 |
Задача № 3. 1. Вспомните принцип центрифугирования. 3. Что такое изоэлектрическая точка?. 1. Вспомните принцип центрифугирования.
|
|
|
|
Задача № 3
Дано три группы белков:
| Б1 | Б2 | Б3 | Б4 | ||
| А М. м. | рI | ||||
| Б М. м. | рI | ||||
| В М. м. | рI |
Как разделить белки соответствующей группы, используя только высаливание и центрифугирование (для удаления осадка). При прочих равных условиях растворимость белка зависит только от молекулярной массы.
Для ответа:
1. Вспомните принцип центрифугирования.
2. Что такое высаливание?
3. Что такое изоэлектрическая точка?
Задача № 4
Чем объяснить возможное снижение растворимости белков при отщеплении от них пептидов (как в случае с фибриногеном)?
Для обоснования ответа:
1. Вспомните, что такое изоэлектрическая точка белка, и как меняются свойства белков в изоэлектрической точке.
2. Что такое растворимость белков, чем она обусловлена?
Задача № 5
По данным количественного аминокислотного анализа в сывороточном альбумине содержится 0, 58% триптофана, молекулярная масса которого равна 204. Рассчитайте минимальную молекулярную массу альбумина.
Для выполнения расчетов:
1. Вспомните, что такое альбумины.
2. К какой группе аминокислот по классификации Ленинджера относится триптофан?
Задача № 6
Как объяснить, что белок молока казеин при кипячении сворачивается (выпадает в осадок), если молоко кислое?
Для ответа:
1. Вспомните, что такое растворимость белков, чем она обусловлена?
2. Что такое изоэлектрическая точка белка?
3. Как меняются свойства белков в изоэлектрической точке?
Задача № 7
Олигопептид, выделенный из мозга животного, имеет последовательность глу-гис-три-сер-тир-гли-лей-арг-про-гли. Определите суммарный заряд молекулы при рН 3, 0; 5, 5; 11, 0. В какой области рН лежит изоэлектрическая точка пептида?
|
|
|
Для ответа:
1. Вспомните классификацию аминокислот по Ленинджеру.
2. Что такое олигопептиды?
3. К каким группам по классификации Ленинджера относятся перечисленные аминокислоты?
ТЕМА №1. ВВЕДЕНИЕ В БИОХИМИЧЕСКИЙ ПРАКТИКУМ
Ответ к задаче №1
Движение к аноду – глутамат; к катоду – лизин, аргинин, гистидин; остаются на старте – аланин, глицин.
Ответ к задаче №2
Трипептид состоит из метионина, триптофана и треонина.
ИЭТ находится в слабокислой среде, так как мет и три имеют неполярные радикалы, тре – полярный незаряженный.
Ответ к задаче №3
Пример ответа для группы А.
а) при рН=5 высаливанием осаждаем Б3, отделяем цитрифугированием.
б) при рН = 7 соль добавляем медленно, вначале выпадает более тяжелый Б2, его нужно отцентрифугировать, затем при большей концентрации соли выпадает более легкий Б1. Б4 остается в растворе.
Ответ к задаче №4
Фибрин образует сгусток при рН крови, равной 7, 4, то есть он лишен заряда, а значит, находится в изоэлектрической точке. Этим можно объяснить и снижение растворимости белков при отщеплении от них пептидов.
Ответ к задаче №5
32100 г/моль.
Ответ к задаче №6
При кипячении молока казеин всегда денатурирует, но выпадает в осадок тогда, когда лишен заряда, а это происходит в кислом молоке. Следовательно, ИЭТ казеина находится в кислой среде.
Ответ к задаче №7
При рН 3, 0 суммарный заряд данного олигопептида (+); при рН 5, 0 – (0); при рН 11, 0 – (-);
ИЭТ пептида лежит в области рН = 5, 0.
ТЕМА №2. ФЕРМЕНТЫ
Задача № 1
Глутаматдекарбоксилаза катализирует реакцию:
В6
Глутаминовая кислота → ГАМК + СО2
|
|
|
1. По изменению концентрации каких веществ можно охарактеризовать активность фермента?
2. Как можно увеличить скорость данной реакции?
Задача № 2
Фермент трипсин способен расщеплять пептидные связи белков. Почему обработка трипсином приводит к инактивации многих ферментов?
Для обоснования ответа вспомните:
1. Что такое ферменты?
2. К какому классу ферментов относится трипсин?
Задача № 3
Ингибитор снижает активность фермента до 30% от исходного уровня. Повышение концентрации субстрата катализируемой реакции восстанавливает 80% активности фермента. К какому типу относится данный ингибитор?
Для ответа:
1. Вспомните типы ингибирования.
2. Действие какого ингибитора зависит от концентрации субстрата?
Задача № 4
О чем может свидетельствовать резкое повышение в крови активности аспартатаминотрансферазы (АСТ), если известно, что этот фермент локализован преимущественно в сердце?
Для ответа вспомните:
1. К какому классу относится АСТ?
2. Почему при патологии в крови повышается активность внутриклеточных ферментов?
Задача № 5
Высокие концентрации субстрата могут ускорять собственную утилизацию. За счёт чего это происходит?
Для ответа вспомните:
1. Что такое субстрат?
2. Что такое ферментативные цепи?
3. Каковы основные принципы регуляции ферментативных цепей.
Задача № 6
Полипептиды трасилол (контрикал), гордокс используются как лекарственные препараты при панкреатите. На чем основано их действие?
Для ответа вспомните:
1. Что такое ингибиторы?
2. Какие типы ингибирования вам известны?
Задача № 7
Протеолитические ферменты и дезоксирибонуклеазы используют для лечения гнойных ран. На чем основано их применение?
Для ответа вспомните:
1. Какие реакции катализируют эти ферменты?
2. Как изменится вязкость гнойного содержимого, если она зависит от концентрации макромолекул в его составе?
3. Можно ли в этих целях использовать пепсин, коллагеназу и гиалуронидазу?
|
|
|
