Особенности диагностики гонореи и бленнореи

Лекция № 5

Тема:

«Патогенные кокки»

Вопросы:

Общая характеристика группы патогенных кокков (стафилококки, стрептококки, нейссерии). Особенности устойчивости во внешней среде. Морфология и токсинообразование. Вызываемые заболевания. Основные методы лабораторной диагностики.

 

Пиогенные кокки

Таксономия. Для человека болезнетворными являются четыре рода пиогенных (гноеродных) кокков: Staphylo­coccus, Streptococcus, Neisseria и Peptostreptococcus, включаю­щий анаэробные виды стрептококков, которые иногда вы­деляются из гангренозных ран и крови при сепсисе.

Род стафилококков по наличию коагулазы подразделя­ют на две группы - коагулазоположительные (S. aureus) и коагулазоотрицательные (S. epidermidis и S. saprophyticus).

S. aureus отличается от родственных ему эпидермаль-ных и сапрофитических видов стафилококков образова­нием золотистого (аигеит) пигмента, а главное - более вы­сокой вирулентностью из-за наличия у него адгезинов, взаимодействующих с муцином слизистых оболочек и протеогликанами соединительной ткани, и мембраноток-синов, разрушающих эритроциты, клетки крови и тка­ней. Другими по значимости факторами вирулентности у S. aureus являются капсула и аллергены.

Стрептококки классифицируются по структуре С-по-лисахаридов в клеточной стенке на 17 групп, обозначав мых латинскими заглавными буквами от А до О. Внутри каждой из них выделяют серовары, отличающиеся М-. " и Т-антигенами. При этом заболевания у людей вызывают преимущественно стрептококки группы А, главным обра

зом S. pyogenes, основными факторами вирулентности ко­торого являются белок М, ингибирующий фагоцитарную реакцию и маскирующий его рецепторы к комплементу и антителам, и 3-гемолизин, вызывающий ярко выражен­ный гемолиз крови. Не имеющие групповых антигенов зе­ленящие стрептококки (S. viridans), продуцирующие ос-гемолизин, пневмококк (S. pneumoniae), в составе кото­рого насчитывают 84 серовара, энтерококки, или фекаль­ные стрептококки (S. faecalis, S. faecium), обитающие в кишечнике человека, выделяют в отдельные группы.

Менингококки по группоспецифическим полисахари­дам капсулы подразделяют на А, В, С, D, Н, I, К, L, X, Y, Z, 29Е и W135 серогруппы, внутри которых выделяют от­дельные серовары.

Антигенная структура гонококков тоже неоднородна. По составу белков клеточной стенки у них различают 16 сероваров.

Стафилококки и стрептококки были выделены в пос­ледней четверти 19 в. Р. Кохом, Л. Пастером, Ф. Розенба-хом, Т. Бильротом, гонококки - А. Нейссером, а менинго­кокки - А. Вейксельбаумом.

Клинические проявления гнойных инфекций. Стафи­лококки и стрептококки, обладая биологическим полит­ропизмом, вызывают воспалительные процессы кожи, подкожной клетчатки и слизистых оболочек (фурункулы, карбункулы, абсцессы, панариции, маститы, конъюнкти­виты, блефариты), костной системы (остеомиелиты), внутренних органов (пневмонии, аппендициты, пиело­нефриты, холециститы), воспаление твердой мозговой оболочки (менингиты), брюшины (перитониты), сепсис. Они осложняют течение гриппа, кори и других ин­фекционных заболеваний, вызывают послеоперационные и послеродовые нагноения. Вместе с тем стрептококк яв­ляется этиологическим фактором рожи, подострого септи­ческого эндокардита, возможно, скарлатины и ревматиз­ма. У гонококков и менингококков органотропность выра­жена резче. Так, менингококковая инфекция чаще всего проявляется как менингококконосительство, или назофа-Рингит, менингококкцемия, менингит, менингоэнцефа-^дит. Гонококк вызывает гонорею и бленнорею у новорож­денных, сопровождающиеся гнойными истечениями из Уретры и конъюнктивы глаз (gonos - семя, blennos -^Слизь, rheo - теку).

Эпидемиология. Большинство заболеваний, вызываемых патогенными кокками, неконтагиозны. Менингококковая инфекция, скарлатина, рожа, гонорея распростра­няются эпидемически. Источники инфекции - здоровые носители и больные люди. Механизмы передачи разнооб­разны, но преобладает воздушно-капельный. Исключение составляет гонорея, передающаяся от больного человека при половом контакте. Восприимчивость людей к гной­ным инфекциям неодинакова. Иммунитет отсутствует лишь к гонорее, в отношении других гнойных инфекций человек обладает высокой степенью резистентности.

Биологические особенности патогенных кокков. Мор­фология. Патогенные кокки имеют шаровидную (стафило­кокк), овальную (стрептококк) или бобовидную (менинго­кокк и гонококк) форму. Размеры их варьируют в среднем от 0,6 до 1 мкм. В мазках из культур стафилококки распо­лагаются преимущественно в виде гроздей винограда, стрептококки - цепочками (ланцетивидный пневмококк -парами), менингококки и гонококки - попарно или тетра­дами, в которых вогнутые стороны обращены внутрь. В препаратах, приготовленных из гноя, стафилококки и стрептококки относительно нейтрофилов располагаются обычно внеклеточно, а менингококки и гонококки - преи­мущественно интрацеллюлярно (эндоцитобиоз). Патоген­ные кокки формируют капсулу, наиболее выраженную у S. pneumoniae и менингококков. Спор и жгутиков не име­ют (исключение составляют энтерококки). По Граму ста­филококки и стрептококки окрашиваются положитель­но, менингококки и гонококки - отрицательно.

Условия культивирования. Патогенные кокки - фа­культативные анаэробы. Облигатными анаэробами явля­ются пептострептококки и некоторые разновидности зо­лотистого стафилококка. Оптимальной температурой рос­та для них является 37 °С, а рН среды - 7,2-7,6. Для культивирования стафилококка используются простые среды, остальные патогенные кокки выращиваются на МПБ и МПА, к которым прибавляются глюкоза, сыворотка, ас-цитическая жидкость, кровь.

Чистая культура стафилококков вырастает уже через сутки после посева. Стрептококки и нейссерии растут мед ленно, и полный цикл развития у них завершается чаще всего к концу 2-3 сут. На пластинчатом агаре колонии стафилококков круглые, выпуклые, с ровными краями, диаметром 1-4 мм, пигментированы в золотистый (S aureus), белый (S. epidermidis), лимонно-желтый (S saprophyticus) цвета. Пигменты стафилококка быстро образуются при хорошей аэрации на свету. На кровяном агаре вокруг колоний золотистого стафилококка образу­ется зона гемолиза.

Стрептококки на сахарном, сывороточном, асцитичес-ком питательных агарах дают мелкие (до 1 мм) мутные се­ровато-белые или бесцветные колонии; на кровяном агаре они у вирулентных стрептококков окружены четко выра­женной прозрачной зоной гемолиза (Р-гемолитические ва­рианты) или узкой мутно-зеленоватой каймой (а-гемоли-тические стрептококки). Невирулентный S. anhaemolyti-cus гемолиза не вызывает.

Менингококки и гонококки формируют на излюбленных для них средах точечные бесцветные колонии-росинки.

Характер роста пиогенных кокков на жидких средах то­же отличается. Так, стафилококк и менингококк вызыва­ют диффузное помутнение МПБ, иногда через 3-4 дня по­является пленка. Гонококк вызывает едва заметное помут­нение бульона, а стрептококк совсем не изменяет его проз­рачности, вырастая в виде зерен на стенках и дне пробирки.

Биохимические свойства. Грамположительные стафи­лококки и стрептококки обладают большим набором фер­ментов, чем грамотрицательные менингококки и гонокок­ки. Они расщепляют все углеводы короткого ряда Гисса и свертывают молоко, а стафилококки, кроме того, разжи­жают желатин, образуют индол, аммиак, сероводород, вос­станавливают нитраты в нитриты. Менингококки фермен­тируют глюкозу и мальтозу, гонококки - только глюкозу.

Токсины и факторы патогенности. Стафилококки и стрептококки продуцируют экзотоксины, обладающие свойствами лизировать эритроциты и оказывать цитотоксическое действие (а-, (3-, у- и 5-токсин у S. aureus и О-, S-стрептолизины - у стрептококков), разрушать фагоциты и нарушать водно-солевой баланс в клетках (лейкоциди-ны), вызывать некроз кожи (некротоксины) и смерть жи­вотных (летальные токсины). Штаммы стафилококка, по­ражающие кожные покровы у детей, выделяют эксфолиа-тины А и В, а вызывающие пищевые отравления - энтеро-токсины А, В, С₁_₂, D и Е. Стрептококки скарлатинозных больных продуцируют эритрогенные (пирогенные) токси­ны. Кроме экзотоксинов стафилококки и стрептококки об­разуют многие ферменты инвазивности (см. «Инфекция»)

Болезнетворные свойства менингококков и гонококков обусловлены эндотоксинами липополисахаридной приро­ды, IgA-протеазами, расщепляющими IgA, белками и по­лисахаридами их оболочек и капсул.

Идентификация кокков. Видовую принадлежность па­тогенных кокков устанавливают по морфолого-культу-ральным и биохимическим свойствам. Нередко прибегают к исследованию вирулентности и токсигенности. Высоковирулентными для белых мышей являются стафилокок­ки, стрептококки и особенно пневмококки, вызывающие сепсис. При внутрикожном введении кролику взвесей ста­филококков и стрептококков возникает местная воспалительная реакция, часто с некрозом (дермонекротическая проба). Вирулентность стафилококка определяется также по наличию гемолизинов и а-токсина, плазмокоагулазы и других ферментов агрессивности. К менингококку и гоно­кокку экспериментальные животные невосприимчивы. Выделенную культуру патогенных кокков необходимо ис­следовать на чувствительность к ряду антибиотиков. Осо­бенно важно получить антибиотикограмму для стафило­кокков, среди которых часто встречаются штаммы не только с высокой антибиотикоустойчивостью, но и с поли­резистентностью к различным сульфаниламидам. Фаготипировать можно только стафилококки. Для этого применяется типовой набор умеренных стафилококковых фа­гов. Серологический метод используется в диагностике го­нореи (РСК) и менингококковых инфекций (РП и РНГА).

 

Особенности диагностики гонореи и бленнореи

Материалами исследования при гонорее являются от­деляемое уретры, влагалища, шейки матки, предстатель­ной железы, сперма и моча, а при бленнорее - отделяемое конъюнктивы глаза.

Гной из уретры у мужчин получают после обработки наружного отверстия мочеиспускательного канала ват­ным тампоном, смоченным стерильным изотоническим раствором натрия хлорида, надавливая пальцем на зад­нюю стенку уретры. Материал из шейки матки извлекают тампоном с помощью зеркала Куско. Отделяемое конъюнк­тивы при бленнорее снимают ватным тампоном.

Мазки окрашивают щелочным раствором метиленово-го синего и по Граму. В гнойном содержимом мазка гоно­кокки располагаются в нейтрофилах в виде бобовидных диплококков, количество которых может достигать мно­гих десятков особей (см. рис. 57).

В связи с тем, что в исследуемом материале находится посторонняя микрофлора по морфологии сходная с гоно­кокками, применяют прямую и непрямую РИФ. При пря­мом методе мазки обрабатывают флюоресцирующими антителами против гонококков. При непрямой РИФ ис­пользуют сыворотку больного гонореей с последующим ис­пользованием флюоресцирующей антисыворотки человека.

Бактериологическое исследование проводят в тех случа­ях, когда гонококки в мазках не обнаруживают или нахо­дят нетипичные по размерам и форме особи в виде шаров и «пылинок», неодинаково красящихся по Граму (формы Аша). Ввиду быстрого отмирания гонококков вне организ­ма больных содержащий его материал транспортировке не подлежит. Засевать его на среду желательно сразу же после взятия и не раньше 1-2 дней после прекращения лечения больных, так как терапия антибиотиками резко снижает его жизнеспособность. Обычно используется агаризованная среда, содержащая гидролизат казеина или дрожжевой аутолизат и нативную сыворотку крупного рогатого скота. Процент высеваемости гонококка повышается на асцит-агаре Бейли или 2,5 %-ном МПА, приготовленном на кро­личьем мясе. Для подавления банальной микрофлоры к средам добавляют ристомицин и полимиксин М в дозах 10 ЕД/мл. Гонококки быстрее растут при помещении ча­шек Петри с посевами в эксикатор с 10 % -ным оксидом уг­лерода. Через сутки инкубации при температуре 37 °С на поверхности среды вырастают колонии, напоминающие ка­пельки росы (рис. 80). Об их принадлежности к гонококку судят по положительной оксидазной пробе - при нанесении 1 %-ного раствора хлористоводородного парадиэтилфени-лендиамина они розовеют. Для выделения чистой культу­ры и определения антибиотикочувствительности колонии гонококка пересевают на скошенный сывороточный агар.

При хронической гонорее, когда прекращается гноевы-Деление, ставят РСК, РНГА с сывороткой крови больного. В качестве антигена используют гонококковую вакцину диагностикум, приготовленный из убитых гонококков

12Следующая ⇒

Поделиться:

Воспользуйтесь поиском по сайту: