 |
1. Трансмиссионная (просвечивающая)
|
|
|
|
1. Трансмиссионная (просвечивающая)
При трансмиссионной микроскопии пучок электронов проходит через изучаемый объект, и в результате получается плоскостное изображение объекта.
2. Сканирующая (растровая)
При сканирующей микроскопии на поверхность объекта вначале наносится металлическое напыление, а в ходе микроскопии электронный пучок последовательно “пробегает” по всем точкам поверхности объекта (сканирует поверхность), выбивая из напылённого вещества вторичные электроны (бета-лучи). Последние формируют пространственное изображение поверхности.
ПРАВИЛА ПРИГОТОВЛЕНИЯ МИКРОПРЕПАРАТОВ. ПРИГОТОВЛЕНИЕ МИКРОПРЕПАРАТОВ ИЗ ЧИСТОЙ КУЛЬТУРЫ.
Мазки из крови готовят с помощью второго стекла с отшлифованным краем. Каплю крови наносят у левого края стекла, перед каплей под углом помещают край отшлифованного стекла и продвигают его вперед вместе с каплей крови.
Мазки из мокроты и гноя – материал стерильной петлей наносят на середину предметного стекла, накрывают вторым предметным стеклом и с усилием раздвигают в стороны.
Мазки из гноя, взятого с помощью тампона – плоскостью тампона готовят штриховой мазок посередине стекла.
Мазки-отпечатки из органов – вырезанный кусочек органа поверхностью среза прижимают к стеклу.
Мазки из культуры бактерий, выращенной на плотной питательной среде, готовят с помощью бактериологической петли.
Правило: бактериологическая петля стерилизуется до и после любой работы с ней и может находиться только в штативе или в руке.
Этапы приготовления мазка:
1. Предметное стекло обезжирить мылом.
2. Петлей взять каплю стерильного физиологического раствора и нанести ее на середину предметного стекла.
|
|
|
3. Плоскостью стерильной петли осторожно снять культуру с агара в пробирке или чашке Петри и внести ее в каплю на стекле.
4. Круговыми движениями петли культуру растереть в капле, чтобы получился равномерный мазок диаметром около 2 см.
5. Мазок высушить над парами спиртовки.
6. Зафиксировать над пламенем спиртовки, при этом стекло должно быть горячим, но не обжигающим.
7. Окрасить и снова высушить.
8. Иммерсионная микроскопия.
Значения фиксации:
А) обеззараживание материала.
Б) закрепление мазка на стекле.
В) улучшения восприятия красителя.
ПРОСТЫЕ МЕТОДЫ ОКРАСКИ
Простая окраска позволяет быстро изучить морфологические особенности микроорганизмов. Наиболее пригодными являются основные и нейтральные анилиновые красители. Для простой окраски используют только один краситель, чаще всего красного цвета - фуксин, фиолетового - генцианвиолет (окраска производится в течение 1-2 мин) или синего - метиленовый синий (окраска производится в течение 3-5 мин). Для закрашивания фона в качестве краски используют черную тушь (метод Бурри)
Чтобы приготовить мазок, на середину чистого предметного стекла наносят небольшую каплю воды, с помощью бактериальной петли помещают в нее исследуемый материал и равномерно распределяют его на стекле до образования тонкого мазка. Препарат высушивают и фиксируют над пламенем горелки. После окраски промывают водой и высушивают, после чего его можно микроскопировать.
| Гонококк в гное Neisseria gonorrhoeae (метиленовая синь) |
| Стафилококк Staphylococcus aureus (генцианвиолет) |
| Бациллы антрокоида Bacillus antrocoides (генцианвиолет) |
| Кишечная палочка Еscherichia coli (фуксин) |
| По форме выделяют 4 группы бактерий: |
I. КОККОВЫЕ (ШАРОВИДНЫЕ)
I. ПАЛОЧКОВИДНЫЕ
|
|
|
II. НИТЕВИДНЫЕ
III. ИЗВИТЫЕ
| Менингококки, Гонококки |
| КОККОВЫЕ |
| пневмококки |
| ПАЛОЧКОВИДНЫЕ |
| Бациллы |
| Туберкулезная палочка |
| Кишечная палочка |
| Бациллы |
| Дифтерийная палочка |
| Клостридии |
| Вибрион холеры |
| Палочка чумы |
| ВЕТВЯЩИЕСЯ |
АКТИНОМИЦЕТЫ
ОСНОВНЫЕ ОТЛИЧИЯ ПРОКАРИОТ ОТ ЭУКАРИОТ.
| ПРИЗНАК | ПРОКАРИОТЫ | ЭУКАРИОТЫ |
| Генетический материал | Кольцевая молекула ДНК | В ядре |
| Ядерная мембрана | - | + |
| Гистоны | - | + |
| Набор хромосом | 1n | 2n |
| Аппарат Гольджи, митохондрии, хлоропласты | - | + |
| Клеточная стенка | пептидогликан | Целлюлоза, хитин |
| Размер клеток | 0, 5-5 мкм | До 100 мкм |
| Тканевая дифференциация | - | + |
| Деление | Бинарное | Митоз/ мейоз |
Строение бактериальной клетки
Постоянные структуры:
-цитоплазма
-нуклеоид
-рибосомы
-цитоплазматическая мембрана
-мезосома (производная ЦПМ)
-лизосомы
-клеточная стенка
-пили общего типа
-включения
Непостоянные структуры:
-спора
-капсула
-пили полового типа (F-пили)
-жгутики
Бактериальная клетка окружена внешней оболочкой:
1) клеточной стенкой.
2) капсулой;
3) капсулоподобной оболочкой.
Химический состав бактериальной клетки
| Компонент | Доля от общего веса клетки, % | |
| Бактерии | Клетка млекопитающего | |
| Н2О | ||
| Неорганические ионы (Nа+, К+, М2+, Са2+, Сl- и т. п. ) | ||
| Разнообразные низкомолекулярные | ||
| Метаболиты | ||
| Белки | ||
| РНК | 1, 1 | |
| ДНК | 1, 0 | 0, 25 |
| Фосфолипиды | ||
| Другие липиды | - | |
| Полисахариды | ||
| Общий объем клетки | 2 х 10-12 см3 | 4 х 10-9 см3 |
| Относительный объем клетки | ||
Клеточная стенка
КС -это биогетерополимер со сложным химическим составом. Окраска по Граму (Гр+/Гр-) микроорганизмов зависит от строения клеточной стенки.
|
|
|
