 |
Клинико-диагностическое значение работы.
|
|
|
|
Определение мочевины имеет значение для диагностики заболеваний почек, печени и патологий, сопровождающихся повышенным катаболизмом белков. Повышенное содержание мочевины – один из главных признаков почечной недостаточности. Кроме того повышение уровня мочевины наблюдается при избыточном белковом питании и голодании (за счет распада тканевых белков). Главной причиной пониженного содержания мочевины являются патологические состояния, связанные с уменьшением клеточности паренхимы печени (снижение ее мочеобразующей функции) – гепатит, острая дистрофия и цирроз печени.
Работа № 1. Определение фенилмолочной кислоты в моче.
Принцип метода: При фенилкетонурии в моче больного появляется фенилмолочная кислота. Для ее обнаружения используется хлорид железа (III), с которым она образует комплекс серо-зеленого цвета.
Клинико-диагностическое значение работы.
Цветная реакция на фенилмолочную кислоту в моче является первичным скрининг-тестом на фенилкетонурию. По его результату проводиться дальнейшее обследование для уточнения диагноза.
Работа № 1. Определение мочевой кислоты в сыворотке крови.
Принцип метода: Мочевая кислота – это главный продукт обмена пуриновых нуклеиновых оснований. Определение мочевой кислоты основано на фотоколориметрическом определении окрашенных продуктов, образующихся при восстановлении фосфорно-молибденового реактива Фолина мочевой кислотой. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации мочевой кислоты.
Клинико-диагностическое значение работы.
Определение мочевой кислоты имеет особое значение для диагностики начальных стадий поражения почек и подагры. Повышенное содержание мочевой кислоты (гиперурикемия) может быть следствием нефритов и сморщивания почки (уменьшение выделения мочевой кислоты). Резкая гиперурикемия может быть причиной и признаком подагры. Повышенное содержание мочевой кислоты в крови и моче наблюдается при патологиях, связанных с усиленным распадом нуклеопротеидов: лейкозах, гемолитической желтухе, злокачественных опухолях, диабете и др. Повышенное содержание мочевой кислоты в сыворотке крови наблюдается при анемии и приеме некоторых лекарственных препаратов (салицилаты, атофан).
|
|
|
Работа № 1. определения общей активности креатинкиназы в сыворотке крови.
Принцип метода:
В ходе последовательных реакций происходит восстановление НАДФ:
1) Фосфокреатин + АДФ ← креатинкиназа → креатин + АТФ
2) АТФ + глюкоза ← гексокиназа → АДФ + глюкозо-6-фосфат
3) глюкозо-6-фосфат + НАДФ ← глюкозо-6-ф-дегидрогеназа → 6-фосфоглюконат + НАДФ•Н
Скорость восстановления НАДФ в НАДФ•Н пропорциональна активности креатинкиназы в пробе. Изменение концентрации НАДФ•Н определяют фотометрически на спектрофотометре при длине волны 340 нм. Фотометрирование против воздуха.
Температура инкубации: 25 ˚С.
Исследуемый материал: 1) сыворотка крови №1 контрольной крысы 2) сыворотка крови №2 крысы с искусственной ишемией мышечной ткани (лаборант за 10 минут до взятия крови у крысы перетягивает лапу).
Диагностическое значение: Креатинкиназа, именуемая также креатинфосфокиназой (АТФ: креатинфосфотрансфераза КФК, КК; КФ 2.7.3.2) представляет собой энзим, обратимо катализирующий фосфорилирование креатина при помощи АТФ:
Креатин + АТФ→АДФ + креатинфосфат.
Креатинкиназа (молекулярная масса 81 000 Д) играет важную роль в энергетическом обмене мышечной, нервной и других тканей. Наиболее богаты ею скелетная мускулатура, миокард, матка и мозг. Достаточно высокая активность фермента выявляется в щитовидной железе и легких. В остальных органах, в том числе в печени, а также в эритроцитах обнаруживаются лишь «следы» активности КК.
|
|
|
Молекула фермента имеет димерную структуру, при комбинации этих субъединиц образуется три изофермента: ММ — мышечный, ВВ — мозговой и MB — гибридный, содержащийся в большом количестве в сердечной мышце. В миокарде содержится два изофермента — MB и ММ, причем активность изофермента MB составляет около 25% от общей энзиматической активности. Разделение креатинкиназы на отдельные изоферменты осуществляют с помощью электрофореза.
Определение общей активности креатинкиназы и ее изоформ требуется в основном для диагностики миопатий, инфаркта миокарда, заболеваний центральной нервной системы.
Повышение активности КК может указывать на:
инфаркт миокарда (ММ, ВМ): рост активности начинается через 4—6 ч. после инфаркта, самая высокая активность отмечается через 18—30 ч. (превышение нормы в 5-10 раз), через 72 часа активность КК, как правило, нормализуется;
миодистрофии (При прогрессирующей мышечной дистрофии активность КФК может увеличиваться в 50 и более раз по сравнению с нормой), выраженные изменения при миодистрофии Дюшенна;
внутримышечные инъекции тетрациклина, некоторых пенициллинов, хлорпромазина, диазепама, др.антибиотиков, седативных средств;
полимиозит;
травма мышц (краш-синдром);
отравление стрихнином, окисью углерода;
состояние после операционного вмешательства;
травмы головы;
гипофункцию щитовидной железы (тироксин ингибирует креатинкиназу).
острую лучевую болезнь;
тяжелую физическую нагрузка.
Значения активности общей креатинкиназы в сыворотке крови (при 25˚С) у здоровых людей: мужчины - до 80 U/л, женщины - до 70 U/л, новорожденные (2-12 мес.) - до13б U/л, дети - до 94 U/л. Каталитическая концентрация КК сыворотки крови здоровых людей приходится в основном на изоферменты КК-ММ, доля КК-МВ в ней составляет лишь 1—3% от общей каталитической концентрации креатинкиназы.
|
|
|
