 |
Экспресс-методы биологический
|
|
|
|
1. МФА белые мыши (подкожно)
2. РНГА морские свинки (в паховую
(в лунках) область)
исследуемый материал
(СМЖ, кровь, костный мозг, моча,
грудное молоко, околоплодные воды, пунктаты)
СЕРОЛОГИЧЕСКИЕБАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЕ
 |  | ||||
 |
1. Реакция агглютинации (РА)
с бруцеллезным диагностикумом
(реакция РАЙТА)
диагностический титр
1:100 и более
1-й флакон в 2-й флакон при
обычных условиях повышенном СО2
комбинированная среда - специальные
(МПА+МПБ)
термостатирование 370С – 1 месяц
2. Реакция агглютинации (РА) с бруцеллезным начиная с 4-го дня просмотр флаконов. При
диагностикумом (реакция ХАДДЛСОНА) положительном результате – появляются мелкие,
гладкие, выпуклые, с перламутровым оттенком S-
колонии
| опыт | опыт | опыт | контроли | ||
| Сыворотка | 0,04 | 0,02 | 0,01 | 0,02 | - |
| Антиген | 0,03 | 0,03 | 0,03 | - | 0,03 |
| Изотонический раствор | - | - | - | 0,03 | 0,02 |
 |
Срок наблюдения 8 минут. сывороточный агар
При положительной реакции в опытных
каплях появляются хлопья
- микроскопия
- ферментативный ряд
| вид | фуксин | тионин | Н2S |
| B. melitensis | + | + | - |
| B. bovis | + | - | + |
| B. suis | - | + | + |
АЛЛЕРГИЧЕСКИЙ – внутрикожное введение бруцеллезного антигена-бруцеллина
(белковый экстракт культуры бруцелл) – 0,1 мл (проба Бюрне), ч/з 24-48 часов – отек и гиперемия размером 4х6 см на месте введения.
1. Морфология возбудителя бруцеллеза
 |
окраска по Граму
(мелкие Гр- бактерии палочковидной
или овоидной формы)
2. Культуральные свойства возбудителя бруцеллеза (аэробы)
 |  | ||
Рост бруцелл на плотных средах рост бруцелл на жидких средах
|
|
|
370С, ч/з 2-3 недели нежные, мелкие, - равномерная муть
бесцветные, выпуклые, с перламутровым
блеском колоний.
3. Техника постановки серологических реакций – см. стр. 347-400, Черкес.
4. Комбинированная питательная среда – см. стр. 346-347, Черкес
ТЕМА: “Микробиологическая диагностика туляремии”.
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ: выявление возбудителя туляремии.
Возбудитель туляремии: Francisella tularensis относится к семейству Francisellaceae, роду Francisella. Это мелкая грамотрицательная полиморфная (преимущественно кокковидная) палочка, неподвижная, спор не образует. Имеют тонкую капсулу.
Сбор материала и исследование проводят в строго режимных условиях!
МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
- Содержимое бубона.
- Отделяемое слизистой глаз.
- Мокрота.
- Испражнения.
- Кровь.
СПОСОБЫ СБОРА МАТЕРИАЛА
- Содержимое бубона собирают стерильным шприцем.
- Отделяемое слизистой глаз собирают стерильным тампоном.
- Испражнения собирают в широкогорлую банку.
- Мокроту собирают в широкогорлую банку.
- Кровь в количестве 2-3 мл берут стерильным шприцем и помещают в стерильную пробирку.
ОСНОВНЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
- Экспресс – методы: РИФ и РНГА
- Аллергический
- Серологический
- Биологический
- Бактериологический (не нашел широкого применения, т.к. непосредственный посев исследуемого материала на искусственные питательные среды роста бактерий не дает).
ХОД ИССЛЕДОВАНИЯ.
Реакция иммунофлюоресценции. (РИФ).
Относится к экспресс-методам.
В положительных случаях, т.е. когда исследуемый материал содержит туляремийные бактерии, после обработки люминесцирующей сыворткой, в люминесцентном микроскопе обнаруживается специфическое изумрудно-зеленое свечение туляремийных бактерий. Посторонняя микрофлора приобретает оранжево-красную флуоресценцию.
Аллергическая проба.
Ставится на 3-5 день заболевания.
А) Внутрикожная проба с тулярином.
|
|
|
Тулярин – взвесь туляремийных бактерий, убитых нагреванием при 700С в течение 1 часа. В 1мл препарата содержится 500 млн. убитых бактерий. Тулярин в количестве 0,1 мл вводят стерильным шприцем внутрь кожи левого предплечья. Учет реакции производят через 24-48 часов путем осмотра и ощупывания участка кожи, куда был введен тулярин. При положительной реакции на месте введения тулярина уже через 6-10 часов обнаруживается покраснение (гиперемия) и отек (инфильтрат) диаметром не менее 0,5см.
Б) Накожная проба с тулярином.
В 1 мл препарата содержится 10 млрд. убитых бактерий. Одну каплю тулярина наносят на обработанную кожу наружной поверхности левого плеча. Через каплю делают две параллельные насечки длиной 8-10 мм, расстояние между насечками 5 мм. Затем тщательно втирают тулярин. Учет реакции производят через 48-72 часа. Положительная реакция выражается отечностью кожи вокруг насечек и краснотой. Диаметр реагирующего участка кожи 1-2 см.
|
|
|
