Исследование выделительной и обезвреживающей функций печени.

Исследование обезвреживающей функции печени. Кровь воротной вены, поступающая от желудочно-кишечного тракта, содержит различные токсичные вещества, для которых пе­чень служит барьером. Здесь они не только задерживаются, но в большинстве своем и обез­вреживаются с помощью ферментов, осуществляющих окисление, восстановление, дезами- нирование, гидролиз, метилирование, образование сульфатов и глюкуронидов, соединение с глицином. В результате этих преобразований получаются либо менее токсичные, либо более растворимые вещества, которые могут бы1ть вы1ведены1 с желчью или мочой. Так, аммиак превращается в менее токсичную мочевину; свободный билирубин, соединяясь с глюкуроно- вой кислотой, становится менее токсичным и водорастворимым и может выводиться с жел­чью и мочой. Фенолы, индол, кетоны, спирты, сульфаниламидные препараты, камфора, мор­фин обезвреживаются преимущественно путем образования глюкуронидов или сульфатов, бензойный натрий — путем соединения с глицином; сантонин окисляется в оксисантонин; металлы вступают в связь с нуклеопротеидами. Наконец, звездчатые ретикуло-эндотелиоци- ты задерживают и фагоцитируют микроорганизмы.

Проба с нагрузкой бензойнокислым натрием. Этот препарат, принятый внутрь или введен­ный внутривенно, соединяется в печени с глицином, образуя гиппуровую кислоту, которая выводится с мочой. Обезвреживающая функция печени оценивается по проценту выделенно­го с мочой бензойнокислого натрия в виде гиппуровой кислоты. При поражении паренхимы печени синтез гиппуровой кислоты нарушается и выделение ее замедляется. Проба имеет ряд недостатков: она положительная при механических желтухах, опухолях, лихорадочных со­стояниях, и ее можно проводить только при нормальной функции почек.

Исследование вывделительной функции печени. Среди веществ, подлежащих выведе­нию из организма, водорастворимые выделяются преимущественно почками, нерастворимые в воде или связанные с белками — печенью. Нормальная выделительная способность печени ограничена. Так, при значительном усилении гемолиза здоровая печень неспособна вывести весь билирубин из крови и он в ней накапливается. При поражении паренхимы уменьшаются выделительные возможности печени, что, в частности, также часто проявляется билирубине- мией. Для выявления нарушенной вывделительной функции печени, особенно при безжел­тушных формах заболевания, большое значение имеют пробы с введением в кровь веществ, подлежащих выведению с желчью.

Проба с бромсульфалеином (или вофавердином) является одной из наиболее специфич­ных. Этот препарат вводят больному внутривенно из расчета 5 мг/кг. Через 3 мин после вве­дения, когда достигается максимальная концентрация препарата в крови, берут первую про­бу крови, а через 45 мин — вторую. В обеих порциях колориметрически определяют концен­трацию бром-сульфалеина, который при добавлении щелочи приобретает красно-фиолето­вую окраску. При хорошей выделительной функции печени через 45 мин в крови содержится не более 5% препарата от первоначальной концентрации, принимаемой за 100%. Краску че­рез 15 мин после ее введения можно обнаружить и в желчи. Проба очень чувствительна: не­большие нарушения функции органа, не улавливаемые другими методами, заметно сказыва­ются на ее результатах.

Проба с зеленым индоцианом основана на аналогичном принципе. Препарат вводят вну­тривенно из расчета 0,5 мг/кг; в норме через 20 мин в крови остается не более 4% введенной краски. Проба более чувствительная, чем бромсульфалеиновая.

Исследование пигментного обмена в печени, диагностическое значение.

Отражением пигментного обмена в печени является содержание в крови (а также в кале и моче) билирубина и продуктов его восстановления. Определение нарушений пигментного обмена дает представление о функциональном состоя­нии геиатоцитов, а также помогает дифференцировать различные типы желтух.

Образование билирубина происходит в ретикулоэндотелиальных клетках костного мозга, лимфатических узлов, но в основном селезенки, а также в звездчатых ретикулоэндотелиоцитах печени (рис. 117). Билирубин образуется из гемоглобина, освобождающегося при физиологическом распаде эритроцитов; при этом гемогло­бин распадается на белковое тело глобин и гем, содержащий железо. В клетках ретикулоэндотелиальной систе­мы из освободившегося гема образуется свободный билирубин, который циркулирует в крови в непрочной связи с белком альбумином. Содержание свободного билирубина в крови составляет 8,55—20,52 мкмоль/л (0,5—1,2 мг%). Основная масса его поступает в печень, где он освобождается от связи с альбумином и при участии фер­ментов печени соединяется с глюкуроновой кислотой, образуя водорастворимое соединение — билирубинглю- куронид (моно- и диглюкуронид, или связанный билирубин), который выводится в желчные пути.

Следовательно, печень участвует в обмене билирубина, выполняя следующие функции: 1) образование би­лирубина в звездчатых ретикулоэндотелиоцитах; 2) улавливание свободного билирубина из крови; 3) образова­ние соединения билирубина с глюкуроновой кислотой; 4) секреция в желчь билирубинглюкуронида (связанный билирубин).

В крови здоровых людей находится только свободный пигмент. При заболеваниях, которые сопровождают­ся нарушением или извращением нормального выделения с желчью связанного билирубина, он попадает в кровь, и тогда в ней циркулируют оба пигмента (их можно определить раздельно).

Пробы (если надо)).

Качественная проба Ван ден Берга дает ориентировочные сведения: если она оказывается непрямой, можно считать, что в крови есть только свободный билирубин; если же она оказывается прямой, то неизвестно, в ка­ком соотношении находятся оба пигмента — положительная прямая реакция маскирует присутствие любого количества свободного билирубина. В настоящее время пользуются преимущественно раздельным количе­ственным определением фракций билирубина. В большинстве проводимых для этого исследований используют те же диазореактивы, что и для качественной пробы (диазореактив I: в дистиллированной воде растворяют 5 г сульфаниловой кислоты и 15 мл крепкой хлористоводородной кислоты и доводят объем дистиллированной во­дой до 1 л; диазореактив II: 0,5% раствор нитрита натрия; диазосмесь: 10 мл диазореактива I + 0,25 мл диазоре- актива II).

Качественная проба: к 0,5 мл сыворотки приливают 0,25 мл диазосмеси. В случае покраснения сыворотки в течение менее 1 мин реакция считается прямой быстрой и говорит о присутствии в сыворотке связанного били­рубина. Если покраснение наступает медленно (в течение 1 — 10 мин), что бывает при присоединении относи­тельно малого количества связанного билирубина к свободному, реакция рассматривается как прямая за­медленная. В случае отсутствия покраснения более 10 мин прямую реакцию считают отрицательной. При же­лании убедиться, что желтый цвет такой сыворотки зависит именно от билирубина, к ней прибавляют двойное количество спирта, фильтруют и к фильтрату добавляют диазосмесь, в результате чего жидкость розовеет (не­прямая реакция). Методов количественного раздельного определения фракций билирубина много. Часть из них основана на том, что свободный билирубин под влиянием таких веществ, как кофеин, который используется в наиболее распространенном методе Ендрашика, метиловый спирт и др., действующих наподобие катализатора, акцелератора, приобретает способность реагировать с диазореактивом. В первой порции сыворотки, обработан­ной акцелератором, можно определить суммарное содержание обеих фракций. В другой порции, без прибавле­ния акцелератора, определяют только связанный пигмент. Вычитая из общего количества билирубина связан­ную его фракцию, узнают свободную. Другие методы раздельного определения фракций билирубина (химиче­ские, хроматографические) более сложны.

Свободный билирубин, нерастворимый в воде, не выделяется почками; после связывания с глюкуроновои кислотой он становится водорастворимым при накоплении в крови — при подпеченочной и печеночной желтухах он обнаруживается в моче. В желчные пути выделя­ется только связанный билирубин (билирубинглюкуронид). В крупных желчных ходах и желчном пузыре (особенно при воспалительных процессах в них) и далее в кишечнике не­большая часть билирубина восстанавливается до уробилиногена, который резорбируется в верхнем отделе тонкой кишки и с кровью воротной вены попадает в печень. Здоровая печень полностью улавливает его и окисляет, но больной орган не в состоянии выполнить эту функ­цию, уробилиноген переходит в кровь и выделяется с мочой в виде уробилина. Уробилину- рия является очень тонким и ранним признаком функциональной недостаточности печени. Остальная, большая, часть билирубина в кишечнике восстанавливается вплоть до стеркоби- линогена. Основная часть его выделяется с калом, превратившись в прямой кишке и вне ее (на свету и воздухе) в стеркобилин, придающий калу его нормальную окраску. Небольшая часть стеркобилиногена, всасываясь в нижних отделах толстой кишки, по геморроидальным венам, минуя печень, попадает в общий круг кровообращения и выделяется почками. Нор­мальная моча всегда содержит следы стеркобилиногена, который под действием света и воз­духа превращается в стеркобилин.

Содержание уробилиновых тел в моче увеличивается не только при недостаточности функции печени, но и при повышении гемолиза. В этих случаях вследствие освобождения значительного количества гемоглобина образуется и выделяется в кишечник больше билиру­бина. Повышение продукции стеркобилина приводит к усилению его экскреции с мочой. В случае механической желтухи, когда желчь совсем не попадает в кишечник, в кале отсут­ствует стеркобилин, в моче нет уробилиновых тел. При печеночно-клеточных желтухах по­нижается выделение билирубина с желчью и количество стеркобилина в кале уменьшается, а количество уробилиновых тел в моче нарастает. Соотношение их, составляющее в норме 10: 1—20: 1, значительно снижается, доходя при тяжелых поражениях печени до 1: 1. При ге­молитических желтухах нарастание стеркобилина в кале значительно превышает увеличение экскреции уробилиновык тел с мочой. Их соотношение возрастает до 300: 1—500: 1. Ве­личина соотношения продуктов восстановления билирубина в кале и моче является гораздо более показательной при дифференциации желтух, чем абсолютная величина каждого из них.