 |
Количественное определение.
|
|
|
|
Подлинность.
Теоретическая часть
Определение подлинности основано на определении:
- первичной ароматической аминогруппы – NH2;
- аниона Сl –
Первая реакция основана на способности первичной ароматической аминогруппы образовывать в кислой среде при воздействии нитрита натрия соли диазония. При добавлении соли диазония к щелочному раствору β-нафтола появляется красно-оранжевое, красное или малиновое окрашивание.
соль диазония
β-нафтол азокраситель
Вторая реакция основана на том, ионы Сl – с ионами серебра образуют белый творожистый осадок.
Cl– + Ag+1 →AgCl↓
1. К 2 мл препарата добавить 3 капли разведенной HCl, 3 капли 0,1М раствора NaNO2 и взболтать. Полученный раствор добавить к 3 мл щелочного раствора β- нафтола, должно появиться вишнево-красное окрашивание или образоваться оранжево-красный осадок (реакция на первичные амины).
2. К 2 мл препарата добавить 2 капли разведенной НNO3 и 2 капли раствора AgNO3, должен появиться белый осадок (реакция на хлориды).
Объем наполнения.
В сосудах вместимостью до 50 мл наполнение проверяют калиброванным шприцем. Объем раствора, выбранного из сосуда шприцем, после вытеснения воздуха и заполнения иглы не должен быть меньше номинального. Количество сосудов, необходимых для проведения контроля для ампул с номинальным объемом 5 мл – 20 штук.
Количественное определение.
Производится фотометрическим методом, который основан на способности новокаина, содержащего первичный ароматичный амин, образовывать в кислой среде с нитритом натрия соли диазония, которые в свою очередь в аммиачной среде образуют соединения, окрашенные в ярко-желтый цвет.
1. Построение градировочного графика.
|
|
|
1.1 Приготовление растворов с концентрациями 1 мг/см3, 2 мг/см3, 3 мг/см3,
4 мг/см3 и 5 мг/см3.
| В колбах вместимостью 25 см3 | В колбах вместимостью 50 см3 |
| В пять колб емкостью внести соответственно 1, 2, 3, 4, 5 см3 стандартного раствора новокаина, в шестую колбу ничего не вносить (это будет холостая проба). | В пять колб емкостью внести соответственно 2, 4, 6, 8, 10 см3 стандартного раствора новокаина, в шестую колбу ничего не вносить (это будет холостая проба). |
| В каждую колбу добавить по 1 см3 0,1 М раствора HCl по 1 см3 5% раствора NaNO2 и тщательно перемешать | В каждую колбу добавить по 2 см3 0,1 М раствора HCl по 2 см3 5% раствора NaNO2 и тщательно перемешать |
| Через 10 минут в каждую колбу добавить 5-6 капель 25% раствора NH4OH и води до метки. | Через 10 минут в каждую колбу добавить 10-12 капель 25% раствора NH4OH и води до метки. |
1.2. Через 5 минут измеряют оптическую плотность полученных растворов желтого цвета при l = 20 мм и λ = 540 нм. (Прибор должен быть предварительно прогрет на протяжении не менее 30 минут).
1.3. На миллиметровке построить градуировочный график, по оси Х откладывать значения концентрации стандартного раствора, по оси Y соответствующие значения оптической плотности.
2. Определение содержания новокаина в ампульном растворе.
2.1. Приготовление раствора.
| В колбах вместимостью 25 см3 | В колбах вместимостью 50 см3 |
| В мерной колбе на смешать 1 см3 раствора препарата с 1 см3 0,1М раствора 0,1М раствора HCl та 1 см3 5% раствора NaNO2. | В мерной колбе смешать 2 см3 раствора препарата с 2 см3 0,1М раствора 0,1М раствора HCl та 2 см3 5% раствора NaNO2. |
| Через 10 минут в колбу добавить 5-6 капель 25% раствора NH4OH и води до метки. | Через 10 минут в колбу добавить 10-12 капель 25% раствора NH4OH и води до метки. |
2.2. Через 5 минут измерить оптическую плотность раствора при тех же условиях, что и при построении градуировочного графика.
3. Построение градуировочного графика посредством программы MS Excel
|
|
|
3.1. Открыть программу MS Excel.
3.2. Разместить данные измерения в виде следующей сплошной таблицы
| 3.3. Левой кнопкой мыши выделить правый столбец со значениями оптической плотности. 3.4. Меню Вставка, выбрать График с маркерами. 3.5. Подписать вертикальные и горизонтальные оси через меню Макет → Названия осей. 3.6. Написать название диаграммы через меню Макет → Название диаграммы. |
3.7. Выделить горизонтальную ось и проставить концентрации от 1 до 5.
3.8. Изобразить вертикальные линии сетки через меню Макет → Сетка.
3.9. Проставить значения над точками графика через меню Макет →Подписи данных.
4. Используя градуировочный график, определить концентрацию раствора препарата.
4.1.Выделить линию графика, нажать ПКМ → Добавить линию тренда → Параметры линии тренда → Линейная. Поставить флажок в окошке Показывать уравнение на диаграмме.
4.2. Зная значение у (это значение оптической плотности раствора исследуемого препарата), решить уравнение относительно х. Это и будет значение концентрации раствора препарата.
|
|
|
