 |
Раздел: « частная вирусология »
|
|
|
|
Занятие 14. Дата _______. Тема: «Возбудители респираторных вирусных инфекций. Вирус бешенства. Вирус натуральной оспы»
Таблица 57. РГА для индикации вируса гриппа в аллантоисной жидкости
| Ингредиенты | Разведения вируссодержащего материала | Контроль эритроцитов | ||||
| 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 | 1:32 | ||
| Изотонич. р-р хлорида натрия,мл | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
| Аллантоисная жидкость (вируссодержащий материал), мл | 0,5 | à | à | à | àвылить в дез. р-р | -- |
| 1% суспензия эритроцитов, мл | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
| Перемешать, инкубировать при комнатной температуре в течение 30- 60 мин. | ||||||
| Результаты: | ||||||
| ВЫВОДЫ: В аллантоисной жидкости обнаружен/не обнаружен вирус, обладающий гемагглютинирующей способностью. Титр вируса __________. |
Таблица 58. Результаты РСК для идентификации серотипа вируса гриппа
| Результаты: | Разведения сыворотки | Контроли | |||||||||
| 1:20 | 1:40 | 1:80 | 1:160 | 1:320 | 1:640 | эритр. | компл. | гем. системы | сыв.А | сыв. В | |
| Сыворотка против вируса гриппа А | |||||||||||
| Сыворотка против вируса гриппа В | |||||||||||
| ВЫВОДЫ: РСК положительная с сывороткой __, следовательно идентифицирован серотип вируса гриппа ____. Титр вируса _________. |
Условные обозначения: «+» - наличие гемолиза (РСК «-«),
«-» - отсутствие гемолиза (РСК «+«).
Таблица 59. Результаты РТГА для идентификации подтипа вируса гриппа
| Результаты: | Разведения сыворотки | Контроли | ||||||||
| 1:20 | 1:40 | 1:80 | 1:160 | 1:320 | 1:640 | эр. | вируса | сыв. А1 | сыв. А3 | |
| Сыворотка к вирусу гриппа А1 (H1N1) | ||||||||||
| Сыворотка к вирусу гриппа A3 (H3N2) | ||||||||||
| ВЫВОДЫ: РТГА положительная с сывороткой _______, следовательно идентифицирован подтип вируса гриппа _______. Титр вируса ______. |
Условные обозначения: «+» - наличие гемагглютинации (РТГА «-«),
|
|
|
«-» - отсутствие гемагглютинации (РТГА «+«).
Таблица 60. Схема постановки РТГА для идентификации подтипа вируса гриппа
| Номера пробирок | Контроли | |||||||
| Разведения вируса | 1:10 | 1:20 | 1:40 | 1:80 | 1:160 | вируса | сыв.А1/А3 | эритр. |
| Изотонич. р-р хлорида натрия, мл | --- | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 1,0 |
| Исследуемый вирус 1:10, мл | 0,5 | 0,5 à | 0,5 à | 0,5 à | 0,5 вылить | 0,5 | --- | --- |
| Первый ряд: Сыворотка к вирусу А1 (H1N1) 1:10, мл | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | --- | 0,5 | --- |
| Второй ряд: Сыворотка к вирусу A3 (H3N2) 1:10, мл | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | --- | 0,5 | --- |
| 1% суспензия эритроцитов, мл | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
| Результаты : | ||||||||
| С сывороткой к вирусу гриппа А1 (H1N1) | ||||||||
| С сывороткой к вирусу гриппа A3 (H3N2) | ||||||||
| ВЫВОДЫ: РТГА положительная с сывороткой ____, подтип вируса гриппа ____.в титре____. |
Условные обозначения: «+» - наличие гемагглютинации (РТГА «-«),
«-» - отсутствие гемагглютинации (РТГА «+«).
Таблица 61. Схема постановки РТГА с парными сыворотками для серологической диагностики гриппа
| Номера пробирок | Контроли | ||||||||
| Разведения сыв. | 1:10 | 1:20 | 1:40 | 1:80 | 1:160 | 1:320 | сыв. | вируса | эритр. |
| Изотонич. р-р хлорида натрия, мл | --- | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 1,0 |
| Исследуемая сыворотка 1:10, мл | 0,5 | 0,5 à | 0,5 à | 0,5 à | 0,5 à | 0,5 вылить | 0,5 | --- | --- |
| Вирусный диагностикум А1 (А3), 4 AЕ, мл | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | --- | 0,5 | --- |
| 1% суспензия эритроцитов, мл | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
| Результаты : | |||||||||
| Первая сыворотка | |||||||||
| Вторая сыворотка | |||||||||
| ВЫВОДЫ: РТГА положительная с диагностикумом _____ _. Титр антител в первой сыворотке _____, во второй сыворотке ____; __- кратное нарастание титра антител во второй сыворотке позволяет/не позволяет подтвердить диагноз гриппа. Грипп вызван вирусом ________. |
Условные обозначения: «+» - наличие гемагглютинации (РТГА «-«),
|
|
|
«-» - отсутствие гемагглютинации (РТГА «+«)
.
Таблица 62. Результаты РТГА с парными сыворотками для серологической диагностики гриппа
| Результаты: | Разведения сыворотки | Контроли | ||||||||||||
| 1:10 | 1:20 | 1:40 | 1:80 | 1:160 | 1:320 | 1:640 | вируса А1 | вируса А3 | эритроц. | первой сыв | второй сыв. | |||
| Диагностикум A1 (H1N1) | ||||||||||||||
| Первая сыворотка | ||||||||||||||
| Вторая сыворотка | ||||||||||||||
| Диагностикум A3 (H3N2) | ||||||||||||||
| Первая сыворотка | ||||||||||||||
| Вторая сыворотка | ||||||||||||||
| ВЫВОДЫ: РТГА положительная с диагностикумом ______ _. Титр антител в первой сыворотке _____, во второй сыворотке ____; __- кратное нарастание титра антител во второй сыворотке позволяет/не позволяет подтвердить диагноз гриппа. Грипп вызван вирусом ________. | ||||||||||||||
Условные обозначения: «+» - наличие гемагглютинации (РТГА «-«),
«-» - отсутствие гемагглютинации (РТГА «+«).
Рисунок 16. Реакция биологической нейтрализации (РБН) в культуре клеток для идентификации аденовируса
|
|
|
|
|
|
|
|
| аденовирус+ cыворотка 3 | аденовирус+ cыворотка 4 | аденовирус+ cыворотка 7 | Контроли: | ||||
| культ. клеток | вируса | сыв.3 | сыв.4 | сыв.7 |
ВЫВОДЫ:
ЦПД вирусов нат.оспы ЦПД аденовирусов __ ЦПД вирусов бешенства
(тельца Гварниери) (внутриядерные включения)(тельца Бабеша-Негри)
 | | |
Занятие 15. Дата ______. Тема: «Энтеровирусы. Вирусы энтеральных и парентеральных гепатитов»
ЦПД вирусов_полиомиелита
_ (гибель и деструкция монослоя)
 |
Таблица 63. Схема постановки ИФА
| Ингредиенты | Опыт | «Положительный контроль» | «Отриц. контроль» | |||||
| A1 A2 | B1 B2 | C1 C2 | D1 D2 | E1 E2 | F1 F2 | G1 G2 | H1 H2 | |
| 1. Буфер A (мл) | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 |
| Инкубация при комнатной температуре 10 мин. | ||||||||
| 2. Сыворотка больного (мл) | 0,1 | -- | -- | -- | -- | -- | -- | -- |
| 3. Стандартный антиген 100 мкг/мл (мл) | -- | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 вылить | -- |
| 4. Отрицательный контроль (мл) | -- | -- | -- | -- | -- | -- | -- | 0,1 |
| Инкубация при 37oC в течение 20 мин. | ||||||||
| 5. Конъюгат (мл) | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 |
| Инкубация при 37oC в течение 20 мин. | ||||||||
| 6. Субстрат (мл) | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 |
| Инкубация при комнатной температуре 20 мин. | ||||||||
| 7. 50%H2SO4 (мл) | 0,05 | 0,05 | 0,05 | 0,05 | 0,05 | 0,05 | 0,05 | 0,05 |
| Результаты: | ||||||||
| ВЫВОДЫ: ИФА ________________(положительная/отрицательная). Концентрация HBs антигена _______ мкг/мл |
Рисунок 17. Реакция биологической нейтрализации (РБН) в культуре клеток для идентификации полиовируса
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
| полиовирус+ cыворотка I | полиовирус+ cыворотка II | полиовирус+ cыворотка III | Контроли: | ||||
| культ. клеток | вируса | сыв.I | сыв.II | сыв.III |
ВЫВОДЫ:
Рисунок 18. РБН в культуре клеток с парными сыворотками для серологической диагностики полиомиелита
| Первая сыворотка | Вторая сыворотка | Контроли | |||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
| 1:50 | 1:100 | 1:200 | 1:400 | 1:800 | 1:50 | 1:100 | 1:200 | 1:400 | 1:800 | культ. клеток | вируса | первой сыв. | второй сыв. |
ВЫВОДЫ:
-
[1] -для студентов лечебного факультета
[2] - для студентов медико-профилактического факультета
|
|
|
