Первично-активный транспорт. Вторично-активный транспорт. Эндоцитоз и экзоцитоз

Первично-активный транспорт

Действие пассивного транспорта через мембрану, в ходе которого ионы перемещаются по их электрохимическому градиенту, должно быть сбалансировано их активным транспортом против соответствующих градиентов. В противном случае, ионные градиенты исчезли бы полностью, и концентрации ионов по обе стороны мембраны пришли бы в равновесие. Это действительно происходит, когда активный транспорт через мембрану блокируют охлаждением или путём использования некоторых ядов.
Существует несколько систем активного транспорта ионов в плазматической мембране (ионные насосы):
1) Натрий-калиевый насос.
2) Кальциевый насос.
3) Водородный насос.

Активный транспорт - перенос ионов против их электрохимических градиентов с использованием энергии метаболизма:

Натрий-калиевый насос существует в плазматических мембранах всех животных и растительных клеток. Он выкачивает ионы натрия из клеток и загнетает в клетки ионы калия. В результате концентрация калия в клетках существенно превышает концентрацию ионов натрия.
Натрий-калиевый насос - один из интегральных белков мембраны. Он обладает энзимными свойствами и способен гидролизовать аденозинтрифосфорную кислоту (АТФ), являющуюся основным источником и хранилищем энергии метаболизма в клетке. Благодаря этому указанный интегральный белок называется натрий-калийиевой АТФазой . Молекула ATФ распадается на молекулу аденозиндифосфорной кислоты (АДФ) и неорганический фосфат.
Таким образом, натрий-калиевый насос выполняет трансмембранный антипорт ионов натрия и калия. Молекула насоса существует в двух основных конформациях, взаимное преобразование которых стимулируется гидролизом ATФ. Эти конформации выполняют функции переносчиков натрия и калия. При расщеплении натрий-калиевой АТФазой молекулы ATФ, неорганический фосфат присоединяется к белку. В этом состоянии натрий-калиевая АТФаза связывает три иона натрия, которые выкачиваются из клетки. Затем молекула неорганического фосфата отсоединяется от насоса-белка, и насос превращается в переносчик калия. В результате два иона калия попадают в клетку. Таким образом, при расщеплении каждой молекулы ATФ, выкачиваются три иона натрия из клетки и два иона калия закачиваются в клетку. Один натрий-калиевый насос может перенести через мембрану 150- 600 ионов натрия в секунду. Следствием его работы является поддержание трансмембранных градиентов натрия и калия.
Через мембраны некоторых клеток животного (например, мышечных) осуществляется первично-активный транспорт ионов кальция из клетки (кальциевый насос), что приводит к наличию трансмембранного градиента указанных ионов.
Водородный ионный насос действует в мембране бактериальных клеток и в митохондриях, а также в клетках желудка, перемещающего водородные ионы из крови в его полость.

Вторично-активный транспорт

Существуют системы транспорта через мембраны, которые переносят вещества из области их низкой концентрации в область высокой концентрации без непосредственного расхода энергии метаболизма клетки (как в случае первично-активного транспорта). Такой вид транспорта называется вторично- активным транспортом .
Вторично-активный транспорт некоторого вещества возможен только тогда, когда он связан с транспортом другого вещества по его концентрационному или электрохимическому градиенту. Это симпортный или антипортный перенос веществ.
При симпорте двух веществ ион и другая молекула (или ион) связываются одновременно с одним переносчиком прежде, чем произойдёт конформационное изменение этого переносчика. Так как ведущее вещество перемещается по градиенту концентрации или электрохимическому градиенту, управляемое вещество вынуждено перемещаться против своего градиента.
Ионы натрия являются обычно ведущими веществами в системах симпорта клеток животного. Высокий электрохимический градиент этих ионов создаётся натрий-калиевым насосом. Управляемыми веществами являются сахара, аминокислоты и некоторые другие ионы. Например, при всасывании питательных веществ в желудочно-кишечном тракте глюкоза и аминокислоты поступают из клеток тонкой кишки в кровь путём симпорта с ионами натрия. После фильтрации первичной мочи в почечных гломерулах, эти вещества возвращаются в кровь той же системой вторично-активного транспорта.

Эндоцитоз и экзоцитоз

Макромолекулы - белки и нуклеиновые кислоты - не могут проникнуть через плазматическую мембрану с помощью механизмов транспорта, рассмотренных выше, из-за своих больших размеров. При трансмембранном транспорте больших молекул сама плазматическая мембрана подвергается согласованным перемещениям, вследствие которых часть жидкой внеклеточной поглощается ( эндоцитоз ) или часть внутренней среды клетки выделяется (экзоцитоз ).
В процессе эндоцитоза плазматическая мембрана окружает часть внешней среды, формируя вокруг неё оболочку, в результате чего образуется везикула, которая поступает внутрь клетки. При пиноцитозе образуются небольшие, заполненные жидкостью везикулы. В процессефагоцитоза формируются большие везикулы, которые содержат твердый материал, например, клетки бактерий.
При экзоцитозе транспортируемое вещество синтезируется в клетке, связывается мембраной в везикулы и экспортируется из клетки. Таким образом транспортируются из клетки специфические белки, нуклеиновые кислоты, нейромедиаторы и т. п.

Эксперимент: кнаружи поверхности мембраны облицеров. соли К⁺ Þ выход ионов К⁺ из клетки затруднен Þ величина ПП?

Результат: ампликация солей К⁺ к наружной поверхности мембраны приводит к снижению величины ПП, степень снижения оказалась пропорциональной концентрации К⁺ в облицеров. растворе.

Вывод: К⁺ имеет основное значение в генерации ПП.

Если удалить Na⁺ или изменить его концентрацию во внеклеточной жидкости, это не толко не снизит величину ПП, но даже приведет к небольшой дополнительной поляризации мембраны Na⁺ не играет существенной роли в генерации ПП.

Прямые определения концентрации К⁺ в клетке и окружающей среде показали хорошее соотношение с теоретически рассчитанными значениями ПП. После Бернштейна данные подтверждались.

Джерард и Фурузава, 1930 г. Работали на нервах краба в условиях гипоксии и апоксии (полное отсутствие О₂). ПП прогрессивно снижался и, наконец, исчез в нормальном целостном участке нерва.

Вывод: энергия, необходимая для генерации ПП берется из окислительных процессов.
Современная мембранная теория

Ходжкин и Хаксли разработали в 30х годах ХХ в., используя микроэлектродную технику на гигантских аксонах кальмара. ПП –50 мВ. При возбуждении генерации ПД амплитуда до 100 мВ.

С позиции теории Берштейна. При возбужедении растет проницаемость мембраны для всех ионов. При этом происходит перераспределение этих ионов в сторону выравнивания концентрации внутри и вне клетки, поэтому ПД = ПП (» –50 мВ) Þ кризис мембранной теории Берштейна.
Основные положения современной мембранной теории

1. Клеточные мембраны обладают избирательной проницаемостью не только к ионам состоянии К⁺, но и к Na⁺ и к другим.

2. Эти виды ионной проницаемости обнаруживают самостоятельную изменчивость в зависимости от функционального состояния клетки.

В мембране диэлектриком явлется липидная фаза (конденсатор), чтобы зарядить конденсатор до –75 мВ на 1 мм² должно находиться 5000 пар ионов. В генерации ПП участвует К⁺, концентрация внутри клетки в 20 раз выше Þ концентрационный градиент для внутрь клетки (так как во внеклеточной среде концентрация ионов Na⁺ в 5-15 раз больше, концентрация Сl^– вне клетки в 20-100 раз больше.

Чем больше проницаемость мембраны для иона, тем больше в клетку вносится данного иона.

Р К⁺: Р Na⁺: Р Сl^– = 1: 0, 04: 0, 045

Уравнение Гольдмана:

Em = RT/F * ln (P_К+*[К⁺]_out+ P_Na+*[Na⁺]_out+ P_Cl–*[Cl^–]_out)/(P_К+*[К⁺]_in+ P_Na+*[Na⁺]_in+ P_Cl–*[Cl^–]_in)
Потенцил Действия

1. Объясняется поворотом диполя на 180⁰.

2. Теория альтерации Германа. При возбуждении возникает избыток кислых продуктов, которые несут отрицательны заряд, что приводит к разности потенциалов между возбужденным и невозбужденым учаском.

3. Мембранная теория Берштейна. В возбужденном участке мембраны резко увеличивается проницаемость для всех ионов, концентрации ионов смешиваются и участок становится электронейтральным.

4. Ходжкин и Хаксли. Рост проницаемости мембраны для ионов в месте воздействия. При возбуждении электропроницаемость мембраны увеличивается примерно в 500 раз. Max увеличивается проницаемость мембраны для Na⁺ (отсюда Na-теория ПД). Na⁺ свободно проходит внуть клетки. При возбужедении электро-химическое равновесие определяется потенциалом Na⁺. Равновесный потенциал для К⁺ = –97 мВ, для Na⁺ = +50 мВ. При возбужедении мембрана перезаряжается. Положение обратной активации и инактивации Na⁺-каналов, Na⁺-канал может активироваться (открываться) при определенных значениях потенциала. Причина активации Na⁺-каналов – деполяризация мембраны, чем больше деполяризация, тем больше проницаемость мембраны для Na⁺. Зависимость близка к линейной в подкор уровне; как только мембрана достигнет критического уровня деполяризации – зависимость нелинейная, лавинообразный вход Na⁺ в клетку.

1). Для объяснения реполяризации используется положение об инактивации Na
⁺
-каналов. При приближении потенциала мембраны к равновесному для Na⁺, Na⁺-каналы инактивируются и посупление Na в клетку прекращается. К графику: в основе регенеративный процесс (сам себя поддерживающий), развивающийся по принципу обратной связи.

2). Рост К⁺ проницаемости мембраны. Не столь значителен, как для Na⁺ ( в 5-15 и 500 раз соответственно). Проницаемость для К⁺ развивается медленнее, чем для Na⁺. Ионы К⁺ в этой ситуации будут выходить наружу и выносить заряд.

3). Механизм активного транспорта, представленный K
-
Na
-насосом. 3 Na⁺ внутрь и 2 К⁺ наружу.

Эксперименты Ходжкина и Хаксли.

Гигантский аксон кальмара. Из внеклеточной среды были удалены 2/3 Na⁺. При этом амплитуда ПД снизилась » на 50%. Замена внутриклеточного Na⁺ на другие ионы приводит к некоторому росту ПД. Замена ½ внутриклеточного К⁺ на Na⁺ приводит к значительному снижению ПД.
Метод фиксации потенциала

метод Петч-Клемпинга. С его помощью можно зафиксировать на длительное время значение мембранного потенциала на любом желаемом уровне. Это делается с помощью внешнего генератора напряжения
Суммарные мембранные токи при ПД

1. Подпороговая область:

Слабое изменение мембранного потенциала, суммарный ионный ток направлен от клетки наружу, так как поток К⁺, выходящий из клетки, уже усиливается из-за удаления мембранного потенциала от равновесного потенциала для К⁺. Входящий ток Na⁺ еще слаб, так как рост Na⁺-проницаемости пока невелик. Однако с развитием деполяризации Na-ый поток постепенно нарастает.

2. Критический уровень деполяризации:

В этот момент суммарный ионный ток через мембрану равен нулю, так как встречные токи ионов Na⁺ и К⁺ уравновешивают друг друга. Даже небольшая дальнейшая деполяризация приводит к росту входа Na⁺-тока в сотни раз.

3. Во время фазы деполяризации резко увеличивается Na⁺-проницаемость и суммарный мембранный ток, направленный внутрь клетки. Выходящий К⁺-ток растет медленнее и становится заметным только к моменту пика потенциала.

4. Фаза реполяризации:

В момент пика потенциала большинство Na⁺-каналов инактивированны, а К⁺-ток max. Поэтому суммарный мембранный ток – выходящий.
Кальциевая теория активации и инактивации Na⁺-каналов

В состоянии покоя у наружного отверстия Na⁺-канала находится Са²⁺, который электростатически тормозит проникновение Na⁺ в канал. При возбуждении наружная поверхность мембраны заряжена отрицательно, при этом Са²⁺ уходят со своих мест, вход открывается и Na⁺ входит в клетки.

Инактивация: по ходу деполяризации узкие Na⁺-каналы могут закупориваться Na⁺. Во многих каналах есть воротные белки (могут менять свое местоположение под влиянием изменения потенциала). В состоянии покоя активационный белок закрыт, а инактивационный открыт. При возбуждении открывается активационный белок в момент закрывания инактивационного белка. В конце реполяризации белки так же закрываются и потом открываются (исходное состояние).
Передача возбуждения по нервным волокнам
В начале 30х годов ХХ в. Хилл. 1932 г. " Химическая волна проведения в нервах". Хилл использовал разные нервы, но преимущественно краба. Даже в состоянии покоя в единицу времени вырабатывается некоторое количество тепла. Это тепло было названо теплопродукция покоя. Когда в нервном волокне возбуждение – теплопродукция возбуждения (ТВ), она делится на 2 фазы:

1. Начальная ТВ, которая составляет 2-3% от всей ТВ и приходится непосредственно на период возбуждения.

2. Задержанная ТВ » 97% всей ТВ. Если подать серийный импульс на нерв краба, то задержанную ТВ можно зафиксировать в течение 25-30 минут. Возбуждения в тканях уже нет, но ТВ имеет место.

3. Утечка тепла при работе Na.

Хилл разрабтал чувствительную теплоэлектрическую методику, которая позволяла фиксировать теплообразование в течение 20 мс. Эксперименты при О⁰ С. Начальную фазу теплопродукции делили на 2 периода: позитивная и негативная начальная теплопродукция. При О⁰ С для нерва краба позитив в начальные 20 мс = 14 мк кал. В течение последующих 150 мс » 85% тепла поглощается нервной тканью обратно (12 мк кал).

Позитивная начальная теплопродукция: причина: химические процессы, обуславливающие изменение проницаемости мембраны. При возбуждении в клетку поступает Na⁺ и смешивается с К⁺ и наоборот. Должно образовываться тепло. Это тепло покрывает до 50% позитивной начальной теплопродукции.

Негативная начальная теплопродукция: химические реакции в этот период могут быть эндотермическими. Негативная теплопродукция не является обязательной.
Проведение возбуждения

В 1885 г. Герман предложил теорию малых токов. Осуществляется последовательно между участками волокна. В участке, соседнем с возбужденным будет наблюдаться выход электрического тока.

Кабельная теория нервного волокна: нервное волокно внутри содержит проводящую среду, оболочка невного волокна имеет слой, который плохо проводит возбуждение. Нервное волокно омывается внеклеточной жидкостью, которая проводит электрический ток.
Эквивалентная электрическая схема нервного волокна

В состоянии покоя внутриклеточная среда имеет избыточный отрицательный заряд. Сила тока меняется с расстоянием от возбужденного сегмента, декремента.
Факторы, определяющие скорость распространения возбуждения по нервному волокну

 

1. Тема 7:  Электрические и магнитные свойства тканей и окружающей среды.

2. Курс: первый семестр: первый

3. Продолжительность лекции: 1 час

4. Контингент слушателей: студенты

5. Учебная цель: изучение электрические и магнитные свойства тканей и окружающей среды

6. Иллюстративный материал и оснащение: интерактивная доска

7. Подробный план:

1) Процессы, происходящие в тканях под действием электрических токов и электромагнитных полей.

2) Частотная зависимость порогов ощутимого и неотпускающего токов. Пассивные электрические свойства тканей тела человека.  

3) Эквивалентные электрические схемы живых тканей. Полное сопротивление (импеданс) живых тканей, зависимость от частоты.

4) Электрический диполь. Электрическое поле диполя. Токовый диполь. Электрическое поле токового диполя в неограниченной проводящей среде.

5) Представление о дипольном эквивалентном электрическом генераторе сердца, головного мозга и мышц. Модель Эйнтховена. Генез электрокардиграмм в трех стандартных отведениях в рамках данной модели.

8. Методы контроля знаний и навыков: традиционные методы контроля.

9. Литература: см. в приложении.

 

                                        Конспект лекции

⇐ Предыдущая567891011121314Следующая ⇒

Поделиться:

Воспользуйтесь поиском по сайту: