженном уровне АОА, которые сопровождаются «выгоранием» ФЛ мембран, повышением их проницаемости и разрушением, ингибированием ферментов, нарушением работы ДНК, что ведет подавлением клеточной пролиферации, повышению гемолиза эритроцитов, ускорению темпа старения и гибели организма

 

N ПОЛ

------------- → НОРМА

N АОА

↑ПОЛ

------------ → ПАТОЛОГИЯ

N АОА

N ПОЛ или ↑ПОЛ

---------------------------- → ПАТОЛОГИЯ

↓АОА

 

↓ ПОЛ

--------------- → ПАТОЛОГИЯ

↓ ↓ АОА

↓ ↓ ПОЛ

---------------- → ПАТОЛОГИЯ и т.д.

↓ ↓ ↓ АОА

Практические рекомендации – алгоритм коррекции синдрома.

Скрининг ПОЛ -> развернутый анализ ПОЛ/АОА -> синдром липидной пероксидации -> назначение АО терапии -> повторное исследование ПОЛ/АОА

Фармопрепараты-антиоксиданты, определение, классификация, механизм действия.

Классификация:

1. АНТИРАДИКАЛЬНЫЕ СРЕДСТВА ("СКЭВЕНДЖЕРЫ" - ОТ АНГЛ. "SCAVENGERS" - МУСОРЩИКИ):

1.1. Эндогенные соединения: a-токоферол (витамин Е), кислота аскорбиновая (витамин С), ретинол (витамин А), b-каротин (провитамин А), убихинон (убинон).

Механизм действия антирадикальных средств ("скэвенджеров")

заключается в прямом взаимодействии со свободными радикалами

с их нейтрализацией
Наиболее изученное антирадикальное средство - a-токоферол

(витамин Е).

Витамин Е – природный антиоксидант, защищает

различные вещества от окисления, участвует в

биосинтезе белков, пролиферации клеток, тканевом дыхании

и клеточном метаболизме.

2. АНТИОКСИДАНТНЫЕ ФЕРМЕНТЫ И ИХ АКТИВАТОРЫ:

СУПЕРОКСИДДИСМУТАЗА (ЭРИСОД, ОРГОТЕИН), НАТРИЯ

СЕЛЕНИТ.

3. БЛОКАТОРЫ СВОБОДНЫХ РАДИКАЛОВ:

АНТИГИПОКСАНТЫ.

ПОКАЗАНИЯ К ПРИМЕНЕНИЮ АНТИОКСИДАНТОВ:

ПРОЦЕССЫ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОГО ОКИСЛЕНИЯ ПРИ

РАЗЛИЧНОЙ ПАТОЛОГИИ.

Взаимодействие антиокислительных ферментов и низкомолекулярных антиоксидантов.

• АНТИОКИСЛИТЕЛЬНЫЕ ФЕРМЕНТЫ

Супероксиддисмутаза (СОД)

О*^-₂ + О*^-₂ + 2Н⁺ ----------> Н₂О₂ + О₂

 

Каталаза

2 Н₂О₂ -----------à 2 Н₂О + О₂

 

Пероксидаза

Н₂О₂ + НО-S-ОН -----> 2 Н₂О + О=S=О,

S – субстрат окисления

Глутатионпероксидаза (Se)

2GSH+ROOH -------> GSSG + ROH+ Н₂О

Глутатионредуктаза

GSSG + НАДФН + Н+ ----à2GSH + НАДФ+

---------------------------------------------------------------

Где, GSSG –глутатион окисленный

GSH – глутатион восстановленный

Фосфолипаза А ₂ в мембране отщепляет от фосфолипидов окисленные жирные кислоты ROOH → разрушаются гидроперекиси липидов → предотвращается разветвление цепей окисления → ↓ПОЛ

Антиоксиданты крови и цитоплазмы

Церулоплазмин -окисляет Fe2+ до Fe3+ молекулярным кислородом

Апо-белок трансферрина - связывает Fe3+

Ферритин - окисляет Fe2+ и депонирует Fe3+

Карнозин - связывает Fe2+

• 2. Антиоксидантные ферменты и их активаторы

• 2.1. Препараты супероксиддисмутазы- Эрисод, Орготеин (Пероксинорм)

• 2.2. Препараты ферроксидазы церулоплазмина (Церулоплазмин)

• 2.3. Активаторы антиоксидантных ферментов- Натрия селенит (Селеназа)

• 3. Блокаторы образования свободных радикалов- Аллопуринол (Милурит), Оксипуринол, Антигипоксанты

 

Лабораторная диагностика синдрома липидной пероксидации.

Липидная пероксидация (окислительный стресс) - это процесс повреждения свободными радикалами (СР) различных клеток и органов, возникающий, когда образование СР превышает способность системы их нейтрализовать и элиминировать. Дисбаланс может быть результатом недостаточности системы антиоксидантной защиты, вызванной нарушениями продукции или распределения антиоксидантов или избытком СР.
Поддержка механизмов защиты клеток от окислительного повреждения происходит на минимальном необходимом уровне. Усиление действия повреждающих факторов по сравнению с базовым уровнем вызывает дополнительный адаптивный ответ или окислительные повреждения, в зависимости от силы и скорости повреждающего действия.
Таким образом, в организме существует баланс между действием различных проокислительных факторов и способностью антиоксидантной защиты их нейтрализовать.
В настоящее время много исследований посвящено важной роли окислительного стресса в развитии следующих заболеваний:
• Показано, что у больных, перенесших церебральный ишемический инсульт, продолжается сохраняться состояние хронического оксидативного стресса, и его показатели коррелируют с неврологическими симптомами. Оценка данных показателей может быть использована для определения клинического прогноза заболевания и эффективности терапии у данных пациентов.
• Существенным фактором, влияющим, на развитие синдрома эндогенной интоксикации (при воспалительных процессах в брюшной полости), независимо от её этиологии, является активация свободнора-дикального окисления. Поэтому необходимость диагностики данного процесса с целью снижения эндогенной интоксикации у больных хирургического профиля имеет важнейшее значение в современных условиях.
• При беременности, осложненной гестозом, сахарных диабетом, эпилепсией наблюдается оксидативный стресс, сопровождающийся избыточной нагрузкой на антиоксидантную защиту. Повреждающее действие характеризуется нарушением функции плаценты, эндотелиальной дисфункцией и предшествует возникновению патологических состояний в акушерстве.
• К основным причинам мужского бесплодия (варикоцеле, крипторхизм, различные инфекции, фиброзный цистит и т.д.) сегодня относят ещё и оксидативный стресс. Свободные радикалы обладают способностью повреждать мембраны сперматозоидов, вызывать фрагментацию ДНК как на ядерном, так и на митохондриальной уровнях.
Такие повреждения ДНК способны явиться причиной развития генетических заболеваний у детей (детский рак, ахондроплазия).
Сам по себе оксидативный стресс – это не заболевание, но это состояние, которое ведет к развитию или прогрессии различных заболеваний. Следовательно, скрининг и выявление данного процесса очень важны как для диагностики и мониторинга терапии при различных патологиях, так и для превентивной медицины.
Нормальные значения могут определяться у здоровых людей в группах риска развития оксидативного стресса (работники химической промышленности, курильщики, люди с избыточным весом и т. д.).
Относительное повышение значений оксидативного стресса может выявляться у людей после интенсивной физической нагрузки.

Поделиться:

Воспользуйтесь поиском по сайту: