 |
Простые и сложные методы окраски (техника окраски по Граму, по Бурри-Гинсу)
|
|
|
|
Классификация микроорганизмов.
Классификация (систематика) микроорганизмов Микроорганизмы - это организмы, невидимые невооруженным глазом из-за их незначительных размеров. Этот критерий - единственный, который их объединяет. В остальном мир микроорганизмов еще более разнообразен, чем мир макроорганизмов. Согласно современной систематике, микроорганизмы относятся к трем царствам:
Vira - к ним относятся вирусы;
Eucariotae - к ним относятся простейшие и грибы;
Procariotae - к ним относятся истинные бактерии, риккетсии, хламидии,микоплазмы, спирохеты, актиномицеты.
Основные отличия прокариот от эукариот состоят в том, что прокариоты не имеют:
морфологически оформленного ядра(нет ядерной мембраны и отсутствует ядрышко), его эквивалентом является нуклеоид, или генофор, представляющий собой замкнутую кольцевую двунитевую молекулу ДНК, прикрепленную в одной точке к цитоплазматической мембране; по аналогии с эукариотами эту молекулу называют хромосомной бактерией;
Морфологические особенности отдельных групп микроорганизмов.
По форме выделяют следующие основные группы микроорганизмов.
1.Шаровидные или кокки (с греч.- зерно).
2.Палочковидные.
3.Извитые.
4.Нитевидные.
Кокковидные бактерии (кокки) по характеру взаиморасположения после деления подразделяются на ряд вариантов
Классификация бактерий по Берджи.
I– грамотрицательные эубактерии;
II– грамположительные эубактерии;
III – эубактерии, лишенные клеточной стенки – микоплазмы (Mollicutes);
IV– археобактерии (Archaea).
Функциональные особенности прокариот.
Не имеют оформленного ядра и других мембранных органоидов, типа аг и мх
кольцевая двуцепочечная ДНК. не явл хромосомой так как не соединена с гистонами
|
|
|
имеют рибосому 70s
наличие жгутиков, плазмид и газовых вакуолей
могут иметь слизистую капсулу. служит доп защитой от уф излучения, высыхания. образована полисахаридами. могут иметь клеточную муреиновую клеточную стенку.
размножение - делятся простым бинарным делением. ДНК реплецируется и между дочерними образуется перегородка.
половой процесс обеспечивается конъюгацией, трансформацией и трансдукцией
Особенности условно-патогенных и патогенных микроорганизмов.
Условно Микробы вызывающие инфекции забол. При определеных условиях внешней или внутреней среды орг,при ослаблении имуннитета
Патогенные виды потенциально способны вызывать инфекционное заболевание
Строение бактериальной клетки.
Отличия бактерий от других клеток
1. Бактерии относятся к прокариотам, т. е. не имеют обособленного ядра.
2. В клеточной стенке бактерий содержится особый пептидогликан – муреин.
3. В бактериальной клетке отсутствуют аппарат Гольджи, эндоплазматическая сеть, митохондрии.
4. Роль митохондрий выполняют мезосомы – инвагинации цитоплазматической мембраны.
5. В бактериальной клетке много рибосом.
6. У бактерий могут быть специальные органеллы движения – жгутики.
7. Размеры бактерий колеблются от 0,3–0,5 до 5—10 мкм.
4. Особенности строения Гр + и Гр – бактерий.
У грамположительных бактерий окрашиваются фиолетовым при промывание оставляют цвет в состав клеточных стенок входят, кроме мукопептидов, полисахариды (сложные, высокомолекулярные сахара), тейхоевые кислоты (сложные по составу и структуре соединения, состоящие из сахаров, спиртов, аминокислот и фосфорной кислоты).
Стенки грамотрицательных бактерий окрашиваются в красный
более сложные по химическому составу, в них содержится значительное количество липидов (жиров), связанных с белками и сахарами в сложные комплексы — липопротеиды и липополисахариды. Муреина в клеточных стенках грамотрицательных бактерий в целом меньше, чем у грамположительных бактерий. Структура стенки грамотрицательных бактерий также более сложная. С помощью электронного микроскопа было установлено, что стенки этих бактерий многослойные.
|
|
|
Техника приготовления препарата.
Простые и сложные методы окраски (техника окраски по Граму, по Бурри-Гинсу)
Методика окраски по Граму
1. На фиксированный мазок наносят карболово-спиртовой раствор генцианового фиолетового на 1-2 минуты, затем краситель сливают.
2. Наносят раствор Люголя на 1 мин.
3. Обесцвечивают препарат этиловым спиртом в течение 30-60 секунд до прекращения отхождения фиолетовых струек красителя.
4. Препарат промывают водой.
5. Мазок докрашивают водным раствором фуксина в течение 1-2 минут, промывают водой и высушивают фильтровальной бумагой.
Методика окраски по Бурри-Гинсу. Некоторые виды бактерий продуцируют слизистое вещество, которое концентрируясь вокруг тела микробной клетки, образует капсулу. Данная окраска служит для выявления у бактерий капсул.
1. На середину предметного стекла наносят капельку туши и смешивают ее петлей с каплей культуры.
2. Делают мазок ребром покровного стекла, дают высохнуть и фиксируют над пламенем горелки.
3. Затем промывают дистиллированной водой и красят 5-10 мин фуксином.
4. Затем вновь мазок промывают водой и высушивают. При микроскопии бактерии окрашиваются в красный цвет, фон черный, а капсулы неокрашенные.
7. Методы микробиологических исследований.
Различают следующие основные методы: микроскопический, микробиологический, экспериментальный, иммунологический.
1. Микроскопический - изучение микробов в окрашенном и неокрашенном (нативном) состоянии с помощью различных типов микроскопов. Метод позволяет определить форму, размеры, расположение, структурны элементы и отношение к окраске микробов. Иногда по характерным морфологическим особенностям можно определить вид микроба (грибов, простейших, некоторых бактерий).
2. Микробиологический - (бактериологический, культурный) - посев материала на питательные среды для выделения чистой культуры и определения ее вида (идентификации). Культурой в микробиологии называют совокупность микроорганизмов. Чистая культура - скопление микробов одного вида, выращенных на питательной среде. Штамм - чистая культура, выделенная из конкретного источника в определенное время, (например, штамм Shigella flexneri №8, выделенный от больного К. 20 сентября). Клон - генетически однородная чистая культура, полученная в результате бесполого размножения I клетки (используется при изучении микробных популяций, в генетических экспериментах).
|
|
|
3. Экспериментальный (биологический) - заражение микробами лабораторных животных. Метод позволяет:
- выделить чистую культуру микробов, плохо растущих на питательных средах;
- изучить болезнетворные свойства микроба;
- получать иммунобиологические препараты для специфической профилактики, диагностики и лечения.
4. Иммунологический (в диагностике инфекций) - изучение ответных специфических реакций макроорганизма на контакт с микробами.
|
|
|
