30. Генеалогический и близнецовый, цитогенетический и биохимический методы медицинской генетики.

1)Генеалогический метод основан на анализе наследования свойств и признаков человека по родословным. Он включает два этапа: составление родословной и генеалогический анализ.

Составление родословной складывается из сбора сведений о семье, начиная с пробанда, и графического изображения родословной с использованием стандартных условных обозначений(символов). Генеалогический анализ позволяет установить: является ли признак наследственным; определить тип наследования(аутосомно-доминантный, аутосомно-рецессивный, сцепленный с полом) и генотипы членов родословной; прогнозировать вероятность проявления признака в потомстве. Все типы наследования имеют специфические особенности, характерные черты которых проявляются в родословных.

Анализ основан на генетических закономерностях моногенного наследования менделирующих признаков. Менделирующий признак дискретен, он детерминирован наличием своего аллеля и подчиняется закону расщепления. Дискретность признака можно оценить по морфологическим, физиологическим, биохимическим, клиническим, иммунологическим критериям. Большую работу по систематизации изученных наследственных признаков проводит М. Кьюсик и публикует их в виде каталога «Менделирующие признаки у человека». Генеалогический метод является эквивалентом гибридологического, который модифицирован в соответствии с социальными и биологическими особенностями человека; он наиболее часто применяется при медико-генетическом консультировании, изучении мутационного процесса, сцепленного наследования.

2)Близнецовый метод - это изучение пар близнецов путем установления внутрипарного сходства(конкордантности) и различия(дискордантности) между ними.

Близнецы - это дети, выношенные и рожденные одной матерью одновременно; чаще всего рождаются два близнеца. Они могут быть монозиготные и дизиготные. Монозиготные(однояйцевые, МБ) развиваются из одной зиготы(явление полиэмбрионии). Они одного пола и имеют одинаковый генотип. Дизиготные близнецы(двуяйцевые, ДБ) развиваются из двух зигот(явление полиовуляции); имеют разные генотипы; могут быть одного или разного пола.

В генетических исследованиях важно установить зиготность близнецов(моно- или дизиготные). Для этого используют полисимптомный метод - ряд критериев и четко наследуемых признаков(цвет глаз, волос, группы крови), которые меньше всего подвержены влиянию среды. После установления зиготности сопоставляют близнецов одной пары по изучаемому(качественному или количественному) признаку.
Исследуемый признак может встречаться у обоих близнецов данной пары(пара конкордантна), либо у одного из близнецов(пара дискордантна). Близнецы в течение жизни могут находиться в одинаковых или разных условиях: изменчивость в группе МБ обусловлена средой, а у ДБ генотипом и средой.

Близнецовый метод используется для изучения соотносительной роли наследственности и среды в развитии признака(расчет коэффициента наследуемости), установления наследственного характера признака, выявления причин различной пенетрантности генов, оценки эффективности влияния внешних факторов на человека(лекарственных препаратов, методов обучения и воспитания).

3)Цитогенетический метод - метод микроскопического изучения наследственных структур клетки - хромосом. Он включает кариотипирование и определение полового хроматина.

а) Кариотипирование проводится для получения метафазных хромосом.

Кариотип - это диплоидный набор хромосом в соматических клетках на стадии метафазы, характерный для данного вида. Кариотип, представленный в виде диаграммы, называется идиограмма, кариограмма или хромосомный комплекс. Для кариотипирования наиболее удобным источником клеток являются лимфоциты(клетки периферической крови). Вначале получают достаточное количество делящихся клеток(стимуляция ФГА), а затем метафазные пластинки(для остановки деления на стадии метафазы используют колхицин) с раздельно лежащими хромосомами(гипотонический раствор). Препараты окрашивают и фотографируют, хромосомы вырезают и раскладывают. Для систематизации хромосом используют две стандартные классификации: Денверскую и Парижскую. В основу Денверской классификации положены два принципа: длина хромосом и их форма( метацентрические, субметацентрические, акроцентрические), при этом используется метод сплошной окраски хромосом. По этой классификации все хромосомы разделены на семь групп, каждая пара хромосом имеет свой номер. Недостатком классификации является трудность в идентификации хромосом внутри группы. Парижская классификация основывается на дифференциальном окрашивании метафазных хромосом. Каждая хромосома имеет свой индивидуальный рисунок, четкую дифференциацию по длине на светлые и темные полосы - диски(сегменты). Разработана система обозначения линейной дифференциации хромосом(номер хромосомы, плечо, район, сегмент).