 |
Идентификация ЛРС, содержащего алкалоиды
|
|
|
|
бумажный хроматография лекарственный растительный
Алкалоиды в растительном сырье обычно содержатся в виде солей, поэтому до извлечения необходимо перевести соли алкалоидов в свободные основания, что достигается обработкой сырья различными щелочами (КН4ОН, КаОН, Са(ОН)2, Ва(ОН)2 и др.). При подборе щелочи учитывают свойства алкалоидов. Сильные щелочи, например NаОН, используют при выделении сильных оснований алкалоидов и алкалоидов, находящихся в растительном сырье в виде прочных соединений с дубильными веществами (кора хинного дерева, кора гранатового дерева), но не применяют при выделении алкалоидов, имеющих в молекуле фенольные гидроксилы. Такие алкалоиды, как, например, морфин, сальсолин, некоторые алкалоиды спорыньи, вследствие образования фенолятов органическим растворителем не извлекаются, так- как феноляты, как правило, хорошо растворимы в воде и нерастворимы в органических растворителях. Для переведения их солей в основания используют обычно аммиак. При выделении алкалоидов, имеющих сложноэфирную группировку (атропин, гиосциамин, скополамин и др.) также используют аммиак и другие слабые щелочи, так как сильные щелочи могут вызывать разложение алкалоидов. Не следует применять N3014 и при выделении алкалоидов из семян, содержащих жирные масла, так как едкие щелочи вызывают омыление жиров. Мыла же способствуют образованию эмульсий.
Разделение суммы алкалоидов. В растительном сырье обычно содержится не один, а несколько алкалоидов, и в большинстве случаев при обработке растительного сырья в извлечение переходят все или большинство алкалоидов (сумма). Отделить один «нужный» алкалоид от остальных, а тем более разделить сумму алкалоидов на индивидуальные соединения очень сложно. Так как большинство алкалоидов обладает различными физическими и химическими свойствами, предложить единую схему разделения трудно. Описано большое число методов и их различных модификаций, позволяющих разделить сумму алкалоидов на отдельные алкалоиды.
|
|
|
Разделение суммы алкалоидов на основании их различной растворимости в органических растворителях.
. В некоторых случаях частичное разделение происходит уже при обработке органическим растворителем первоначального водно-кислотного извлечения после подщелачивания. При его обработке, например, этиловым эфиром в органический растворитель могут перейти не все, а только часть алкалоидов. Оставшиеся в первоначальном растворе алкалоиды можно извлечь, используя для этого другие органические растворители (хлороформ, дихлорэтан и др.). Иногда таким способом можно достигнуть хороших результатов. Но чаше у алкалоидов одного растения различие в растворимости бывает выражено не очень резко и поэтому достигается только частичное разделение. В таких случаях требуется или повторное проведение этой операции, или применение другого способа разделения.
. При последовательной обработке остатка (суммы алкалоидов), полученного после отгонки растворителя, различными органическими растворителями (петролейный эфир, бензол, хлороформ и др.) в некоторых случаях можно достигнуть частичного разделения суммы алкалоидов.
Чаще всего используют следующие системы растворителей;
) м-бутанол - уксусная кислота - вода (5:1:4);
) н-бутанол - уксусная кислота - вода (10:2:5);
) н-бутанол - соляная кислота - вода (100:4: вода до насыщения);
) этилацетат-уксусная кислота-вода (11: 21: 85);
) н-бутанол - пиридин - вода (10: 2; 5) и -др.
Для обнаружения алкалоидов высушенную хроматограмму обрабатывают каким-либо реактивом, дающим с алкалоидами окрашенные соединения. Чаще всего для этого используют реактив Драгендорфа. При обработке хроматограммы этим реактивом появляются оранжевые или оранжево-красные пятна (алкалоиды) на желтом фоне. Можно для обнаружения алкалоидов использовать пары йода (образуются бурые пятна). Для обнаружения стероидных алкалоидов можно использовать насыщенный хлороформный раствор треххлористой сурьмы с последующим нагреванием при 105оС. Появляется кирпично-красное окрашивание.
|
|
|
Идентификация ЛРС, содержащего антраценпроизводные
При исследовании состава антрагликозидов готовят водные извлечения: при анализе состава агликонов сырье экстрагируют бензолом, этиловым или метиловым спиртом, которые при нагревании более или менее удовлетворительно экстрагируют как свободные антраценпроизводные, так и их гликозидные формы.
,3 г измельченного растительного материала нагревают с 3 мл этилового спирта в течение 5 мин, доводя до слабого кипения. После остывания фильтруют. 0,1 мл фильтрата наносят па линию старта и хроматографируют в системе этилацетат - метиловый спирт - Вода (100:17:13) на пластинках «Силуфол». Время хроматографирования 30-40 мин. Хроматограмму высушивают на воздухе, обрабатывают 5%-ным КаОН в этиловом спирте и рассматривают при дневном свете и УФ свете до и после обработки. Одновременно хроматографируют стандарт «свидетель», нанося его раствор рядом с исследуемым извлечением. По величине R 1, характеру окраски и флуоресценции пятен идентифицируют антраценпроизводные исследуемого сырья.
Вывод
Использование хроматографии на бумаге имеет ряд существенных недостатков: зависимость процесса разделения от состава и свойств бумаги, изменение содержания воды в порах бумаги при изменении условий хранения, очень низкая скорость хроматографирования (до нескольких суток), низкая воспроизводимость результатов, поэтому сейчас бумажная хроматография уже практически не применяются, а методы её давно не совершенствуются.
Метод тонкослойной хроматографии оказался эффективнее благодаря большей скорости эксперимента, пригодности для препаративных целей и более широким возможностям обнаружения
Список литературы
|
|
|
1. Химический анализ лекарственных растений. / Под ред. Н.И. Гринкевича, Л.Н. Сафронича. − М., 1983. − 176 с.
2. Избранные лекции по фармакогнозии. Учеб. пособие. / Левинова В.Ф., Решетникова М.Д., Хлебников А.В. / Под ред. Олешко Г.И. изд. 3-е. - Пермь, 2006. - 305 с.
. Избранные лекции по токсикологической химии. / Под ред. Малковой Т.Л. − Пермь, 2005. - 152 с.
. Муравьева Д.А., Самылина И.А., Яковлев Г.П. Фармакогнозия. - М.: Медицина, 2007. − 656 с.
. Зайчикова С.Г., Самылина И.А. Химико-фармацевтический журнал. Т. 35. − №5. - 2001.
. ГОСТ 28365-89. Реактивы. Метод бумажной хроматографии.
|
|
|
