 |
Определение групп крови стандартными гемагглютинирующими сыворотками.
|
|
|
|
Министерство здравоохранения РФ
ГОУ ВПО Тюменская государственная
Медицинская академия
Кафедра общей хирургии
Методические рекомендации
Переливание крови
Тюмень - 2009 г.
Методические рекомендации для студентов 3 курса лечебного факультета.
Составители: профессор Цирятьева С.Б., доцент Горбачев В.Н., к.м.н. Чернов И.А., профессор Кечеруков А.И., доцент Алиев Ф.Ш., ассистент Барадулин А.А., ассистент Комарова Л.Н.
Утверждено ЦКМС ТюмГМА в качестве учебно-методического пособия (протокол № 3 от 16.12.09)
Изложены понятия о группах крови и резус – факторе. Детально описаны методы определения группы крови и резус фактора, способы гемотрансфузии и правила переливания крови.
Переливание крови
История переливания крови насчитывает более 3-х веков. предпринимаемые с 17 века попытки переливания крови человеку чаще всего кончались неудачей. Благоприятный исход в этот период мог быть чисто случайным, так как вопросы взаимодействия крови донора и реципиента в то время были не изучены. В 1901 году австриец Карл Ландштейнер установил, что в зависимости от наличия в эритроцитах изоантигенов, а в плазме изоантител все человечество можно разделить на 3 группы. В 1907 году чех Я.Янский дополнил данные Ландштейнера, выделив 4-ю группу, и создал классификацию групп крови, принятую с 1921 года как международную.
Цель занятия: изучить способы определения группы крови и резус – фактора, способы и правила переливания крови.
Студент должен знать: понятия о группах крови по системе АВО и резус – факторе, способы определения групп крови и резус – фактора.
Студент должен уметь: определить группу крови и резус фактор цоликлонами и стандартными сыворотками, дать макроскопическую оценку годности крови к переливанию, провести пробы на совместимость по системе АВО, резус – фактору, биологическую пробу, собрать систему для переливания крови.
|
|
|
План изучения темы:
1. Понятия о группах крови и резус факторе
2. Способы определения групп крови и резус – фактора
3. Показания и противопоказания к переливанию крови
4. Макроскопическая оценка годности крови к переливанию
5. Способы переливания крови и ее компонентов
6. Оформление протокола гемотрансфузии
7. Посттрансфузионные реакции и осложнения, их профилактика и лечение
Г Р У П П Ы К Р О В И.
Для возникновения гемолитических посттрансфузионных реакций и несовместимости матери и плода имеет значение, прежде всего антигенная структура эритроцита. АНТИГЕНЫ - вещества белковой природы, способные вызывать в организме образование антител и вступать с ними в реакцию. В организме человека кроме иммунных антител, которые вырабатываются в ответ на попадание в него антигена, есть естественные антитела, существующие с момента рождения и обусловленные генетическими признаками, наследуемыми от родителей. Примером естественных антител являются групповые АГГЛЮТИНИНЫ a и b. Они специфичны и вступают в реакцию с соответствующими антигенами - АГГЛЮТИНОГЕНАМИ А и В. Температурный оптимум реакции +150 - +250 С. Все человечество в зависимости от содержания в эритроцитах антигенов (агглютиногенов) А и В делится на 4 группы:
1 группа - не содержит антигенов;
2 группа - содержит агглютиноген А;
3 группа - содержит агглютиноген В;
4 группа - содержит агглютиногены А и В.
В крови этих групп в строгой зависимости от наличия или отсутствия групповых антигенов А и В, которые получили название агглютиногенов, содержатся групповые антитела, которые иначе называются агглютининами (изоагглютининами, групповыми агглютининами). Система крови остается стабильной при отсутствии в ней одноименных агглютининов и агглютиногенов (антител и антигенов). В этом случае не происходит их взаимодействия, проявляющегося агглютинацией (склеиванием) и гемолизом (разрушением) эритроцитов. Таким образом, по серологическим свойствам эритроцитов и плазмы выделяют 4 группы крови.
|
|
|
Процентное соотношение лиц с различными группами крови в различных местах земного шара не одинаково. В странах СНГ оно приблизительно таково:
| О(I гр.) | А(II гр.) | В(III гр.) | АВ(IV гр.). |
| 34% | 37% | 21% | 8% |
Р Е З У С - Ф А К Т О Р.
В 1937 году Ландштейнер и Винер открыли резус-фактор Rh - фактор). В ходе опытов по иммунизации кролика эритроцитами обезьяны макака-резус (Makakus rhesus) была получена сыворотка, агглютинировавшая 85% образцов эритроцитов человека - независимо от групповой принадлежности. Так было установлено наличие в эритроцитах человека вещества антигенной природы, аналогичной таковому у макаки-резус. Оно получило название резус-фактор. Люди, в крови которых этот фактор есть, стали обозначаться как "резус-положительные", те, у кого он не определялся - "резус отрицательные". Резус-фактор содержится в крови около 85% людей и в отличие от агглютиногенов (антигенов) А и В не имеет, как правило, естественных антител. Антитела против резус-фактора (анти-резус) возникают только вследствие сенсибилизации резус-отрицательного (не имеющего резус-фактора) человека эритроцитами, содержащими резус-фактор. Антитела могут также появиться в крови резус-отрицательной беременной женщины в ответ на резус-положительный плод. Резус-несовместимость (резус-конфликт) возникает в случае повторного контакта сенсибилизированного человека с резус-фактором (переливание крови, беременность).
В крови существует множество других антигенов. Они обозначены как системы МN, Келл, Даффи, Льюис, Лютеран и др. Выраженные посттрансфузионные осложнения и гемолитическая болезнь вызываются ими крайне редко. В настоящее время антигены выявлены в лейкоцитах, тромбоцитах, других белковых структурах общей численностью около 300 видов.
Перед каждой гемотрансфузией обязательны следующие исследования крови и пробы:
|
|
|
1. Определение группы крови - системы АВО у донора и реципиента.
2. Определение резус - принадлежности крови донора и реципиента.
3. Определение групповой совместимости крови донора и реципиента.
4. Определение резус - совместимости крови донора и реципиента.
5. Проведение биологической пробы.
Только правильное и полное выполнение этих проб и реакций гарантирует от переливания несовместимой крови, от развития гемотрансфузионных осложнений.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУПП КРОВИ СИСТЕМЫ АВО.
Групповая принадлежность крови определяется реакцией агглютинации при помощи стандартных гемагглютинирующих сывороток или цоликлонов.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУПП КРОВИ СТАНДАРТНЫМИ ГЕМАГГЛЮТИНИРУЮЩИМИ СЫВОРОТКАМИ.
Стандартные гемагглютинирующие сыворотки системы (из крови доноров или ретроплацентарной крови) поступают в ампулах по 2 мл. Перед определением следует убедиться в наличии на этикетке ампулы обозначения группы сыворотки, срока годности, номера серии и наименования учреждения его изготовившего. Срок годности сыворотки- 4 месяца со дня изготовления. Если в ампулах с сыворотками обнаруживаются хлопья или взвесь, то они для использования не пригодны, несмотря на не истекший срок. Для удобства пользования сыворотка окрашивается в различные цвета. Сыворотка 1-й группы не окрашивается, 2-й группы - окрашивается в голубой цвет, 3-ей группы в розовый, 4-ой группы в желтый. Аналогичного цвета полосами маркируются ампулы. Ампулы хранятся в холодильнике при температуре +4о-+6о С или при комнатной температуре. Сыворотками лучше пользоваться в день вскрытия ампул, но допускается хранение открытых ампул 3-4 дня в холодильнике при условии, если горлышко заклеивается пластилином, лейкопластырем, закрывается ваткой.
Определение группы крови проводится при температуре +150 - +250С на маркированной плоскости (тарелке) белого цвета, где записывается фамилия лица, у которого определяется кровь, согласно международной классификации маркируются точки нанесения сыворотки. Используются стандартные сыворотки двух серий групп О(I), А(II), В(III). После их нанесения получается шесть капель, расположенных в два ряда в следующем порядке: О(I), А(II), В(III). Каждая сыворотка наносится своей пипеткой. Исследуемая кровь углами предметного стекла или стеклянными палочками вносится в сыворотку в количестве в десять раз меньшем и тщательно перемешивается. Можно перемешивать кровь с сывороткой одним и тем же углом предметного стекла (или стеклянной палочкой), но в этом случае после каждого перемешивания необходимо промывать стекло в воде и насухо вытирать. За ходом реакции, в общей сложности, наблюдают не менее 5-ти минут, периодически покачивая тарелку. В лунки, где к третьей минуте наблюдения произошла агглютинация, вносят по капле физ.раствора и наблюдают еще две минуты. Добавление физиологического раствора не разрушает истинной агглютинации и позволяет отдифференцировать ее от псевдоагглютинации, обусловленной самопроизвольным склеиванием эритроцитов в монетные столбики. Результат оценивается по наличию агглютинации. Эритроциты группы О(I) не содержат антигенов и в реакцию агглютинации не вступают. Эритроциты группы А(II) не дают агглютинации только с сывороткой своей группы, эритроциты В(III) также не дают агглютинации только с сывороткой своей группы. Если во всех сыворотках произошла агглютинация, то для исключения неспецифической панагглютинации и подтверждения, что это эритроциты IV группы крови, следует дополнительно исследовать их стандартной сывороткой группы АВ (IV). Для этого используется одна сыворотка, исследование проводится с соблюдением всех выше указанных условий. Сыворотка группы АВ(IV) не содержит никаких антител, а поэтому не должна давать агглютинации. (таблица 1). При определении групп крови следует обратить особое внимание на сроки чтения результата - они не должны быть менее 5-ти минут. Так разновидность второй группы крови А(II) дает агглютинации, как правило, раньше чем обычно - к исходу 3-4-ой минуты.
|
|
|
Таблица 1.
| Результат реакции с изогемагглютинирующими сыворотками группы | Исследуемая кровь принадлежит к группе | |||
| 0аb(I) | Аb(II) | Ва(III) | АВ(IV) | |
| - | - | - | - | 0(I) |
| + | - | + | - | А(II) |
| + | + | - | - | B(III) |
| + | + | + | - | AB(IV) |
Оценка результатов определения групп крови при помощи стандартных гемагглютинирующих сывороток. Знаком плюс (+) обозначено наличие агглютинации, знаком минус (-) - её отсутствие.
|
|
|
