 |
Особенности забора исследуемого материала при кариесе.
|
|
|
|
Исследование зубной бляшки
Перед снятием зубного налета необходимо провести тщательную гигиеническую обработку полости рта, используя различные механические методы и контролируя обработку определением индекса гигиены. С этой целью пользуются специальными красящими растворами, определяя зону зубного налета.
При исследовании зубной бляшки необходимо учитывать:
· методику забора бляшки с поверхности зуба;
· методику дисперсии материала бляшки;
· методику микроскопического подсчета и подсчета выживаемости микробов при культивировании.
Методика взятия материала зубной бляшки
Бляшка, расположенная на доступной гладкой поверхности зуба (щечная, язычная), может быть снята путем соскабливания обычным стерильным инструментом: экскаватором, скейлером. Для снятия бляшки с проксимальных поверхностей можно использовать стерильную нитку. Бляшку из ямок, фиссур можно получить острым зондом или заостренной ортодонтической проволокой. В некоторых случаях материал берут маленькими стерильными ватными тампонами. Однако из-за плотности прилипания бляшки и трудности ее снятия этот способ годится только для изучения начальной стадии колонизации микробов на эмали. Наддесневую зубную бляшку можно снять стерильными экскаватором или скейлером.
Для бактериологического исследования материал должен быть сразу после забора помещен в транспортную питательную среду с целью сохранения жизнеспособности микробов.
Полученный материал взвешивается на аналитических весах с последующим разведением от 1:100 до 1:1000 и посевом на питательные среды.
Методика дисперсии материала бляшки
Точность определения количества и видов бактерий в бляшке зависит от тщательности дисперсии материала.
|
|
|
Можно разбивать конгломераты бляшки путем встряхивания со стеклянными бусами в гомогенизаторе, обработкой материала в ультразвуковых дезинтеграторах. Однако ультразвук может вызвать гибель некоторых бактерий: особенно чувствительны к ультразвуковой обработке спирохеты и некоторые грамнегативные бактерии. В связи с этим обработку ультразвуком обычно проводят в течении 10 сек.
Микроскопический подсчет, подсчет выживаемости микробов при культивировании
Примой микроскопический подсчет суспензированных микробов можно осуществлять в камере Горяева.
Рис. 2. Камера Горяева - это приспособление предназначенное для подсчета количества клеток в заданном объеме жидкости.
Можно также изучать материал в темном поле или фазово-контрастном микроскопировании.
Подсчет жизнеспособных клеток из взятого образца проводят методом серийных разведений в стерильном физиологическом растворе (1:10, 1:20 и так далее). Из каждого разведения определенный объем засевают на поверхность плотной среды. После инкубации подсчитывают количества КОЕ (колониеобразующие единицы) и пересчитывают количество на исходный объем.
Успех метода зависит от использования подходящих питательных сред и условий культивирования, так как большая часть резидентов является строгими анаэробами и микроаэрофилами.
Низкую высеваемость микробов можно объяснить недостаточной дисперсией, прилипанием микробов к поверхности стекла при приготовлении разведений и неудачным подбором питательной среды.
Забор материала из кариозной полости
Сначала из кариозной полости стерильным бором убирают поверхностные слои размягченного дентина, смоченного слюной. Не допуская попадания в исследуемый материал слюны, другим стерильным бором обрабатывают полость и помещают дентин с помощью стерильной гладилки в транспортную среду.
|
|
|
Забор ротовой жидкости
Ротовую жидкость обычно у больных утром (9-11 час.) через 2 часа после приема пищи собирают в течение 10 мин в стерильные пробирки. Эту слюну называют нестимулированной.
Стимулированную слюну получают после нанесения на спинку языка 1-2 капель стерильного 2% раствора лимонной кислоты или жевания 5 г. парафина в течении 30 сек. Паротидную слюну получают путем введения в проток специальной стерильной канюли.
Ротовая жидкость собирается в стерильную пробирку, исследуется 0,1 мл.
Контрольные вопросы
1. Что такое кариес?
2. Каков механизм образования зубной бляшки?
3. Охарактеризуйте патогенез кариеса.
4. Какие микроорганизмы называют кариесогенными?
5. Какова роль микроорганизмов различных групп в возникновении развитии кариеса?
6. Какие основные направления профилактики кариеса Вы знаете?
7. В чем недостаток разработанных вакцин против кариеса?
8. Какой материал следует забрать для изучения микрофлоры при кариесе?
Список литературы
Обязательная:
1. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. – М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2001. – 736 с.
2. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология: Учебник для мед. вузов. – СПб.: СпецЛит, 2002. – 591 с.
3. Поздеев О.К. Медицинская микробиология / Под ред. В.И. Покровского. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2005. – 768 с.
Дополнительная:
1. Ахременко Я.А. Микробиология полости рта: Учебное пособие для студентов стоматологических факультетов. – Якутск: Изд-во Якутского госуниверситета, 2008. – 107 с.
2. Зеленова Е.Г., Заславская М.И., Салина Е.В., Рассанов СП. Микрофлора полости рта: норма и патология: Учебное пособие. Нижний Новгород: Издательство НГМА, 2004. - 158с.
3. Микробиология, вирусология и иммунология: учеб. для студентов мед. вузов / под ред. В. Н. Царёва. — М.: Практическая медицина, 2009. — 581 с.: ил.
4. Практикум лабораторных работ с иллюстрированными ситуационными заданиями по микробиологии, иммунологии и вирусологии / под ред. А.А. Воробьева, В.Н. Царева. – М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2008. – 320 с.: ил.
Занятие № 3.
|
|
|
