 |
Биовары H. influenzae, в зависимости от их биохимической способности
|
|
|
|
Занятие 20
Тема: Патогенные грамотрицательные бактерии и кокки: бордетеллы коклюша и паракоклюша, гемофилы инфлюэнцы, менингококки и гонококки. Лабораторная диагностика коклюша, паракоклюша, гемофильной инфекции, гонореи, бленнореи и менингококковой инфекции
Вопросы для обсуждения:
1. Морфологические и тинкториальные свойства бордетелл коклюша и паракоклюша.
2. Специальные среды для их культивирования, культуральные свойства.
3. Факторы патогенности B. pertussis и B. рarapertussis.
4. Антигенная структура бордетелл.
5. Патогенез коклюша и паракоклюша. Периоды заболевания.
6. Лабораторная диагностика коклюша и паракоклюша. Способы забора материала от больного для лабораторной диагностики.
7. Дифференциация между B. pertussis и B. рarapertussis.
8. Специфическая профилактика коклюша и паракоклюша.
9. Морфологические и культуральные свойства гемофил.
10. Факторы патогенности Н. influenzae.
11. Лабораторная диагностика гемофильной инфекции.
12. Специфическая профилактика гемофильной инфекции
13. Морфологические и тинкториальные гонококков и менингококков.
14. Факторы патогенности гонококков и менингококков.
15. Антигенная структура менингококков.
16. Патогенез гонореи и бленнореи.
17. Лабораторная диагностика острой и хронической гонореи.
18. Патогенез менингококковой инфекции, клинические формы.
19. Лабораторная диагностика менингококковой инфекции.
20. Специфическая профилактика менингококковой инфекции.
Практические задания:
1. Промикроскопировать и зарисовать демонстрационные препараты, приготовленные из чистой культуры B. pertussis и B. рarapertussis:
| 
| |||
| Рис. 1. Бордетеллы коклюша | Рис. 2. Бордетеллы паракоклюша |
2. Бактериологическое исследование:
|
|
|
1) изучить рост бордетелл на среде Борде-Жангу или КУА.
2) поставить пробу на наличие уреазы
3) изучить посев на скошенный агар, содержащий 0,1% тирозина.
| 
| 
|
|
| Р-р мочевины; | МПА с тирозином | Р-р мочевины; | МПА с тирозином |
| B. pertussis | B. рarapertussis |
Проба на уреазу. В маленькую пробирку наливают 0,3-0,4 мл 2% раствора мочевины, вносят петлю культуры и добавляют 2-3 капли фенолфталеина. Пробирку встряхивают и ставят в термостат. Учитывают реакцию через 2 и 24 ч. Бактерии коклюша не изменяют цвет среды. Бактерии паракоклюша обладают ферментом уреазой, который расщепляют мочевину с образованием аммиака. Аммиак изменяет индикатор и среда окрашивается в красный цвет.
Проба с тирозином. На скошенный МПА в пробирках с 0,1% тирозином засевают выделенную культуру и ставят в термостат. На следующий день вынимают пробирку из термостата и просматривают ее. Наличие роста в пробирке и окрашивание среды в коричневый цвет свидетельствуют о росте возбудителей паракоклюша. Возбудители коклюша на этой среде не растут.
3. Поставить реакцию агглютинации на стекле с К-сыворотками для идентификации вида возбудителя, используя данные таблицы 1:
К-1 К- 14 К - 12
 | | |
Таблица 1.
4. Серологическое исследование: произвести учет РСК с парными сыворотками крови больного ребенка с коклюшем.
| 1-я сыворотка крови | 
|
| 2-я сыворотка крови |
|
Вывод: ___________________________________________________________
5. Перечислить факторы патогенности:
| B. pertussis | B. рarapertussis |
_______________________________|___________________________________________________________________|___________________________________________________________________|___________________________________________________________________|___________________________________________________________________|___________________________________________________________________|____________________________________
6. Дорисовать схему лабораторной диагностики коклюшной инфекции
|
|
|
| Исследуемый материал: | ||
| 1 этап | 
|  
|
| 2 этап | 
|   ориентировочнная РА
|
| 3 этап |
| |
| 4 этап |
7. Промикроскопировать и зарисовать демонстрационные препараты, приготовленные из чистой культурыH. Influenzae.
 |
Рис. 3.КолонииH. influenzae
8. Изучить характер ростаH. influenzae на шоколадном агаре
 |
9. Учесть биохимическую активность H. influenzae и определить биовар.
|
|
|
|
| Образование индола | Уреазная активность | Орнитиндекар-боксилаза | D-ксилоза |
Биовары H. influenzae, в зависимости от их биохимической способности
| Признак | I | II | III | IV | V | VI | VII | VIII |
| Образование индола | + | + | _ | _ | + | _ | + | _ |
| Уреазная активность | + | + | + | + | _ | _ | _ | _ |
| орнитиндекарбоксилаза | + | _ | _ | + | + | + | _ | _ |
| D-ксилоза | + | + | + | + | + | + | + | + |
Учет результата _____________________________________________________________
10. Перечислить факторы патогенности H. influenzae: __________________________
_________________________________________________________________________
11. Дорисовать схему лабораторной диагностики гемофильной инфекции.
| Исследуемый материал: 1 этап |
|
Серологический метод
прямая РИФ
встречный
иммуноэлектрофорез
| ||||||||||
| 2 этап |
| 
тест набухания капсулы
| ||||||||||
| 3 этап 4 этап |
|
латекс-агглютинация
с анти-b-At.
12. Бактериоскопическое исследование отделяемого уретры:
Окрасить по Граму, Леффлеру и промикроскопировать мазки, приготовленные из отделяемого уретры больного гонореей, препарат зарисовать.
 |
| Рис. 1. Гонококки в гнойном отделяемом уретры (незавершенный фагоцитоз). Окраска по Леффлеру |
13. Бактериологическое исследование:
4) изучить рост менингококка на сывороточной среде с ристомицином;
5) определить цитохромоксидазную активность менингококка с помощью свежеприготовленного реактива: 1% раствор солянокислого парадиэтилфенилендиамина;
6) учесть ферментативные свойства нейссерий в средах Гисса, сравнить их с данными таблицы и зарисовать.
|
|
Таблица
|
|
|
