 |
Сравнение фенотипа «волосатых клеток» при разных формах ВКЛ.
|
|
|
|
Иммунофенотипирование лимфоцитов было проведено у 100 больных ВКЛ (64 больных с типичной формой и 36 больных с вариантной формой заболевания). В анализ включено 75 больных (45 с типичной и 30 с вариантной формой ВКЛ, из них 24 больных ВКЛ молодого возраста), у которых исследовали максимально полный набор CD-антигенов и указывали степень их экспрессии.
При анализе уровня экспрессии антигенов-кластеров дифференцировки у больных с типичной формой ВКЛ выявлено следующее распределение исследуемых маркеров (табл.17).
Таблица 17. Иммунофенотип лимфоцитов при типичном ВКЛ.
| CD | Число позитивных случаев (%) | Степень экспрессии (%) | Возраст |
| СD19 | 42/42 (100 %) | сильная 27 % | молодой 25 % |
| старший 28 % | |||
| умеренная 72 % | молодой 75 % | ||
| старший 69 % | |||
| CD20 | 44/44 (100 %) | сильная 86% | молодой 80 % |
| старший 91% | |||
| умеренная 14% | молодой 20 % | ||
| старший 9 % | |||
| CD22 | 45/45 (100 %) | сильная 56 % | молодой 40 % |
| старший 72 % | |||
| умеренная 44% | молодой 60 % | ||
| старший 28 % | |||
| k/ λ | k – 14/40 (35 %) | сильная 9% | молодой 0 % |
| старший 17 % | |||
| умеренная 84% | молодой 100 % | ||
| старший 67 % | |||
| λ – 26/40 (65 %) | сильная 27% | молодой 20 % | |
| старший 33 % | |||
| умеренная 71% | молодой 80 % | ||
| старший 62 % | |||
| CD25 | 42/43 (98 %) | сильная 3 % | молодой 0 % |
| старший 7 % | |||
| умеренная 63% | молодой 80 % | ||
| старший 45% | |||
| слабая 33% | молодой 20 % | ||
| старший 45% | |||
| отсутствует 1% | молодой 0 % | ||
| старший 3% | |||
| CD11c | 44/44 (100 %) | сильная 68% | молодой 60% |
| старший 76% | |||
| умеренная 27% | молодой 30% | ||
| старший 24% | |||
| слабая 5% | молодой 10% | ||
| старший 0% | |||
| CD103 | 23/23 (100 %) | сильная 0% | молодой 0 % |
| старший 0 % | |||
| умеренная 91% | молодой 100 % | ||
| старший 83 % | |||
| слабая 9% | молодой 0 % | ||
| старший 17 % | |||
| FMC7 | 19/21 (90 %) | умеренная 49% | молодой 50 % |
| старший 47 % | |||
| слабая 40% | молодой 50 % | ||
| старший 29 % | |||
| анти-ВКЛ | 27/29 (93 %) | сильная 69% | молодой 80 % |
| старший 58 % | |||
| умеренная 25% | молодой 20 % | ||
| старший 30 % | |||
| НС2 | 20/20 (100 %) | сильная 15 % | молодой 25 % |
| старший 6 % | |||
| умеренная 25 % | молодой 25 % | ||
| старший 25 % | |||
| слабая 60 % | молодой 50 % | ||
| старший 69 % | |||
| CD23 | 5/39 (13 %) | умеренная 9 % | молодой 12 % |
| слабая 3 % | старший 6 % | ||
| CD10 | 2/25 (8 %) | слабая 8 % | молодой 11 % |
| старший 5 % | |||
| CD5 | 0/41 | отсутствует | отсутствует |
|
|
|
Видно, что при типичной форме ВКЛ экспрессия общих В-клеточных антигенов CD19, CD20 и CD22 была выявлена у всех больных, хотя степень экспрессии этих антигенов была разная. Так, антиген CD19 чаще (в 72 % случаев) экспрессировался умеренно в обеих возрастных группах, CD20 чаще (в 86 % случаев) экспрессировался сильно также в обеих возрастных группах, CD22 экспрессировался почти с одинаковой частотой сильно (56 %) и умеренно (44 %), однако сильная экспрессия CD22 была характерна для пациентов старшего возраста (72 %), а умеренная экспрессия CD22 наблюдалась в большинстве случаев у молодых пациентов (60 %). Экспрессия легких цепей иммуноглобулина k и λ в большинстве случаев была выражена умеренно в обеих возрастных группах, соотношение k / λ составило 0,54, т.е. число λ+ случаев почти вдвое превышало число k + случаев.
Характерные для ВКЛ маркеры CD11с, CD103, НС2 были обнаружены при типичной форме ВКЛ у всех больных, при этом для CD11с была характерна в основном сильная степень экспрессии, а для CD103 – умеренная степень экспрессии в обеих возрастных группах. Характерный для ВКЛ активационный антиген CD25 был обнаружен в 98 % случаев у больных с типичной формой заболевания и отсутствовал только у одного больного, причем более выраженная его экспрессия была характерна для молодых пациентов (80%), а слабая – для больных старшего возраста (45 %).
|
|
|
Антигены анти-ВКЛ и FMC7 экспрессировались при типичной форме ВКЛ в 93 % и 90 % случаев соответственно, причем для анти-ВКЛ была характерна сильная степень экспрессии, а для FMC7 – умеренная или слабая степень экспрессии в обеих возрастных группах.
Дифференциально-диагностические маркеры, нехарактерные для ВКЛ – CD23, CD10 и CD5 – в большинстве случаев типичной формы ВКЛ, как и следовало ожидать, отсутствовали, однако в небольшом проценте случаев была выявлялена слабая или умеренная экспрессия этих антигенов, что расценивалось как аберрантный иммунофенотип. Так, CD23 был выявлен у 5 (13 %) больных, чаще молодого возраста, слабая экспрессия CD10 – только у 2 (8 %) больных, а CD5 во всех исследованных случаях не экспрессировался.
При оценке уровня экспрессии антигенов-кластеров дифференцировки у больных с вариантной формой ВКЛ выявлено следующее распределение исследуемых маркеров (табл.18).
Таблица 18. Иммунофенотип лимфоцитов при вариантном ВКЛ.
| CD | Число позитивных случаев (%) | Степень экспрессии (%) | Возраст |
| СD19 | 27/27 (100 %) | сильная 60 % | молодой 73 % |
| старший 47 % | |||
| умеренная 34 % | молодой 27 % | ||
| старший 40 % | |||
| слабая 6 % | молодой 0 % | ||
| старший 13 % | |||
| CD20 | 28/28 (100 %) | сильная 93 % | молодой 92 % |
| старший 94 % | |||
| умеренная 7 % | молодой 8 % | ||
| старший 6 % | |||
| слабая 0 % | молодой 0 % | ||
| старший 0 % | |||
| CD22 | 28/28 (100 %) | сильная 65 % | молодой 67 % |
| старший 63 % | |||
| умеренная 28 % | молодой 25 % | ||
| старший 31 % | |||
| слабая 7 % | молодой 8 % | ||
| старший 6 % | |||
| k / λ | k– 10/28 (36 %) | умеренная 100 % | молодой 100 % |
| старший 100 % | |||
| λ – 17/28 (61 %) | умеренная 76 % | молодой 72 % | |
| старший 80 % | |||
| CD25 | 24/28 (86 %) | сильная 0 % | молодой 0 % |
| старший 0 % | |||
| умеренная 58 % | молодой 75 % | ||
| старший 40 % | |||
| слабая 32 % | молодой 25 % | ||
| старший 40 % | |||
| отсутствует 10 % | молодой 0 % | ||
| старший 20 % | |||
| CD11c | 28/28 (100 %) | сильная 48 % | молодой 59 % |
| старший 37 % | |||
| умеренная 39 % | молодой 33 % | ||
| старший 44 % | |||
| слабая 13 % | молодой 8 % | ||
| старший 19 % | |||
| CD103 | 15/15 (100 %) | сильная 7 % | молодой 0 % |
| старший 14 % | |||
| умеренная 86 % | молодой 100 % | ||
| старший 72 % | |||
| слабая 7 % | молодой 0 % | ||
| старший 14 % | |||
| FMC7 | 16/17 (94 %) | умеренная 60 % | молодой 63 % |
| старший 56 % | |||
| анти-ВКЛ | 21/21 (100 %) | сильная 36 % | молодой 22 % |
| старший 50 % | |||
| умеренная 48 % | молодой 45 % | ||
| старший 50 % | |||
| слабая 16 % | молодой 33 % | ||
| старший 0 % | |||
| НС2 | 12/12 (100 %) | сильная 0 % | молодой 0 % |
| старший 0 % | |||
| умеренная 50 % | молодой 67 % | ||
| старший 33 % | |||
| слабая 50 % | молодой 33 % | ||
| старший 67 % | |||
| CD23 | 3/25 (12 %) | умеренная 30 % | молодой 70 % |
| слабая 70 % | старший 30 % | ||
| CD10 | 5/18 (28 %) | умеренная 28 % | молодой 72 % |
| слабая 72 % | старший 28 % | ||
| CD5 | 2/28 (7 %) | умеренная 50 % слабая 50 % | молодой 0 % |
| старший 100 % |
|
|
|
Видно, что иммунофенотип вариантной формы ВКЛ в исследованной популяции больных в целом сходен с фенотипом типичной формы ВКЛ, с наличием некоторых различий. Также как при типичной форме ВКЛ, при вариантной форме экспрессия общих В-клеточных антигенов CD19, CD20 и CD22 была выявлена у всех больных, но, в отличие от типичной формы ВКЛ, CD19 чаще (в 60 % случаев) экспрессировался сильно и в основном в группе больных молодого возраста (72 %). Антигены CD20 и CD22, как и при типичной форме ВКЛ, экспрессировались сильно (93 % и 65 % соответственно), но различной степени экспрессии CD22 в разных возрастных группах, в отличие от типичной формы ВКЛ, при этом не было. Экспрессия легких цепей иммуноглобулина k и λ, как и при типичной форме ВКЛ, в большинстве случаев была выражена умеренно в обеих возрастных группах, соотношение k / λ также было сходным и составило 0,59.
Характерные для ВКЛ маркеры CD11с, CD103, НС2 в нашем исследовании были обнаружены при вариантной форме ВКЛ, также как при типичной форме, у всех больных, при этом для CD11с была характерна сильная степень экспрессии, а для CD103 и НС2 – умеренная, особенно у больных молодого возраста. Антиген CD25 не был экспрессирован только у 4 (14 %) больных с вариантной формой ВКЛ, относящихся к старшей возрастной группе, в то время как остальные 86 % случаев были CD25 позитивны, что ненамного ниже, чем при типичной форме ВКЛ (р=0.05). Следует, однако, отметить, что сильной экспрессии CD25 не было ни в одном случае вариантной формы ВКЛ, умеренная степень его экспрессии была характерна для молодых пациентов (75 %), а слабая – для больных старшего возраста (40 %).
|
|
|
Антигены анти-ВКЛ и FMC7 экспрессировались при вариантной форме ВКЛ в 100 % и 94 % случаев соответственно, для анти-ВКЛ была характерна сильная степень экспрессии, а для FMC7 – умеренная или слабая в обеих возрастных группах, что в целом соответствует характеристикам типичной формы ВКЛ.
Дифференциально-диагностические маркеры, нехарактерные для ВКЛ – CD23, CD10 и CD5 – в большинстве случаев вариантной формы ВКЛ, как и при типичной форме, отсутствовали, однако аберрантный иммунофенотип со слабой или умеренной экспрессией этих антигенов изредка был выявлен. Так, слабая степень экспрессии CD23 была обнаружена у 3 (12 %) больных (из них 2 – молодого возраста), слабая экспрессия CD10 выявлена у 5 (28 %) больных, (из них 3 – молодого возраста).Антиген CD5 был выявлен только у 2 больных вариантной формой ВКЛ старшего возраста – с умеренной (1 больной) и слабой (1 больной) степенью экспрессии.
Наши данные по результатам определения иммунофенотипа вариантной формы ВКЛ неожиданно для нас отличались от литературных данных зарубежных авторов, которые указывают на типичное для вариантной формы ВКЛ отсутствие CD25 и НС2, а также частое по сравнению с типичной формой ВКЛ отсутствие CD11с и CD103 (табл.19).
Таблица 19. Результаты иммунофенотипирования при вариантном ВКЛ.
| Маркер | Данные литературы (E.Matutes, 2003г) число + случаев /число больных (%) | Собственные данные (2007г) число + случаев /число больных (%) |
| sIg - сильная экспрессия - умеренная экспрессия | 46/48 - | 2/28 (р<0.00001) 23/28 |
| каппа | 18/42 – 43 % | 10/28 – 36 % (p=0.55) |
| лямбда | 24/42 – 57 % | 17/28 – 61 % (p=0.77) |
| CD22 - сильная экспрессия - умеренная экспрессия | 37/39 – 95 % - | 19/28 – 68 % 9/28 – 32 % (р<0.005) |
| FMC7 | 45/46 – 98 % | 16/17 – 94 % (p=0.46) |
| CD11c | 25/40 – 87 % | 28/28 – 100 %(р<0.001) |
| CD25 | 3/46 – 6 % | 24/28 – 86 %(р<0.0001) |
| CD103 | 18/30 – 60 % | 15/15 – 100 %(р<0.005) |
| HC2 | 3/40 – 7 % | 12/12–100 % (p<0.0001) |
| CD23 | 1/34 – 3 % | 3/25 – 12 %(p=0.17) |
| CD10 | 6/39 – 15 % | 5/18 – 28 %(p=0.27) |
| CD5 | 0/45 – 0 % | 0/28 – 0 % |
Видно, что мы, в отличие от зарубежных авторов, не выявили значительного снижения числа позитивных случаев при определении основных характерных для ВКЛ маркеров CD11c, CD25, CD103 и HC2 (р<0.005). В нашем исследовании все указанные маркеры, кроме CD25, были выявлены в 100 % случаев, с той или иной степенью экспрессии. Антиген CD25 отсутствовал только у 4 (14 %) и присутствовал у 24 (86 %) больных с вариантной формой ВКЛ. Тем не менее, сильной экспрессии CD25 не было ни в одном случае вариантной формы ВКЛ, умеренная степень его экспрессии была характерна для молодых пациентов, а слабая – для больных старшего возраста. Возможно, именно с разным возрастным составом отчасти связана разница в определении CD25 – в нашем случае средний возраст больных с вариантной формой ВКЛ гораздо ниже (и, соответственно, выше доля молодых больных). Кроме того, неясно, учитывалась ли зарубежными авторами степень экспрессии, возможно, они исключали случаи со слабой степенью экспрессии CD25.
|
|
|
При анализе уровня экспрессии антигенов-кластеров дифференцировки у больных ВКЛ молодого возраста выявлено следующее распределение исследуемых маркеров (табл.20).
Таблица 20. Иммунофенотип лимфоцитов при ВКЛ молодого возраста.
| Маркер | Число позитивных случаев (%) | Вариант ВКЛ и степень экспрессии | |
| СD19 | 20/20 (100 %) | Вариантная форма - сильная экспрессия у 73 % Типичная форма – умеренная экспрессия у 75 % | |
| CD20 | 22/23 (96 %) | Вариантная форма - сильная экспрессия у 92 % Типичная форма –сильная экспрессия у 80 % | |
| CD22 | 22/22 (100 %) | Вариантная форма - сильная экспрессия у 67 %, умеренная у 25 % Типичная форма – сильная экспрессия у 40 %, умеренная у 60 % | |
| k/ λ | k – 8/20 (40 %) | Умеренная экспрессия у 100 % при типичной и вариантной формах | |
| λ – 12/20 (60 %) | Умеренная экспрессия у 75 % при типичной и вариантной формах | ||
| CD25 | 22/23 (96 %) | Умеренная экспрессия у 75 % при типичной и вариантной формах | |
| CD11c | 22/22 (100 %) | Сильная экспрессия у 60 % при типичной и вариантной формах Умеренная экспрессия у 30 % при типичной и вариантной формах | |
| CD103 | 13/13 (100 %) | Умеренная экспрессия у 100 % при типичной и вариантной формах | |
| FMC7 | 12/12 (100 %) | Сильная экспрессия у 57 % при вариантной и 67 % при типичной форме Умеренная экспрессия у 43 % при вариантной и 33 % при типичной форме | |
| анти-ВКЛ | 14/14 (100 %) | Вариантная форма - сильная экспрессия у 22 %, умеренная у 45 % Типичная форма – сильная экспрессия у 80 %, умеренная у 20 % | |
| НС2 | 10/10 (100 %) | Вариантная форма - умеренная экспрессия у 67 % Типичная форма – слабая экспрессия у 50 % | |
| CD23 | 5/19 (26 %) | Вариантная форма - слабая экспрессия у 67 % Типичная форма – умеренная экспрессия у 100 % | |
| CD10 | 3/12 (25 %) | Только при вариантной форме, экспрессия слабая | |
| CD5 | 0/20 | Отсутствует |
Видно, что у больных ВКЛ молодого возраста были представлены все маркеры, свойственные этому заболеванию. Различия иммунофенотипа в молодой и старшей возрастных группах состояли в степени экспрессии разных антигенов (от слабой до сильной) и частоте выявления аберрантного фенотипа (CD25-, CD23+, CD10+). При этом аберрантный фенотип с отсутствием экспрессии CD25 оказался редким у больных молодого возраста (выявлен только у одного больного).
Сравнение полученных нами данных по фенотипу разных форм ВКЛ приведены ниже (табл.21).
Таблица 21. Иммунофенотип лимфоцитов при разных формах ВКЛ.
| Маркер | Весь ВКЛ | Типичная форма ВКЛ | Вариантная форма ВКЛ | ВКЛ молодого возраста |
| sIg каппа лямбда k/ λ | 67/68 36 % 63 % 0,57 | 40/40 35 % 65 % 0,54 | 27/28 36 % 61 % 0,59 | 21/21 40 % 60 % 0,67 |
| CD22 | 73/73–100 % | 45/45 – 100 % | 28/28 – 100 % | 23/23 – 100 % |
| FMC7 | 35/38 – 92 % | 19/21 – 90 % | 16/17 – 94 % | 11/12 – 92 % |
| CD11c | 72/72–100 % | 44/44 – 100 % | 28/28 – 100 % | 22/22 – 100 % |
| CD25 | 66/71 – 9 3% | 42/43 – 98 % | 24/28 – 86 % | 22/23 – 96 % |
| CD103 | 38/38–100 % | 23/23 – 100 % | 15/15 – 100 % | 13/13 – 100 % |
| HC2 | 32/32–100 % | 20/20 – 100 % | 12/12 – 100 % | 11/11 – 100 % |
| CD23 | 7/64 – 11 % | 4/39 – 10 % | 3/25 – 12 % | 5/19 – 26 % |
| CD10 | 7/43 – 16 % | 2/25 – 8 % | 5/18 – 28 % | 3/12 – 25 % |
| CD5 | 2/69 – 3 % | 0/41 – 0 % | 2/28 – 7 % | 0/23 – 0 % |
Таким образом, выявленные фенотипические различия характеризовались небольшим и статистически недостоверным снижением частоты экспрессии антигена CD25 (p=0.054) и увеличением частоты выявления аберрантного фенотипа CD10+ (р=0.08) при вариантной форме ВКЛ, а также статистически достоверным учащением случаев аберрантного фенотипа CD23+ (р<0.01) у пациентов молодого возраста. Более частое выявление CD10+лимфоцитов у молодых больных ВКЛ было статистически недостоверно (р=0.15).
Аберрантный иммунофенотип был выявлен у 19 (25 %) из 75 больных ВКЛ (табл. 22).
Таблица 22. Аберрантный иммунофенотип при разных формах ВКЛ.
| Маркер | Весь ВКЛ | молодой возр. | Типичный ВКЛ | Вариантный ВКЛ |
| старший возр. | ||||
| CD25(-) | 5/72 (7 %) | 1/23 (4 %) | 1/43 (2 %) | 4/29 (14 %) |
| 4/49 (8 %) | ||||
| CD10(+) | 7/43 (16 %) | 3/12 (25 %) | 2/25 (8 %) | 5/18 (28 %) |
| 4/31 (13 %) | ||||
| CD5(+) | 2/69 (7 %) | 2/28 (7 %) | ||
| 2/47 (4 %) | ||||
| CD23(+) | 7/64 (11 %) | 5/19 (26 %) | 4/39 (10 %) | 3/25 (12 %) |
| 2/45 (4 %) |
Из таблицы видно, что аномальное отсутствие экспрессии CD25 выявляли чаще при вариантной форме ВКЛ у больных старшей возрастной группы (р=0.06), аномальное присутствие экспрессии CD23 (р<0.01) и CD10 (р=0.33) – чаще в молодом возрасте, при этом CD10 в 3,5 раза чаще был выявлен при вариантной форме ВКЛ (р=0.08), в отличие от CD23, одинаково часто встречавшимся при типичной и вариантной формах заболевания (р=0.83). Экспрессия нетипичного для ВКЛ антигена CD5 была редкой и выявлена только у больных типичной формой ВКЛ старшего возраста.
|
|
|
