Классификация диагностических серологических реакций по природе антигена, технике постановки и механизму протекания

· Реакции агглютинации

· Реакции преципитации

· Реакции лизиса

· Реакция нейтрализации

· Реакция иммунофлуоресценции

· Иммуносорбентные реакции

Антигены - любые вещества, в том числе содержащиеся в микроорганизмах и клетках или выделяемые ими, которые несут признаки генетически чужеродной информации и при введении в организм вызывают развитие специфических иммунологических реакций.

Антитела - иммуноглобулины, которые вырабатываются клетками лимфоидных органов после парентерального поступления антигена и способны специфически взаимодействовать с ним.

 

Основные типы иммунологических реакций в организме

1. Синтез антител.

2. Гиперчувствительность немедленного типа.

3. Гиперчувствительность замедленного типа.

4. Иммунологическая память.

5. Иммунологическая толерантность.

6. Идиотип-антиидиотипические взаимоотношения.

 

Механизм реакции агглютинации

Реакция агглютинации, как любая серологическая реакция, протекает в две фазы.

Первая фаза - специфическое соединение активного центра антитела с детерминантой антигена может происходить в отсутствие электро­литов. Эта фаза не сопровождается, видимыми изменениями системы и может быть обнаружена только косвенным путем.

Вторая фаза - склеивание антигенов - следует за первой и ее спе­цифичность менее выражена. Для ее проявления необходимы электролиты, которые снижают электрический заряд комплекса антиген - антитело и ускоряют реакцию. Эта фаза сопровождается видимым изменением среда, склеиванием антигенов и выпадением их в осадок.

Склеивание антигена осуществляется за счет связывания двухвалентными антителами поливалентных антигенов, в результате чего образуются комплексы связанных между собой антигенов через антитела.

 

Серологические реакции, используемые с диагностической целью

1. Классическая реакция агглютинации с бактериальными антигенами (развернутая и на стекле).

2. Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) и ее варианты (рНАг, рНАт).

3. Реакция Кумбса (для выявления неполных антител).

4. Реакция коагглютинации.

5. Реакция латекс-агглютинации.

6. Реакция агрегат-гемагглютинации.

7. Реакция иммунофлуоресцентного метода (прямого и непрямого).

8. Реакция связывания комплемента (РСК).

9. Реакция преципитации (в жидкой среде и в геле).

10. Опсоно-фагоцитарная реакция (ОФР).

11. Реакции иммуноферментного метода (ИФМ).

12. Реакции радиоиммунного метода (РИМ).

 

Система комплемента и ее основные функции

Комплемент - большая группа взаимодействующих между собой белков и гликопротеинов крови, имеющихся у всех позвоночных (белки С1-С9, различные факторы и инактиваторы, всего около 20 компонентов).

Существует три пути активации системы комплемента:

а) Классический, инициируемый комплексом антиген-антитело;

б) Альтернативный, инициируемый бактериальными эндотоксинами, пропердином и различными другими агентами, но протекающий без учас­тия компонентов С1, С4 и С2;

в) Механизм С1 -шунта, реализуется при дефиците С4-компонента, требует активации С1-компонента.

 

Основные функции системы комплемента:

1. Лизис чужеродных клеток, включая бактерий.

2. Опсонизация чужеродных клеток, включая бактерий. Они становятся более доступными для макрофагов, благодаря феномену иммунного прилипания (он обусловлен прилипанием к клеткам СЗв и в меньшей степени С4в, С5в, С3вi; С2 компонентов и их фрагментов).

3. Стимуляция хемотаксиса (С5а, в меньшей степени СЗа, фрагмент Ва, комплекс С5в67).

4. Стимуляция фагоцитоза (благодаря присоединению к иммунному комплексу С1q или СЗв).

5. Повышение сосудистой проницаемости и усиление лейкоцитоза (С5а, СЗе).

6. Стимуляция внутриклеточных процессов анафилотоксинами С5а,
СЗа, в результате которой из мастоцитов выбрасываются биологически
активные соединения (гистамин, брадикинин, серотонин, лейкотриены
и т.п.), обусловливающие развитие воспаления.

Компоненты и регуляторы комплемента могут быть синтезированы самими иммунекомпетентными клетками.

Макрофаги синтезируют белки С1q, С2, СЗ, С4, С5, факторы В,Д, Р, ингибиторы - фактор 1, Н, С1 -инактиватор (гены С2, С4 и фактора В связаны с системой MHC).

 

Реакция Кумбса

При помощи реакций прямой и пассивной агглютинации определяют полные (бивалентные) антитела. Неполные (моновалентные, блокирующие) антитела не выявляются этими методами, так как, соединяясь с анти­геном, блокируют его, но не могут вызвать аггрегации антигена в крупные конгломераты. Для выявления неполных антител используют специальную реакцию Кумбса. В реакции участвуют: а) сыворотка больного, в которой определяют неполные антитела; б) антиген-диагностикум; в) антиглобулиновая сыворотка - антитела к человеческому глобулину.

Реакция протекает в два этапа: 1) взаимодействие антигена с не­полными антителами; 2) взаимодействие антиглобулиновой сыворотки (антиглобулиновых антител) с антителами, адсобрированными на анти­гене. В силу того, что антиглобулиновые антитела двувалентны, они связывают два одновалентных антитела, адсорбированных соответствен­но на двух антигенах, что приводит к склеиванию антигенов, к их агглютинации.

Перечень обязательных сведений, которые должны быть на этикет­ках лечебно-профилактических препаратов:

а) полное наименование препарата;

б) номер государственного контроля;

в) номер серии препарата;

г) срок годности;

д) дозировка.

Вакцины по состоянию входящих в них антигенов делят на:

1) живые (БЦЖ, туляремийная, бруцеллезная, сыпнотифозная, сибиреязвенная, гриппозная, коревая, полиомиелитная и т.д.);

2) убитые (против кишечных инфекций, лептоспирозов, коклюша и т. д.);

3) химические, в состав которых входят полные антигены (хими­ческая сорбированная брюшнотифозная).

По количеству входящих в них антигенов вакцины делят на: моновакцины, дивакцины, тривакцины, поливакцины.

Ассоциированные (комбинированные) вакцины представляют собой комплексные препараты из различных вакцин (и анатоксинов).

Анатоксины получают, добавляя к нативному экзотоксину 0,5% формалина. Смесь выдерживают в течение 3-4 недель при 38-40 °С. Анатоксин применяют для создания активного антитоксического иммуните­та. Концентрация анатоксина выражается в иммуногенных единицах (ИЕ) или в единицах связывания (ЕС). Одна ИЕ или ЕС- это то коли­чество анатоксина, которое в смеси с 1 антитоксической единицей (АЕ) сыворотки дает инициальную флокуляцию.

Иммунные сыворотки делят на лечебно-профилактические и диагностические.

Для получения лечебно-профилактических сывороток иммунизируют крупных животных - лошадей, баранов, мулов, волов.

Для получения диагностических сывороток используют кроликов.

Лечебно-профилактические сыворотки делят на:

а) антибактериальные и

б) антитоксические

Антибактериальные сыворотки дозируются в миллилитрах (мл).

Антитоксические сыворотки дозируются в международных антитоксических единицах - МБ. Одна МЕ - количество сыворотки, нейтрализующее определенное количество доз токсина для животных определенного вида и веса. Количество МЕ сыворотки в I мл является ее титром. Титрование антитоксических сывороток проводят на животных и in vitro в реакции флокуляции.

Лечебно-профилактические сыворотки подвергаются очистке от балластных белков методом ферментативного гидролиза и последующего диализа (сыворотки-"Диаферм"). Эти сыворотки используют также для получения чистого концентрированного иммунного гаммаглобулина.

 

⇐ Предыдущая10111213141516171819Следующая ⇒

Поделиться:

Воспользуйтесь поиском по сайту: