 |
Saliva as a Diagnostic Fluid
|
|
|
|
Слюна в качестве диагностического жидкости
Слюнные диагностика является динамичной и развивающейся области с использованием нанотехнологий и молекулярной
диагностика, чтобы помочь в диагностике полости рта и системных заболеваний. Здесь мы критически рассмотреть
последние достижения с использованием оральных биомаркеров для выявления заболевания. Использование оральных жидкостей расширяется
перспективы в клинической диагностике, мониторинге заболеваний и принятия решений для ухода за пациентами.
Важные элементы, определяющие будущие возможности и проблемы в этой области также
обсуждался.
Слюна является клинически информативным, биологическая жидкость (биожидкости), что полезно для романа подходы к прогнозу, лаборатории или клинической диагностики, а также мониторинг и управление пациентов с устных и сист мных заболеваний. Он легко собирать и хранить, и идеально подходит для раннее выявление заболевания, поскольку он содержит специфические растворимые биологические маркеры (биомаркеры). Слюна содержит несколько биомаркеров, которые делают его полезным для мультиплексированных анализов, которые
разрабатывается как пункт-ухода (ПСУ) устройств, экспресс-тестов, или в более стандартных форматах для централизованных клинических лабораторных работ. Слюнные диагностика является динамично развивающейся отраслью, что является включаются как часть диагноза заболевания, клинического мониторинга и для принятия важные клинические решения для ухода за пациентами. Слюнные диагностика была предметом недавних встреч и обзорах [1,2], и
Обзор принципов секреции желез, слюнных методов сбора слюны, и
|
|
|
обсуждение общих применений можно найти в докладе совещания, опубликованного в анналах
Нью-Йоркской академии наук [3]. Эти темы были обновлены в одном из последующих заседаний
[4], а также в недавнем учебнике, слюнных диагностика, 2008 [5]. Слюнные диагностика превратилась в сложную науку, и служит подмножество большее поле молекулярной диагностики, в настоящее время признается в качестве центрального игрока в самых разнообразных медико-биологические и клинические основные области (см Рисунок 1). Молекулярная диагностика каналов в широкий круг дисциплин, включая разработки лекарственных средств, персонализированная медицина (фармакогеномика) и играет важную роль в открытии биомаркеров для диагностики оральные и системные заболевания. Это особенно верно, так как большинство биомаркеров представить в кровь и моча также может быть обнаружен в образце слюны. В настоящем обзоре мы сосредоточимся на использование слюны и других оральных образцов для диагностики системных и заболеваний полости рта.
Исторически сложилось так, системные заболевания диагностируются с помощью (1) пациентов сообщили симптомы, (2) экспертиза и история болезни, полученный врачом или другим медицинским работником, (3) химический анализ крови и / или мочи. Образцы пациентки, как правило, направлены удаленный, клинико-диагностическая лаборатория для определения уровней широкой серии маркеры, включая ионы, антитела, уровень гормонов, а также различные заболевания специфические биомаркеры. Через некоторое время (от нескольких минут до нескольких дней в зависимости от анализа) лабораторный отчет возвращается к врачу, а затем полученные результаты сообщены в пациент. Как правило, устные пробы берутся только если есть подозрение устного инфекции, для Пример горло тампоном для стрептококк Пирролидонилпептидаза диагностировать "острый фарингит", или на слизистых оболочках
|
|
|
биопсия при подозрении на рак ротовой полости. Тем не менее, наблюдается повышенный интерес к использованию слюна, и другие пероральные образцы, для диагностики полости рта и системных заболеваний. В некотором смысле, обоснование очевидна. Если можно получить аналогичные или идентичные данные с пероральным образец, который легко собрать, и что не требует инвазивных процедур, необходимость наличия ничья кровь станет ненужной. Это особенно важно в ряде населения и ситуации, которые вк лючают в себя обработку педиатрического и гериатрического пациентов, или когда доступ к медицинской помощи ограничен в отдаленных географических районах, где Phlebotomists являются недоступен. Недавний опрос, сообщили, что стоматологи считают, что скрининг на медицинское условия имеет важное значение, и они готовы принять участие, когда образец слюны, а отличие от прокола пальца [6].
Для того, чтобы обосновать концепцию, что устный диагностический тест будет предпочтительным по сравнению с предыдущим более инвазивные альтернативы, нужно лишь взглянуть на успех орального термометра обнаружить лихорадку, которая полностью заменить своего предшественника, ректального термометра. Больше в последнее время, подтверждение того, что устный тест для выявления антител к человеческому Вирус иммунодефицита (ВИЧ) является также чувствительным и специфичным как анализ крови [7,8] привело к Значительное увеличение тестирования на ВИЧ в различных местах, в том числе неотложной помощи, сексуально переданные заболевания (STD) клиники, центры здоровья общины, бани, и большинство в последнее время в стоматологических установках. Способность точно определять наличие антител к ВИЧ, сильно предполагает потенциал для выявления антител к многим другим патогенам. На самом деле современная литература документы Для большого количества вирусных и бактериальных патогенных микроорганизмов [1]. Оральные образцы, которые полезны для диагностики системных заболеваний включают в себя слюна, десен
жидкость из десневой борозды (ГКМ), оральные мазки, зубной налет, и летучие вещества. Действительно, были опубликованы данные указывает на успешное использование всех этих типов оральных образцов для обнаружения или прогнозирования
|
|
|
Слюнных биомаркеров для инфекционных заболеваний
Эта тема была недавно рассмотрел [1,3] и только будет кратко здесь.
предыдущий обзор выявил двадцать три вирусы, которые могут быть выявлены в образцах слюнных путем специфической реактивности антител, обнаружение антигена или нуклеиновой кислоты с помощью ПЦР. Они включают в себя Большой диапазон вирусов герпеса, вирусов гепатита, ВИЧ, вирус папилломы человека (ВПЧ), Вирус гриппа и полиомиелита. Четырнадцать были обнаружены бактериальные патогены (антителами, антиген или нуклеиновой кислоты) в том числе кишечной палочки, микобактерий туберкулеза,
Хеликобактер пилори, бледная спирохета и широкий спектр видов стрептококков. невирусных
и небактериальный инфекционные агенты, в том числе Candida Albicans, Toxoplama гондий и
Schistosoma mansoni были обнаружены, как правило, с помощью антитела к этим инфекционным агентам.
Эти патогены ответственны за обоих системных и заболеваний полости рта. Тесты для них, и
много других патогенных микроорганизмов, в настоящее время в стадии разработки большого числа коммерческих
и научные учреждения, так что вполне вероятно, что дополнительные слюнные на основе тестов на инфекционное
заболевания будут продолжать появляться. Некоторые из общих патогенез и не-pathogeninduced
заболевания полости рта и роль слюны в их диагностике описаны ниже.
Слюнные диагностика в полости рта, вызванные вирусами
Заболевания полости рта, вызванные вирусами, которые широко распространены в том числе папилломы (ВПЧ связаны
с раком ротовой полости и полости рта -OSSC- бородавок) и герпесвирусов (EBV вызывает Hairy
Лейкоплакия и также связан с различными типами лимфоидных и эпителиальные
злокачественные новообразования; Цитомегаловирус [ЦМВ] вызывает оппортунистические инфекции после твердого органа
Трансплантация, ретинит, желудочно-кишечные и неврологические расстройства, и афтозный стоматит;
Herpes Simplex Вирусы 1 и 2 [HSV-1 и HSV-2] и Varicella Zoster Вирус [VZV] также
|
|
|
вызывая устные изъязвления афтозного типа; и Герпеса человека 8 [HHV-8] вызывает
оральный и саркома Капоши системной). Эти заболевания полости рта были чаще
сообщили у пациентов с иммунодефицитом из-за ухудшения состояния иммунной системы,
особенно с ВИЧ / СПИДом, не получающих ВААРТ, которая представляет более чем 70%
люди, проживающие в странах, где эпидемия СПИДа является наиболее разрушительным
[98,99,100,101,102,103,104,105,106]. После начала высокоактивной антиретровирусной терапии
(ВААРТ), у пациентов с ВИЧ / СПИД показывают более низкую распространенность некоторых из этих заболеваний полости рта (Hairy
Лейкоплакия и саркома Капоши), но и другие условия продолжают или может быть даже больше,
распространенные при HAART (оральные бородавки, рака ротовой полости, цитомегалия и поражения ротовой полости
связанный с Воспалительный синдром восстановления иммунитета -IRIS) [107,108].
Клинический диагноз оральных заболеваний и вирусных агентов, описанных выше, основывается на клинических
экспертиза при поддержке подтверждающим клинических лабораторных испытаний, в том числе
гистопатологическая окрашивание образцов ткани, микроскопическая визуализация поражений и
патогены, выделение вируса из клинических образцов, а также nucleic- и иммунологические для
обнаружение вирусных и принимающих биомаркеров. Например, стандартный подход к ВИЧ клинической
лабораторная диагностика тестирует сыворотки или плазмы в чувствительных ELISA
с последующим Вестерн-блот, если ИФА положителен. Тем не менее, оральные жидкости также были
успешно используется в лабораторной диагностики для выявления антигена и антител к ВИЧ в разных
nucleic- и иммунологического форматы, такие как QRT-ПЦР, ИФА, экспресс-тест, СПЭ и
микрофлюидальные диагностические приборы [18.109.110.111.112.113.114.115.116]. Кроме того, ВИЧ
нейтрализующие врожденной иммунной факторы, такие как дефенсинов также успешно обнаружен в
Слюна с использованием сложных экспериментальных методик, таких как жидкий chromatographytandem
масс-спектрометрии, которая включает в себя манипуляции с ограниченной выборки и которые могут быть легко
автоматизировано [117].
Экспериментальное обнаружение ВПЧ в образцах слюны использовал анализы нуклеиновых кислот, такие как
амплификации ДНК ВПЧ с помощью ПЦР [118,119] и этой методике была также использована для
обнаруживать различные типы ВПЧ [99]. Антитела к HPV были одновременно испытаны в
в сыворотке крови, слюне и слизистой ротовой полости транссудата образцы, дающие обнадеживающие результаты при использовании
Маламуд и Родригес-Чавес Page 9
|
|
|
Dent Clin North Am. Автор рукописи; доступны в КУП 2012 1 января.
NIH-PA Автор Рукопись NIH-PA Автор Рукопись NIH-PA Автор Рукопись
устные жидкости, но дальнейшая оптимизация также была рекомендована в качестве надежной альтернативы
сыворотки, тестирование на ВПЧ [120].
Нагрузка ДНК EBV в крови и слюне обнаружены с помощью ПЦР показал аналогичные результаты в
когорты ВИЧ-инфицированных больных [121,122,123]. Вложенными метод ПЦР использовали для
последовательно обнаружить CMV в поддесневой бляшки, нестимулированных слюны и периферической крови
у пациентов с хроническим периодонтитом [124], и было сообщено, что слюна является настолько надежным, как
мочи для обнаружения ЦМВ в больших скрининговых программ [125]. Совсем недавно, образцы слюны
были успешно использованы для прямого генотипирования штаммов ЦМВ в новой ПЦР-ограничения
длина фрагмента полиморфизм метод (ПДРФ), в сочетании с капиллярного электрофореза
Обнаружение фрагмента для генотипирования [126]. Сравнительный гнездовой ПЦР анализ слюны и
Образцы периферической крови последовательно демонстрировали обнаружение HSV-1 с аналогичными
частоты в обоих типах образцов [101]. Аналогичным образом, надежное обнаружение и количественное определение
нуклеиновых кислот для HSV-1, HSV-2 и ВВЗ в жидкости полости рта поступало. Eсть
новая стандартизированная жидкая фаза на основе системы сбора слюны, а затем полностью автоматизированный
вирусные выделения нуклеиновых кислот и ОТ-ПЦР, с использованием коммерчески доступного диагностики ин витро
(IVD) / Conformité Européene (CE) маркированы молекулярных анализов [127]. И, наконец, пролития
ВГЧ-8 в слюне также была продемонстрирована с использованием ПЦР и иммуногистохимии
[128129], и HHV-8 нагрузки в крови, сыворотке и слюне показали сопоставимые титры с помощью
QRT-ПЦР [130].
Одновременное обнаружение вирусов в жидкости полости рта с использованием различных анализов с многократными
приложения является развивающейся области. Многие из этих анализов меняются для включения
мультиплексирование возможности и воспользоваться нанотехнологических подходов, получая
автоматизированных, надежных и чувствительных диагностических устройств. Тем не менее, эти новые системы обнаружения
требуют дальнейшего
|
|
|
12 |
