 |
В интерфазном ядре не видно хр-м, подобных митотическим (они там есть).
|
|
|
|
1. Наблюдения Бовери(1907) за морф. постоянством хр-м при делении бластомеров аскариды→хар-р распол-я хр-м в телоФ опр-т форму интерфазного ядра и порядок распол-я хр-м в след. профазе (это посл.основой для теории↑).
Косв)Пост-во ч-ла и морфологии хр-м для данного кариотипа нельзя объяснить при «разборке» хр-м.
Закономерно повт-ся расположение хр-м в метафазных пластинках
4. Правило Тейлора(1964)→воспроизв-е хр-м сходно с полуконсервативной редупликацией ДНК (метка Н3Т сохр-ся в одной хр-ме пс. деления).
Индивид. хр-мы иногда можно наблюдать в интерФ-х ядрах(тельце Барра).
В ряде объектов возм. выявление теломерных уч-ков хр-м в интерФ-х ядрах(хромоцентры итерФ-х ядер клеток меристемы корешков лука-теломерные уч-ки хр-м--радиоавтограф)
Центромерные уч-ки хр-м в интерФ-х ядрах выявл-ся диффер. окраской на гетерохроматин(культура фибробластов мыши).
8. Зоны локализации отд. хр-м можно выявить и в интерФ-х ядрах, не имеющих хромоцентров или конденсрованных уч-ков хр-м.(импульсная Н3Т метка в среде пс. делений располагается не диффузно, а над опр уч-ками)
9. Изучение репаративного синтеза ДНК при УФ-облучении клеток→не > ½ хр-м клетки облуч-ся перед делением, облученная клетка поглощает Н3Т до синт. периода, т.к. репартивный синтез, причем ввключ-я неравномерно, в соотв с пораж. хр-мами.
10. Прямые биохим данные: при опр-и мах М ДНК дрозофиллы→1хр-ма–1ДНК, длина- const в митозе и интерФ
Клеточный цикл, его стадии и способы изучения
-время сущ-я кл.как таковойот деления до деления = клет.цикл (бактерия-20мин, стентор-2-3сут.)
- смысл кл-ного деления - в равномерном распр-и редуплиц. кл-ного мат-ла по 2м новым клл.
|
|
|
→G1→S→G2постсинтетич/премитотич{→G0 Ф пролиферативного покоя, откр. Lagta-R2}→ M{→G0-R(est)1} →G1пресинтетич/постмитотич→
--продолжительность ФФ сильно варьирует у разл.клл, но ~ одинакова у клл. 1 органа
-разл.содерж-е Д/РНК и интенс-сть их синтеза (по ФФ):
G1 - 2c(ДНК), S↑(РНК),S(1/4→1)max(белок)
S - (2→4)c, S(ДНК), Smax(РНК),Smax(белок)
G2 - 4c, Smax(РНК), S(1/4→1)max(белок)
M - (4→2)c, 1/4Smax(белок)
-G1 -рост кл., подготовкак синтезу ДНК(синтез белка-инициатора S?), синтезы ферментов метаболизма РНК и белка, ферм.,необх для обр-я ДНК
- S –етсь всегда(искл.-2е деление мейоза), длительность ~v репл.ДНК(ч-лу репликонов), v(полипл.)=v(дипл.); синтез гистонов в цитопл., синтез рРНК(необх в G2)
- G2 –обычно короче ост.периодов, м. Выпадать; синтез кл-ных РНК и белков, синтез иРНК (для М), рРНК из S исп-ся для синтеза «белков деления»(напр.тубулинов для М веретена)
- G0 –дифф.клл, либо “в покое”(могут делиться)
- способы изуч-я:
1)метод получения гетерокарионов (с помощью инактивированных вирусов) из 2х разл клл.=> индуцированное влияние со ст-ны цитоплазм факторов
Включение Н3-предшественников (синтезов Д/РНК)
{М-деление, ост. -интерФ}
Мейоз(МЗ), последовательнось фаз мейоза и его значение
- МЗ -2 клет.цикла, клл.делятся, но репл-ся только 1 р аз
-процесс МЗ-а универсален для всех ЭУ орг-мов
-одна из специализаций- пол.клл., команда – оч.рано (циклоп-пс.4го деления, дрозофилла – ранняя бластула, ч-к – до заклкдки всех органов - в каудальном отделе)
- Август Вейсман: (для пол клл.) 1е делелние МЗ 2n→{S}→4n→{ProI(длинная профаза)} →{MI}→2*2n→ {нетS}→2*2n→{MII}→4*n (единица репл.– хр-ма)
--первичн.зарод.клл. →гонии→ауксоциты→(синапсис) →мейотич.деление→гаметы(рост ооцита, дифф. сператоцита)
-- обр-е зиготы: ♀(1n)+♂(1n) →2n→(S)→4n→(M) →2*2n
-ProI сост.из неск.уч-ков:
1) лептотена (тонк.нить); «хр-мный букет»
2) зиготена (соед.нить); объед.матер. и отцовск.(1-1)
|
|
|
3) пахитена (толст.нить); длинная у ч-ка и мыши, обр-ся синаптинемный комплекс (характ для МЗ, 0.6 Σt)
4) диплотена (двойная нить); центромерные уч-ки отталкиваются, связь - хиазмы
5) диплокинез (расхождение хр-м);
- МЗ(отличия от М):
ProI – длительная (сом.0.5-1.5ч, пол.-до 50 лет)
Многофазность
3) коньюгация хр-м(рекомбинация) – кроссинговер в местах хиазм, “обмен кусочками” в тетраде, между сестринскими невозможен
4) активация транскрипции (в М синтез РНК резко падает, в МЗ - всплеск)
5)синтез ДНК (отложенный=задержанный)-(заполнение пробела, v синтеза ДНК различна для 2х нитей)
6) диплотенная хр-ма – ст.”ламповых ёршиков”
“ёршик” обр. петля ДНК, на к-рой идет синтезРНК
16. Кариотип, методы его изучения
-совокупность числа, величины и морфологии хр-м («лицо вида»)
-даже у близких видов хр-мные наборы отличаются по ч-лу, по величине 1 или неск-ких хр-м, по форме и по структуре хр-м= > структ. кариотипа м.б. таксономич. признаком.
= методы: 1) Q -окраска (по Касперссону): обработка перпарата митотических хр-м флюорохромом акрихинипритом - > флюоресцентный микроскоп -> поперечные светящиеся полосы
G-окраска(к AT-парам) (по Гимза): обработка трипсином, к-той или щелочью, затем – смесью по Гимза: метилен-азур, метиленовый фиол-й, метиленовый синий, эозин –окрашиваются уч-ки в плечах и теломерах хр-м
2’)C(convert↑)-окраска (=?R?(reverse) к GC-парам) –окрашивание прицентромерных уч-ков(~G)
3) гематоксилин или (в проц. удаления Ca2+ Mg2+ под Ф-контрастным микроскопом) – те же полосы, чтот и при G=> дифф.окраска,скорее всего, из-за разл. спос-сти уч-ков хр-м к искусств. деконденсации
-дифф. окрашивание позволяет четко отличить хр-мы друг от друга. Сейчас составляют хр-мные карты ч-ка, т.е. находят места генов на опр. уч-ках хр-м.
-молек. мех-мы специфич.(дифф.) окраски неизвестны. Сущ. теория, что окраш-е связано с хим. св-вами уч-ков хр-м(олаклизацией гетероХ)
Митоз, мех-м дв-я хр-м в этом процессе
-подготовка к М:
1) S- репл.ДНК, 2) удвоение центросом(S→G1),
Смена цитоплазм.МТ на митотич.(G2),
Синтез и активация факторов регуляции М,
5) рост клл.: акт.процессы транскрипции и синтеза белка (весь кл.цикл, в М-на ½ меньше)
|
|
|
Удвоение прекинетохоров
- митоз:
1) конд.хр-м (нач.вG1; в раней проФ,max-в метаФ)
Распад ядрышка и ядерн. облочки
3) форм-е кинетохоров (удвоение прекинетохоров в G2, проФ/прометаФ-процесс, метаФ-зрелый)
4) форм-е веретена
5) конгрессия –выстраивание хр-м в метаФ-ную пласт.
|
|
|
12 |
