 |
Контрольні питання. Заняття № 4. Тема: обладнання мікробіологічної лабораторії та методи стерилізації. Зміст заняття. Самостійна робота студентів
|
|
|
|
КОНТРОЛЬНІ ПИТАННЯ.
1. Яке значення в мікробіології має фарбування мікробних клітин за методом Грама?
2. Сутність фарбування мікробів за методом Грама;
3. Які фарби і розчини застосовуються під час фарбування за методом Грама?
4. Техніка фарбування мікробів за методом Грама;
5. Складові частини бактеріальної клітини;
6. Будова клітинної оболонки бактерій
7. Спори бактерій і умови спороутворення;
8. Сутність фарбування спор і капсул мікроорганізмів;
9. Методи фарбування спор і капсул.
Заняття № 4
Тема: Обладнання мікробіологічної лабораторії та методи стерилізації.
Мета заняття:
Познайомити студентів з:
а) обладнанням і апаратурою мікробіологічної лабораторії;
б) методами стерилізації та принципами роботи стерилізаційної апаратури;
в) лабораторним посудом, технікою його підготування і стерилізацією.
ЛІТЕРАТУРА
IV 69-96; V. 62-66; VI. 52-57; VІІ. 72-75
ЗМІСТ ЗАНЯТТЯ
Викладач:
- проводить опитування студентів з пройденого та наступного матеріалу;
- знайомить з обладнанням, апаратурою та посудом мікробіологічної лабораторії;
- пояснює методи стерилізації, їх сутність і демонструє апаратуру, яка застосовується для стерилізації;
- знайомить з технікою підготовки посуду, матеріалів до стерилізації.
САМОСТІЙНА РОБОТА СТУДЕНТІВ
Студенти вивчають:
а) обладнання, апаратуру і посуд бактеріологічної лабораторії;
б) методи стерилізації (фізичні, хімічні, механічні), апаратуру та принципи її роботи;
в) методи підготовки посуду, матеріалів до стерилізації;
г) роблять малюнки у зошиті.
ОСНАЩЕННЯ ЗАНЯТТЯ
Для проведення заняття потрібно мати в учбовій лабораторії: термостат, автоклав, електричний стерилізатор з набором інструментів, водяну баню, центрифугу, мікроанаеростат, ексикатор, текуче — паровий апарат (Коха), сухо-жаровий шаф (піч Пастера), фільтр Зейтца, свічки Шемберлана, Беркефельда, насос Комовського, апарат Кротова, машину для готування ватних пробок, автоклав матеріали для стерилізації (вата, пробірки, чашки Петрі, шпателі, марля, папір і т. п. ).
|
|
|
Кожного студента забезпечити практикумом з мікробіології.
ОСНАЩЕННЯ МІКРОБІОЛОГІЧНОЇ ЛАБОРАТОРІЇ
Для проведення мікробіологічних досліджень лабораторія повинна мати спеціальну апаратуру і посуд.
Термостати - апарати для вирощування мікроорганізмів. В них підтримується постійна температура від 28 до 430С. Це шафи (дерев'яні або металеві) різних розмірів з подвійними стінками, між якими знаходиться повітря або вода, які підігріваються електрикою. .
Постійна температура забезпечується терморегулятором, робота якого контролюється ртутним термометром.
Мікроанаеростат - апарат для вирощування мікробів-анаеробів. Це металевий циліндр, який герметичне закривається кришкою з гумовою прокладкою. На кришці є вакуумметр і два крани: один для відкачки повітря, другий - для наповнення апарата інертним газом (озоном). В апараті знаходиться штатив для чашок Петрі. Відкачують повітря за допомогою вакуумного насосу, після чого мікроанаеростат з посівами ставлять у термостат.
Центрифуга - апарат, заснований на дії центробіжної сили, використовується для одержання осадку у рідинах.
Лабораторний посуд - до необхідного посуду, який використовується в мікробіологічній лабораторії відносяться: бактеріологічні пробірки та чашки, колби, предметне і покривне скло, спиртівки, штативи, вимірювальні циліндри, фарфорові ступки, воронки, пінцети, шприці, скальпелі, різні склянки, промивалки, олівець по склу і т. п.
|
|
|
Прибор для рахування колоній — напівавтоматичний лічильник, який має голку з пружинним приладом.
Біологічні мікроскопи — МБІ-1, МБА-1, МБІ-2, МБІ-З, МБІ-6, Біолам Р1. Вони використовуються для вивчення форми, розмірів та інших ознак різних мікробів, розмір яких не менше, ніж 0. 2-0. 3 мкм.
РН - метр - прилад для визначення реакції поживного середовища.
Прибор Кротова - використовується для бактеріологічного дослідження повітря. Метод заснований на ударно-пробивній дії струменя повітря, при якому пилові частки, мікроорганізми осідають рівномірно на поверхню МПА. Після вирощування мікробів у термостаті при температурі 370С рахують кількість колоній і роблять перерахунок на зміст бактерій у м3 повітря.
Водяна баня - потрібна для підігрівання невеликої кількості рідини (сироватки), розплавлення поживного середовища.
МЕТОДИ СТЕРИЛІЗАЦІЇ І ОБЛАДНАННЯ.
Під стерилізацією розуміють повне знищення мікроорганізмів у поживному середовищі, посуді та інших матеріалах. Вона широко використовується в мікробіологічній та хірургічній практиці. Існують фізичні і хімічні методи стерилізації.
До фізичних методів, де стерилізуючим фактором є висока температура, відноситься тиндалізація, пастеризація, кип'ятіння, стерилізація текучим паром, стерилізація насиченим паром під тиском, стерилізація сухим жаром, фламбірування.
1. Тиндалізація (дробна стерилізація), проводиться при температурі 56-580С протягом 2 годин 5-6 раз з інтервалом 24 години (для пророщування спор). Використовується для рідин, які містять білок та які загублюють свої властивості під час дії високої температури.
2. Пастеризація - неповна або часткова стерилізація при температурі 60-900 С. Цей метод використовується для знищення неспорових форм мікробів в тому чи іншому їстівному продукті із збереженням його поживної цінності (молоко, фруктові, виноградні соки). Температура і час стерилізації залежать від виду мікроорганізмів. Ультра стерилізація - при температурі 1500С протягом однієї секунди, проводиться в трубчастих апаратах.
3. Кип`ятіння - проводиться в стерилізаторах (використовується для стерилізації шприців, голок, металевих інструментів).
|
|
|
4. Стерилізація текучим паром - проводиться в текучепаровому апараті (апарат Коха) при температурі 1000С протягом. 20-30 хвилин. Стерилізують поживні середовища, які руйнуються при високій температурі (молоко, МПЖ, вуглеводні середовища).
5. Стерилізація насиченим паром під тиском проводиться в автоклавах. Цим методом стерилізується багато поживних середовищ, посуд, інструменти, знезаражуються культури мікробів, трупи лабораторних тварин. Стерилізація проводиться під тиском 1-2 атмосфери, що складає 120-1300С.
6. Стерилізація сухим паром проводиться в сухожарних печах (піч Пастера). В них стерилізують скляний посуд (пробірки, колби, чашки Петрі; флакони), а також вату, марлю та хірургічні інструменти при температурі 140-1700С.
7. Прокалювання (фламбирування) голок, піпеток, бактеріологічних петель проводиться над полум'ям спиртовки.
Інший метод стерилізації_ це механічний спосіб. Цей метод базується на стерилізації шляхом фільтрування. Фільтрування використовується для знезараження рідин, які змінюють свої властивості під впливом високих температур це поживні середовища, що містять вітаміни, амінокислоти, ферменти, гормони та інші біологічноактивні речовини, які руйнуються під час використання стерилізації високими температурами. Для цього використовуються мілкопористі бактеріальні фільтри (фільтр Зейтца, свічки Шамберлана, Беркефельда).
Хімічний засіб стерилізації (дезінфекція) проводиться із застосуванням хімічних речовин: кислот, луг, солей, газів.
|
|
|
