 |
Морфология и культуральные признаки возбудителя дифтерии (его основные биовары).Факторы патогенности
|
|
|
|
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
Возбудитель дифтерии характеризуется полиморфизмом: тонкие, слегка изогнутые палочки (наиб. распространенные) встречаются кокковидные и ветвящиеся формы. Бактерии нередко располагаются под углом друг к другу. Они не образуют спор, не имеют жгутиков, у многих штаммов выявляют микрокапсулу. Характерная особенность - наличие на концах палочки зерен волютина (обусловливает булавовидную форму). Возбудитель дифтерии по Граму окрашивается положительно.
КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА
Факультативный анаэроб, оптим. температура. Микроб растет на специальных питательных средах, например на среде Клауберга (кровяно-теллуритовый агар), на которой дифтерийная палочка даёт колонии 3 типов: а) крупные, серые, с неровными краями, радиальной исчерченностью, напоминающие маргаритки; б) мелкие, черные, выпуклые, с ровными краями; в) похожие на первые и вторые.
В зависимости от культуральных и ферментативных свойств различают 3 биологических варианта C.diphtheriae:gravis,mitisи промежуточныйintermedius.
ФАКТОРЫ ПАТОГЕННОСТИ
Экзотоксин, нарушающий синтез белка и поражающий в связи с этим клетки миокарда, надпочечников, почек, нервных ганглиев. Способность вырабатывать экзотоксин обусловлена наличием в клетке профага, несущегоtох-ген, ответственный за образование токсина. Ферменты агрессии — гиалуронидазу, нейраминидазу. К факторам патогенности относится также микрокапсула.
Выделяют два основных биовара возбудителя (gravis и mitts), а также ряд промежуточных (intermedius, minimus и др.)
Материал для исследования,методика забора,этапы бактериологического метода исследования дифтерии
С помощью тампона у больного берут пленку и слизь из зева и носа
|
|
|
1 день: Посев материала.
Материал для исследования из ротоглотки, носа или других пораженных мест засевают раздельно на поверхность одной из рекомендуемых плотных питательных сред, разлитых в чашки Петри. При посеве материал втирают в среду со всех сторон тампона на участке площадью 2 x 1 кв. см - формирование такой "площадки" является обязательным. Затем этим же тампоном засевают оставшуюся поверхность 1/2 чашки. Посев производят частыми неперекрывающимися штрихами, не отрывая тампон от поверхности питательной среды и не изменяя положения тампона.
2день
Исследуют под микроскопом колонии,выросшие за 24 ч, Чашки с колониями, похожими на дифтерийные, отбирают для дальнейшей идентификации культуры по всем тестам. В случае роста "подозрительных" однотипных колоний, необходимо сразу же приступить к изучению их токсигенных свойств.
3день
Через 24 часа, при появлении специфических линий преципитации на среде для определения токсигенности, положительной пробе на цистиназу, изучаемую культуру идентифицируют как коринебактерий дифтерии токсигенные и выдают документированный ответ.
При отсутствии специфических линий преципитации на среде для определения токсигенности, чашки инкубируют еще 24 часа.
4день
Определяют токсигенность,бх свойства. При отсутствии специфических линий преципитации через 48 часов после постановки пробы на токсигенность, но при положительных результатах проб на цистиназу, глюкозу, отрицательных результатах проб на уреазу и сахарозу, культуру идентифицируют как коринебактерии дифтерии нетоксигенные, с указанием биохимического варианта.
Идентификация чистой культуры.Отличия возбудителей дифтерии от других коринебактерий(ложнодифтерийные палочки и дифтероидов)
Внутривидовая идентификация заключается в определении био- и серовара. Для ускоренного обнаружения дифтерийного токсина применяют: РНГА с антительным эритроцитарным диагностикумом, реакцию нейтрализации антител (о наличии токсина судят по эффекту предотвращения гемаггютинации); РИА и ИФА
|
|
|
Дифтерийная палочка не гидролизует мочевину и не образует индол. Отсутствие способности ферментировать палочку сахарозу и разлагать мочевину – дифференцирующий признак, отличающий дифтерийную палочку от других коринебактерий. Другой дифференцирующий признак – способность разлагать цистин.
Окраска по Найссеру позволяет выделить характерные зерна Бабеша-Эрнста и отличить дифтерийную палочку от ложнодифтерийной палочки. C.pseudodiphtheriticum
Отличия от дифтероидов: дифтероиды имеют большее количество волютиновых зерен, расположенных не полярно, а по всему телу; в мазках дифтероиды располагаются не под углом, а параллельными рядами — «частоколом».
Дифтерийный токсин,его свойства,действие на лабораторных животных и человека. Методы отпределения токсигенности дифтерийной палочки
Экзотоксин синтезируется лизогенными культурами в виде неактивного предшественника. Активация происходит под действием собственной протеазы, которая разрезает его на 2 пептида А и В. Пептид В выполняет акцепторную функцию, пепдит А реализует биологическую активность токсина.
ЖИВОТНЫЕ: Антитоксический и антимикробный. Напряженность антитоксического иммунитета ранее определялась в реакции Шика (внутрикожное введением дифтерийного токсина — 1/40 Dlm для морской свинки). При наличии иммунитета проба Шика отрицательная, при отсутствии — местная воспалительная реакция. В настоящее время для определения титра антитоксических антител используются РНГА и ИФА. Специфическая профилактика
ЧЕЛОВЕК: Активная иммунизация проводится вакциной АКДС или АДС (АДС-М). Дифтерийный компонент — анатоксин. Вакцинация плановая в 3, 4 и 5 месяцев. Ревакцинации в 18 месяцев, в 6, 11 и 16 лет, а в последующем каждые 10 лет до 66 лет.
Определение токсигенности дифтерийной палочки in vitro. Способность к образованию токсина можно определять заражением куриных эмбрионов или культур клеток с регистрацией последующего цитопатнческого эффекта. Можно использовать твердофазный ИФА с использованием антитоксинов, меченных пероксидазой. Также предложены ПЦР и ДНК-зонды для обнаружения гена tox в бактериальной хромосоме.
|
|
|
Таксономическое положение микобактерий.Виды микобактерий:комплекс туберкулезных и нетуберкулезных палочек.Основные представители
Домен: актериа
Тип: актинобатериа
Класс:актинобактериа
Порядок: актиномицеталес
Семейство: микобактериацеа
Род: микобактериум
Виды:
Комплекс туберкулезных палочек:
M.tuberculosis
m.bovis(BCG-вакцинный штамм,А.calmette, C.Guerin)
M.africanum
m.microti (выделен от полевых мышей)
m.canetti(от больных туберкулезом собак)
Нетуберкулезные миобатерии:
M. leprae (возбудитель лепры)
Комплекс м. fotuitum: M.fotuitum и M.chilonei
Комплекс M. terrae: M.terrae, m.triviale, m.nonchromogenicum
M.ulceans (вызывает язвенные поражения)
|
|
|
