Факультативно-анаэробные бактерии

Гарднереллы - плеоморфные грамотрицательные или грамвариабельные палочки или кокковидные палочки. В настоящее время известен единственный вид бактерий, принадлежащий к этому роду - Gardnerella vaginalis.

Гарднереллы встречаются у 50% сексуально активных женщин, причем их количество нередко достигает 105 КОЕ/мл исследуемого материала. При бактериальных вагинозах гарднереллы выделяются более чем в 90% случаев, в количестве превышающем 107 КОЕ/мл исследуемого материала и выше, и считаются важным фактором, ответственным за возникновение и поддержание этого патологического состояния.

G.vaginalis обладает выраженной способностью к адгезии на поверхности вагинальных эпителиоцитов. “Ключевые клетки” являются диагностическим признаком бактериальных вагинозов. Они представляют собой клетки сквамозного вагинального эпителия с обильно покрывающими их чаще всего G. vaginalis.

G.vaginalis могут продуцировать токсические биопродукты, к которым относятся муколитические ферменты и гемолизин. Существенное значение в формировании состояния бактериальных вагинозов отводится действию гемолизина G.vaginalis на человеческие лейкоциты. Симптомы бактериальных вагинозов проявляются на фоне недостаточности лейкоцитов. Предполагается, что G. vaginalis, которые присутствуют в высоких концентрациях у женщин с бактериальными вагинозами, продуцируют лейкотоксический фактор, способный разрушать лейкоциты, что позволяет объяснить отсутствие лейкоцитарной реакции при бактериальном вагинозе.

Микоплазмы - самые мелкие бактерии с выраженным полиморфизмом (от кокковидных телец до нитей), что обусловлено отсутствием ригидной клеточной стенки. Клинически доказана патогенность для человека Mycoplasma pneumoniae, Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum (по старой классификации – биовар Т-960), Ureaplasma parvum (по старой классификации – биовар Парво).

Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum и Mycoplasma hominis могут обитать в качестве коменсалов на слизистых урогенитального тракта. В норме Ureaplasma urealyticum/parvum выделяют у 6%-7% женщин в количестве 103 - 105 КОЕ/мл, Mycoplasma hominis у 2%-15% женщин в количестве до 103 КОЕ/мл исследуемого материала. Однако данные бактерии не могут рассматриваться как безвредные.

В том случае, если родовые пути матери контаминированы микоплазмами, слизистые оболочки ребенка могут быть колонизированы ими уже во время родов. Обычно в дальнейшем в первые недели жизни происходит прогрессивное исчезновение микоплазм. Тем не менее, известно, что пневмонии новорожденных нередко вызваны микоплазмами и уреаплазмами.

Контаминация Ureaplasma urealyticum/parvum половых путей женщины идет по восходящему пути. Наличие протеолитической активности в отношении IgA позволяет им преодолевать локальную защиту и благоприятствует их быстрой имплантации.

Доказана роль уреаплазм в возникновении негонококковых уретритов.

В патогенезе бактериального вагиноза основное значение придается только бактериям вида Mycoplasma hominis, частота выделения которых может увеличиваться до 50%-80%, а количественный уровень - до 105 КОЕ/мл и более исследуемого материала. При этой патологии микоплазмы всегда ассоциированы с другими бактериями и, прежде всего с облигатными анаэробами и гарднереллами.

Mycoplasma hominis, кроме того, может вызывать пиелонефриты и сальпингиты. В равной степени М. hominis и U. urealyticum/parvum могут быть ответственны за нарушения репродуктивной функции: бесплодие у мужчин, преждевременные выкидыши, хорио-амниониты, а также патологические неонатальные состояния: гипотрофия плода, преждевременный разрыв плодных оболочек.

Стафилококки. Грамположительные кокки. К видам, наиболее часто встречающимся во влагалище здоровых женщин, относятся коагулазо-негативные эпидермальные стафилококки (S. epidermidis), частота обнаружения которых может достигать 90% случаев, а количество варьировать от 103 до 104 КОЕ/мл исследуемого материала. Золотистые стафилококки (S. aureus) выделяются с небольшой частотой в 5% случаев и обычно колонизируют влагалище транзиторно. Золотистые стафилококки способны вырабатывать TSST-1 токсин, результатом действия которого является синдром токсического шока.

Стрептококки. Грамположительные кокки. В норме во влагалище здоровых женщин выделяют стрептококки в количестве не более, чем 103 КОЕ/мл, относящиеся в основном к трем группам: стрептококки группы viridans (“зеленящие” стрептококки или “?- (или?-) гемолитические Streptococcus sp.), стрептококки серологической группы В (S. agalactiae) и стрептококки серологической группы D (энтерококки).

У новорожденных стрептококки группы В (S. agalactiae) способны вызывать тяжелые инфекционные состояния, включающие респираторные осложнения, менингиты, септицемии, нередко приводящие к смерти. Поэтому необходимо обследовать беременных на предмет присутствия во влагалище стрептококков группы В, а при выявлении таковых назначать антибактериальную терапию (стрептококки группы В обладают чувствительностью практически ко всем?–лактамным антибиотикам).

Энтерококки являются нормальными представителями желудочно-кишечного тракта и урогенитального тракта человека. Однако бактерии этого рода очень часто обнаруживаются при воспалительных заболеваниях мочеполовой системы, а также могут вызывать инфекционные эндокардиты.

Зеленящие стрептококки часто являются причиной пост операционных воспалительных осложнений и являются основной причиной инфекционных эндокардитов.

Энтеробактерии. Грамотрицательные палочки. Наиболее часто встречающимся во влагалище здоровых женщин видом этой группы микроорганизмов являются Escherichia coli. Частота их выделения варьирует от 10% до 25%, а количество от 103 до 104 КОЕ/мл исследуемого материала. Другие виды бактерий семейства Enterobcteriaceae, например, принадлежащих к родам Klebsiella и Enterobacter, также могут быть выделены из влагалища здоровых женщин, однако значительно реже. Escherichia coli, Proteus sp., Klebsiella sp., а также Pseudomonas aeruginosa, могут вызывать урогенитальные инфекционные заболевания (неспецифические вагиниты и др.).

Дрожжеподобные грибы рода Candida являются частыми коменсалами генитального тракта здоровых женщин, особенно сексуально активных. Наиболее часто обнаруживаемым видом является Candida albicans (до 30%). Количество Candida albicans может достигать 106 КОЕ/мл исследуемого материала, при этом не вызывая развития патологических процессов. Количество дрожжеподобных грибов рода Candida может повышаться при беременности на фоне транзиторной физиологической супрессии клеточного иммунитета.

 

Бактериальный вагиноз

Этиология и патогенез

Бактериальный вагиноз (БВ) – наиболее широко распространенное заболевание у женщин детородного возраста. Это заболевание с полимикробной этиологией, в основе которого – нарушение нормального микробиоценоза влагалища. По сути БВ – это дисбактериоз влагалища. Выраженные нарушения в составе вагинальной микрофлоры при БВ являются фактором высокого риска возникновения эндометрита, сальпингоофорита, преждевременных и осложненных родов и абортов (1).

В настоящее время нет единой точки зрения на возможные пути передачи БВ, но известно, что БВ встречается прежде всего, у сексуально активных женщин. Вместе с тем, только одной передачи микроорганизмов не достаточно для возникновения бактериального вагиноза. Для развития заболевания необходимо наличие дополнительных факторов риска.

К предрасполагающим факторам, ведущим к развитию БВ следует отнести: применение антибиотиков, длительное использование внутриматочных контрацептивов, воспалительные заболевания половых органов, нарушения гормонального статуса, сопровождающиеся нарушением менструального цикла, преимущественно по типу олигоменореи или аменореи, изменение состояния местного иммунитета, стрессовые воздействия на организм, использование контрацептивных препаратов со спермицидной активностью, регулярные спринцевания, частая смена половых партнеров (1).

Диагностика

Диагностика бактериального вагиноза состоит из совокупности клинических и лабораторных тестов (5).

Пациентки предъявляют жалобы на обильные выделения из половых путей с неприятным запахом, усиливающимся после полового акта. Иногда возможен зуд и дизурические явления.

Для диагностики БВ после гинекологического осмотра производится забор влагалищного отделяемого с заднего свода влагалища. Если обследование предполагает только качественное исследование, забор осуществляется двумя ватными тампонами, один из которых помещают в пробирку с транспортной средой, а другой используют для определения рН и приготовления мазка.

Предварительный диагноз БВ может быть поставлен в случае обнаружения следующих клинических признаков и результатов лабораторных исследований:

1. Обильных выделений с неприятным запахом, прилипающих к стенкам влагалища.

2. Появления запаха “гнилой рыбы” при проведении аминного теста.

3. рН вагинального секрета > 4,5

4. В мазке, приготовленном по типу «раздавленная капля» (нативный препарат), могут выявляться подвижные вибрионы (Mobiluncus sp. называют “штопорообразным” или сравнивают с “полетом мухи”).

5. В мазке, окрашенном по Граму:

a. отсутствие или редкое присутствие полинуклеарных нейтрофилов;

b. большое количество вагинальных эпителиоцитов;

c. наличие “ключевых клеток” - вагинальные эпителиоциты с адгезированными на них грамвариабельными палочками и/или коккобациллами (Gardnerella vaginalis, Mobiluncus spp, грамотрицательные облигатно-анаэробные бактерии);

d. резкое снижение концентрации или полное отсутствие лактобактерий;

e. присутствие большого количества грамвариабельных и/или грамотрицательных палочек и/или коккобацилл (G. vaginalis, Bacteroides spp, Fusobacterium spp, Prevotella spp).

Диагноз БВ может быть поставлен лишь на основании наличия не менее 3-х из 4-х признаков (Amsel). Ни один из них в отдельности не имеет самостоятельного диагностического значения.

Подтверждением правильности предварительного диагноза является оценка количественного и качественного состава микрофлоры вагинального тракта пациентки, полученная в результате микробиологического исследования выделений из влагалища.

Микробиологическое исследование является наиболее достоверным этапом в диагностике БВ и служит критерием для оценки клинического значения скрининговых методов диагностики БВ. Однако до настоящего времени оно остается достаточно длительной и дорогостоящей процедурой. Анаэробы, ассоциированные с БВ, относятся к труднокультивируемым микроорганизмам, требующим специальных условий для роста на питательных средах. При наличии в образце персистирующих форм анаэробных бактерий, что встречается в последнее время все чаще, возможно получение ложноотрицательных результатов. Это связано с тем, что персистирующие бактерии не способны к росту на питательных средах, т.е. являются некультивируемыми формами.

В настоящее время для диагностики дисбактериозов влагалища активно используются и различные виды ПЦР-исследований.

«ПЦР в реальном времени» с количественным определением возбудителей – наиболее информативный, но также достаточно дорогой и малодоступный для широкого применения вариант исследования.

Лаборатория «ЛАГИС» предлагает оптимальный подход к лабораторной диагностике дисбактериозов – применение метода ПЦР с использованием тест-систем с заданной чувствительностью для выявления условно-патогенных анаэробных бактерий и полуколичественную тест-систему для определения лактобактерий.

Чувствительность ПЦР-тест-систем для выявления условно-патогенных анаэробов, ассоциированных с дисбактериозом влагалища - 10⁴ КОЕ/мл и более (специфичность – близка к 100%). Использование таких тест-систем позволяет при положительном результате получать информацию о диагностически значимом количестве данных бактерий в образце.

В настоящее время кроме «традиционных» G. vaginalis, Mycoplasma hominis, Ureaplasma sp., Candida sp. к микроорганизмам, ассоциированным с дисбактериозом влагалища, относят и анаэробные бактерии родов Prevotella, Bacteroides, Mobiluncus, Fusobacterium, а также Atopobium vaginae и др.

Важное диагностическое значение для оценки микробиоценоза влагалища имеет установление концентрации лактобактерий во влагалище. Полуколичественная ПЦР-тест-система дает три варианта результата исследования пробы биоматериала:

Результат исследования (количество лактобактерий)	Интерпретация результата
> 106 кл/мл	Соответствует нормоценозу
104-106 кл/мл	Соответствует дисбиозу
< 104 кл/мл	Соответствует дисбиозу (глубокий дефицит лактобактерий)

Выявление в вагинальном мазке лактобактерий в концентрации, соответствующей нормоценозу, одновременно с любым из маркеров дисбиоза характерно для переходного периода между нормоценозом и дисбиозом.

В Лаборатории «ЛАГИС» было проведено исследование, с целью определить частоту совместного выявления некоторых анаэробных бактерий с традиционным маркером дисбактериозов влагалища G. vaginalis. Были изучены 60 вагинальных образцов, в которых при ПЦР-анализе была обнаружена ДНК G. vaginalis и 60 вагинальных образцов, в которых при ПЦР-анализе не обнаружили ДНК G.vaginalis. Результаты представлены в таблице.

Возбудители	Процент обнаружения ДНК возбудителей
G.vaginalis (+)	G.vaginalis (--)
Mobiluncus sp.	59%	36%
M.curtisii	52%	28%
Bacteroides sp	5%	3,5%
Prevotella sp.	62%	17%
Fusobacterium sp.	40%	12%
Fusobacterium nucleatum	2,5%	0%
Atopobium vaginae	75%	31%

Как видно из представленных выше результатов, частота обнаружения этих микроорганизмов резко возрастает при совместном выявлении с G. vaginalis. Это свидетельствует о том, что при БВ часто выявляются условно-патогенные анаэробные бактерии, участвующие в патологическом процессе в концентрации более чем 104 кл/мл.

Таким образом, при диагностике дисбактериозов (БВ и др.) для определения состава микрофлоры влагалища, можно порекомендовать комплексное ПЦР-исследование мазка с заднего свода влагалища на условно-патогенные бактерии и нормофлору:

1. мобилюнкусы, бактероиды, превотеллы, фузобактерии, атопобиум вагинальный, а также гарднереллы, микоплазмы, уреаплазмы и грибы рода кандида (положительный результат при количестве в пробе более 10⁴ кл/мл)

2. лактобактерии (три варианта ответа - менее 10⁴, 10⁴-10⁶, более 10⁶ кл/мл).

При необходимости можно расширить это исследование до патогенных микроорганизмов (хламидии, гонококки, трихомонады, микоплазмы гениталиум).

Помимо перечисленных ПЦР-исследований рекомендуется использовать следующие традиционные методы: проведение аминного теста, измерение рН вагинального секрета, микроскопию мазка (дает информацию о наличии ключевых клеток, лейкоцитозе и др.).

Актуальность лабораторной диагностики дисбактериоза влагалища не вызывает сомнений. Причем существуют индивидуальные особенности развития этих патологических состояний, зависящие от состава условно-патогенной микрофлоры. Эти особенности необходимо учитывать при выборе пути лечения для каждой пациентки.

Лечение

Целью проводимой терапии является элиминация условно патогенных микроорганизмов, нехарактерных для данного биотопа и восстановление нормальной микрофлоры влагалища.

Современное лечение бактериального вагиноза является двухэтапным.

На первом этапе используются антибактериальные препараты, обладающие антианаэробной активностью. К этой группе препаратов относится метронидазол, содержащий имидазоловое кольцо и обладающий выраженной активностью по отношению к неспорообразующим анаэробным бактериям, но не имеющий активности по отношению к гарднереллам. Подавляя рост и размножение неспорообразующих анаэробов метронидазол нарушает синергическое взаимодействие между анаэробами и гарднереллами, что проявляется положительным эффектом в лечении БВ.

Основным альтернативным препаратом в лечении БВ в настоящее время является клиндамицин. Пероральное применение клиндамицина может осложняться развитием псевдомембранозного колита. Учитывая, что наряду с высокой эффективностью при пероральном применении наблюдается большое количество нежелательных побочных реакций, клиницисты отдают предпочтение местному интравагинальному применению этих препаратов (3-х дневный курс лечения). Клиническая эффективность применения метронидазола и клиндамицина достигает 85-94%. К сожалению, клиндамицин не обладает селективным воздействием и наряду с элиминацией бактероидов, превотелл, гарднерелл оказывает негативное влияние и на лактобактерии. Дефицит лактобактерий, усугубляющийся после лечения антибактериальными препаратами служит предрасполагающим фактором для возникновения возвратных БВ. В этой связи, после проведения успешной антибиотикотерапии частота рецидивов БВ достигает 30%. Поэтому важной составной частью лечения БВ является использование препаратов-пробиотиков на втором этапе лечения.

В настоящее время для второго этапа лечения БВ применяются препараты-пробиотики: «Ацилакт», «Лактобактерин», «Бифидумбактерин». Они представляют собой лиофилизированную биомассу лакто- или бифидобактерий, выделенных из кишечника здоровых людей и применяются на тампонах или в виде свечей интравагинально.

В процессе жизнедеятельности вносимых лактобактерий снижается рН вагинального содержимого, возникает антагонистическая активность по отношению к условно патогенным микроорганизмам, стимулируется рост индигенной лактофлоры. Кроме того, в исследованиях последних лет подтвердили и противовоспалительный эффект пробиотиков. Использование препаратов-пробиотиков на втором этапе лечения БВ позволяет значительно снизить частоту рецидивов БВ.

Контроль лечения

Наиболее информативным методом, позволяющим контролировать эффективность лечебных мероприятий, является полноценное микробиологическое исследование отделяемого с заднего свода влагалища (так же, как и для диагностики БВ). К сожалению, этот метод достаточно длительный в исполнении, дорогостоящий и дающий ложноотрицательные результаты в случае персистенции (некультивируемые формы).

Используя полуколичественное определение концентрации лактобактерий методом ПЦР (тест-система ЗАО «ЛАГИС»), можно быстро и надежно контролировать эффективность лечения дисбиоза, так как восстановление микробиоценоза однозначно соответствует восстановлению уровня лактобактерий более 10⁶ кл/мл.

Используя ПЦР-тест-системы ЗАО «ЛАГИС» для выявления условно-патогенных анаэробов (см. выше) можно определить маркеры дисбиоза в диагностическом количестве (более 10⁴кл/мл).

В случае успешного лечения условно-патогенная флора не должна выявляться, так как количество этих бактерий должно уменьшиться до неопределяемого.

 

микробиоценоз
Микробиоценоз – это совокупность популяций разных видов микроорганизмов, которые обитают в определенном биотопе (в водоеме, в полости рта).

У здоровых людей и животных и в биотопах окружающей среды микробиоценоз состоит из большого числа видов (более 300 видов). Как правило, во внутренней среде организма микробиоценоз менее разнообразен.

Качественный и количественный состав зависит от условий обитания, изменчивости микробов, миграции потока и соседних биотопов. В старых биотипах в случаях изменения условий обитания (при развитии патологических процессов или при длительном воздействии антимикробных факторов), а также в молодых биотопах (ожоговых ранах) резко обостряются конкурентные взаимоотношения между сочленами микробиоценоза и организмом хозяина, что может привести к развитию дисбактериоза.

 

 

Биохимический экспресс-анализ слюны (микробиоценоз полости рта)

 

 

Раздел: Исследование слюны

Исследование слюны - Биохимический экспресс-анализ слюны (микробиоценоз полости рта) - это лабораторное исследование, основанное на определении уровня биохимических показателей.

Биохимический анализ слюны на дисбактериоз – это лабораторное исследование, основанное на определении уровня биохимических показателей, а именно метаболитов летучих жирных кислот (уксусной, пропионовой, масляной), которые продуцируют микроорганизмы, живущие в полости рта и отражающие состояние желудочно-кишечного тракта. При различной патологии, как полости рта, так и со стороны желудка, кишечника, печени изменяется микрофлора, а соответственно и биохимические параметры. Определяя спектр летучих жирных кислот, можно судить о локализации и заболевании пищеварительного тракта.

Для исследования метаболитов микрофлоры используется новый способ газожидкостный хроматографический анализ, позволяющий адекватно оценить состояние микробиоценоза ротовой полости. Одним из преимуществ данного метода по сравнению с микробиологическим анализом (посев из ротовой полости) является быстрота его выполнения (2-5 дней).

Дисбактериоз – это изменение как качественного, так и количественного состава бактериальной флоры ротовой полости, возникающее под влиянием различных факторов: характера питания, воспалительных процессов в организме и лечения антибиотиками, физический и психический стресс, оперативные вмешательства, состояние иммунодефицита, проживание человека в нехарактерной для него зоне. Микроорганизмы участвуют в процессах пищеварения с образованием метаболитов – летучих жирных кислот (уксусная, пропионовая, масляная). Результаты изучения летучих жирных кислот в ротовой полости показали, что уменьшение или увеличение концентраций кислот соотносится с определённой патологией, таким образом, легко можно диагностировать пародонтоз, гингивит, стоматит. Возможности данного анализа обширны, он позволяет оценить состояние микрофлоры непосредственно полости рта, а также составить представление о функции желудка, кишечника, печени.

На основании полученных данных производится индивидуальный подбор терапии выявленной патологии, в случае эффективного лечения происходит нормализация количественного и качественного состава жирных кислот в полости рта.

Ценность данного исследования в том, что оно позволяет понять характер изменений микробиоценоза ротовой полости и выявить основную патологию, приведшую к его развитию.

Слюна - прозрачная бесцветная жидкость, жидкая биологическая среда организма выделяемая в полость рта тремя парами крупных слюнных желез (подчелюстные, околоушные, подъязычные) и множеством мелких слюнными железами полости рта.

В полости рта образуется смешанная слюна или ротовая жидкость, состав которой отличается от состава смеси секретов желез, так как в ротовой жидкости присутствуют микроорганизмы и продукты их жизнедеятельности и различные компоненты пищи, компоненты зубного налета и зубного камня. Слюна смачивает полость рта, способствуя артикуляции, обеспечивает восприятие вкусовых ощущений, смазывает пережёванную пищу. Кроме того, слюна очищает полость рта, обладает бактерицидным действием, предохраняет от повреждения зубы. Под действием ферментов слюны в ротовой полости начинается переваривание углеводов.
Слюна обладает pH от 5,6 до 7,6. На 98,5 % и более состоит из воды, содержит соли различных кислот, микроэлементы и катионы некоторых щелочных металлов, лизоцим, ферменты амилазу и мальтазу, расщепляющие углеводы до олиго- и моносахаридов, а также другие ферменты, некоторые витамины. Также состав секрета слюнных желез меняется в зависимости от характера раздражителя.

 

 

СРЕДСТВА РЕГУЛЯЦИИ МИКРОБИОЦЕНОЗА У ЖИВОТНЫХ

Эпидемиологическая статистика последних лет свидетельствует о чрезвычайно высоком проценте дисбактериозов ЖКТ среди домашних животных от 70 до 90%. Число больных дисбактериозом животных сравнимо с количеством людей, которых прямо или косвенно коснулись сталинские репрессии, что лишний раз доказывает значимость проведения комплексных мероприятий для профилактики и лечения заболевания. В современной терминологии под дисбактериозом (дисбиоценозом или дисбиозом) понимают изменение количественного и качественного состава бактериальной микрофлоры организма, обусловленное нарушением микроскопической экологии в результате ослабления защитных и компенсаторных механизмов организма (срыв процесса адаптации). Нарушения нормофлоры в организме животных часто развиваются на фоне различных видов инфекционных и соматических патологий. Основными факторами, определяющими формирование дисбактериоза, являются неблагоприятные экологические факторы (загрязнение воды, воздуха), нерациональное питание животных, широкое применение антибиотиков, сульфаниламидов, гормональных и других средств, применяемых при откорме скота. Как правило, состояние дисбактериоза животных вторично и осложняет течение основного заболевания. Поэтому средства для коррекции микробиоценоза чаще используют как вспомогательные средства в комплексной терапии основного заболевания животного, сопровождающегося дисбактериозом. Первичный дисбактериоз встречается в основном у животных первых месяцев жизни, который возникает на фоне неразвитой иммунной системы. Следует подчеркнуть, что на практике не всегда просматривается четкая корреляция между степенью нарушения микробиоценоза и клиническим проявлением дисбактериоза. Это подтверждается данными о значительном количестве латентных, субклинических форм дисбактериоза у домашних животных. Компенсированная форма нарушения микробиоценоза является неблагоприятным фоном любой патологии животных и нуждается в своевременной коррекции с помощью средств, способствующих восстановлению нормальной флоры. Комплекс этих обстоятельств и побудил активное развитие этого направления в производстве лекарственных средств, премиксов и комбикормов для животных. Больших успехов в данной сфере достигло русское зарубежье, заложив платформу для дальнейшего изучения проблемы. Решение вопросов регуляции равновесия нормофлоры является чрезвычайно актуальной задачей, стоящей перед целым спектром средств разнородных по своему происхождению, свойствам и механизмам взаимодействия с ассоциацией микроорганизмов ЖКТ животных. Все средства, использующиеся для регуляции микробиоценоза ЖКТ животного, можно охарактеризовать как группу средств, состоящую из продуктов различных категорий (лекарственные средства, комбикорма, премиксы). Они обладают различными степенями селективности, механизмами, принципами и уровнями воздействия на равновесие индигенной микрофлоры ЖКТ, и могут использоваться для комплексной профилактики, терапии дисбактериозов и реабилитации больных животных этого профиля. Все средства, регулирующие равновесие индигенной микрофлоры (микробиоценоз) ЖКТ, условно можно разделить на две ассоциации. К первой группе относятся средства с неселективным принципом воздействия, антимикробная избирательная активность, которой отсутствует (кишечные антисептики, антибиотики, ферментные препараты, энтеросорбенты, иммуномодуляторы, вяжущие средства, пищевые волокна, обволакивающие, противовоспалительные средства и витамины). Вторая группа объединяет средства селективного (избирательного) воздействия: эубиотики (средства, содержащие живые культуры микроорганизмов нормофлоры), пробиотики (средства, содержащие культуры микроорганизмов, не являющихся представителями нормофлоры – самоэлиминирующиеся, транзитные антагонисты), постбиотики (средства содержащие продукты жизнедеятельности нормофлоры) и другие. Далеко не все средства, регулирующие микробиоценоз ЖКТ животных, могут являться добавками к основному корму, а выступают как самостоятельные лекарственные средства.

 

 

Становление микробиоценоза кишечника

Новорожденный ребенок не имеет ни сформированного биоценоза, ни развитой системы барьерной, в том числе иммунологической, защиты. Общепринято считать, что первое заселение ЖКТ происходит в процессе родов, однако есть данные о наличие небольшого количества микробов в кишечнике даже внутриутробно в последние недели гестации. Предполагают, что эти бактерии проникают из кишечника матери, поскольку идентичны штаммам материнской кишечной флоры.

Родовые пути беременной женщины в последние недели перед родами несколько изменяют свой микробиологический пейзаж, в котором начинают преобладать свойственные кишечнику виды: лактобациллы, бифидо-бактерии, молочнокислые стрептококки и т.д. Возможно, эти микробы проникают туда из кишечника матери и становятся той самой первой микробиологической закваской, которая определяет формирование стартового кишечного биоценоза новорожденного.

Действительно, одни и те же микробы удается выделить из родовых путей матери, ротовой полости новорожденного в первые часы жизни и стула новорожденного на 3-4 день жизни. Однако плазмидный профиль энтеробактерий, лактобактерий и бифидобактерий влагалища и толстой кишки матери не совпадает, но совпадают свойства микрофлоры кишечника матери и ребенка. Более того, спектр штаммов бифидобактерий в первые дни жизни ребенка соответствует таковым у матери и представлен, в основном, свойственными взрослым В.adolescentis и В.breve.

Таким образом, первичное заселение ЖКТ новорожденного ребенка происходит под влиянием кишечной микрофлоры матери. Под влиянием кишечной микрофлоры матери формируется биоценоз ее родовых путей, некоторые штаммы лактобактерий кишечного происхождения обнаружены на коже ареол молочных желез вокруг соска. Этот факт подтверждает необходимость раннего прикладывания новорожденного к груди матери. Дети, рожденные путем Кесарева сечения, лишенные естественного микробиологического заряда в родах, демонстрируют в дальнейшем более долгий путь становления кишечной флоры. Эти данные подчеркивают важность состояния здоровья матери, биоценоза ее кишечника и родовых путей и открывают возможности для профилактики дисбиоза у ребенка путем приема матерью про- и пребиотических препаратов в последние недели перед родами.

Таблица 1. Динамика секреции иммуноглобулинов с грудным молоком
Возраст ребенка (день жизни)	Секреция иммуноглобулинов (мг/сут)
IgG	IgM	IGА
7-28
29-50

В целом, биоценоз новорожденных характеризуется широким спектром высеваемой из кала флоры, при этом могут доминировать аэробы, практически всегда присутствуют условно-патогенные бактерии -любой ребенок в первые недели жизни проходит период транзиторного дисбиоза. Эти микроорганизмы меняют первоначально аэробный ЖКТ, делая его пригодным для колонизации анаэробами: бифидобактериями, бактероидами, клостридиями и т.д.

В дальнейшем становление биоценоза во многом определяется характером питания: у детей, находящихся на грудном вскармливании, уже через несколько недель в микробном пейзаже доминируют бифидобактерий, на искусственном - длительно сохраняется смешанный характер флоры, она более разнообразна, чаще наблюдается присутствие аэробных и анаэробных условных патогенов. Спектр бифидобактерий также отличается: у детей на грудном вскармливании доминируют В.bifidum, на искусственном - В.longum, В.breve, В. infantis. В чем причина этих различий? Она заключается в свойствах материнского молока.

Молоко, являясь незаменимым пищевым субстратом, одновременно служит источником поступления более ста биологически активных субстанций, среди которых неспецифические факторы защиты (лакто-феррин, лизоцим, пропердин, интерферон и т.д.), иммуноглобулины, макрофаги, активные лимфоциты. В частности, с молоком матери ребенок ежедневно получает более 1000 мг секреторного IgА - необходимого компонента для формирования кишечного барьера. В молоке, а также в области ареолы соска на коже матери обнаруживаются лактобактерий (L.gasseri, L.rhmnosus), по своим характеристикам они соответствуют микрофлоре кишечника матери.

Термическая обработка полностью инактивирует иммуноглобулины, поэтому донорское молоко не обладает этими иммунозместительными свойствами. В молозиве и молоке матерей недоношенных новорожденных содержание SIgА в 2-2,5 раза ниже, что является одной из причин меньшей иммунологической "защищенности" этих детей.

Таблица 2. Иммунологические и фармакологически активные компоненты и гормоны в молоке
Гуморальные	Клеточные	Гормоны и гормоноподобные субстанции
1. SIgА, IgG, IgM, IgE, IgD, секреторный компонент. 2. Продукты Т-лимфоцитов 3. Неспецифические факторы: o Комплемент o Хемотаксический фактор o Пропердин o Интерферон o альфа-фетопротеин o бифидогенные факторы o антистафилококковые факторы o антиадгезивные субстанции o фактор эпидермального роста o лиганд фолатов o антивирусные факторы o ингибитор миграции 4. Лактоферрин, трансферрин, В12-связывающий протеин, кортикоид-связывающий протеин 5. Энзимы: o Лизоцим o Липопротеин-липаза o Лейкоцитарные энзимы	Т- и В-лимфоциты Нейтрофилы Макрофаги Эпителиальные клетки	Эпидермальный фактор роста Простагландины Релаксин Нейротензин Соматостатин Бомбезин Гонадотропины Овариальные стероиды Тиреотропный гормон Тироксин, трийодтиронин Адренокортикотропный гормон Кортикостероиды Пролактин Эритропоэтин Инсулин

Молоко и молозиво содержат также антиинфекционные неспецифические гуморальные факторы (таблица 2):

• лактоферрин - доминирующий железосодержащий белок молока (нормальная концентрация его 2 г/л и более), в молозиве концентрация его еще выше - до 4-18 г/л. При пастеризации лактоферрин также разрушается.
• лизоцим содержится в молоке в высокой концентрации (100 мкг/мл), которая значительно превышает таковую в плазме крови (4-10 мгк/мл). В молозиве содержание его еще выше (450-500 мкг/мл). При пастеризации молока уровень лизоцима падает в 5-6 раз. У матерей недоношенных в молозиве и молоке содержится лизоцима гораздо больше, чем у матерей доношенных, то есть недоношенный ребенок получает в сутки лизоцима больше, чем доношенный.
• комплемент - это одно из главных звеньев, осуществляющих "стыковку" специфического и "неспецифического" иммунитета. В молозиве отмечен высокий уровень С₃ (20% от концентрации в крови), в молоке - в 2 раза меньше. Комплемент разрушается в кислой среде, но так как у новорожденных в желудке почти нейтральный рН, то разрушения его не происходит, и в сочетании с IgМ и IgG он может образовывать иммунные комплексы и оказывать бактерицидное действие. Грудное молоко содержит также пропердин, пероксидазу, интерферон.

В формировании местной иммунной системы кишечника новорожденного ребенка принимают участие лимфоциты молока. Молочную железу и кишечник можно рассматривать как единую защитную систему, так как В- и Т-лимфоциты способны мигрировать из лимфатической ткани кишечника матери в ее молочную железу, то есть лимфоциты грудного молока проходят своеобразное "обучение" в кишечнике и сенсибилизированы именно к кишечной микрофлоре. Они попадают с молоком матери в кишечник ребенка и осуществляют не только местную защиту, но и способны проникать в кровь и участвовать в общем иммунном ответе. Лимфоциты молока очень активны, они способны к РБТЛ, синтезу иммуноглобулинов, продукции комплемента и интерферона. Содержат грудное молоко и макрофаги. Все клеточные элементы молока термолабильны и при пастеризации разрушаются.

Таблица 3. Качественный и количественный состав микрофлоры кише ⇐ Предыдущая1234567Следующая ⇒ Поделиться: ©2015 - 2024 megalektsii.ru Все авторские права принадлежат авторам лекционных материалов. Обратная связь с нами...