Особенности диагностики стрептококковых инфекций
⇐ ПредыдущаяСтр 2 из 2 Для исследования берут гной, отделяемое слизистых оболочек, мочу, фекалии, кровь, спинномозговую жидкость. В мазках, окрашенных по Граму, стрептококки располагаются короткими цепочками (см. рис. 9, б), часто попарно, поодиночно или небольшими группами, вследствие чего их трудно дифференцировать от стафилококков. Для выделения чистой культуры материалы высевают на пластинчатый сахарный и кровяной агар (кровяной агар Гарро с 0,2 мл 0,1 %-ного раствора генцианвиолета на 100 мл), на которых через сутки в термостате вырастают мелкие, плоские, суховатые колонии зернистой структуры (рис. 82) с наличием зоны гемолиза (S. pyogenes), зеленой каемки метгемоглобина вокруг них (S. viridans) или При засевах фекалий, пузырной Гемокультуру при сепсисе получают, засевая 5-10 мл крови в соотношениях 1: 10 на сахарный бульон, а также на среду Китта - Тароцци с целью выделения анаэробных пептострептококков. Через 24-48 ч инкубирования в термостате на дне флаконов появляется хлопьевидный придонный осадок, в котором при микроскопии мазков можно обнаружить длинные цепочки стрептококков. Для выявления гемотоксина культуру из бульона пересевают в чашку Петри с кровяным агаром. Для определения вирулентности стрептококка исследуют токсинообразование, в частности продукцию фибринолизина (стрептокиназы). Для этого к плазме крови человека, разведенной 1: 3, добавляют 0,5 мл 18-часовой культуры стрептококка и 0,5 мл 0,25 %-ного раствора кальция хлорида. Пробирки осторожно встряхивают и помещают на водяную баню при 42 °С. Выделяющие фибринолизин стрептококки растворяют образующийся сгусток фибрина в ближайшие 40-50 мин, реже - через 2 ч.
Серологическое обследование больных при стрептококковых инфекциях предполагает определение в крови стрептококкового антигена и титра специфических антител к О-стрептолизину. Стрептококковый антиген определяют при помощи РСК на холоде, используя антистрептококковую иммунную сыворотку, полученную путем гипериммунизации кроликов культурой стрептококка группы А. За титр антигена принимают наибольшее разведение исследуемой сыворотки, вызывающее задержку гемолиза не менее чем на «+». Определение 0-антистрептолизина, содержащегося в сыворотках больных, основано на его способности нейтрализовать гемолитическую активность 0-стрептолизина. Для этого делают кратные разведения сыворотки больного, прибавляя к ним О-стрептолизин (коммерческий препарат). Смеси выдерживают 15 мин в термостате при 37 °С, после чего во все пробирки вносят по 0,2 мл взвеси эритроцитов кролика. Пробирки вновь инкубируют в термостате в течение 1 ч и затем учитывают результаты. Титр 0-антистрепто-лизина в сыворотке выражают числом AEsto в 1 мл (Sto -международная единица стандарта 0-стрептолизина). При исследовании мокроты больных пневмонией, гнойных выделений из среднего уха и гайморовой полости, спинномозговой жидкости и крови при менингитах и сепсисе следует иметь в виду возможность выделения S. pneumoniae. Его основные свойства: имеет ланцетовидную форму и капсулу, окружающую две особи кокка; высоковирулентный для мышей; растворяется в желчи; расщепляет инулин.
Посев мокроты, гноя обычно положительного результата не дает, так как наличие в них большого количества сапрофитов и гнилостных бактерий подавляет рост стрептококков пневмонии. В таких случаях комочки мокроты эмульгируют в изотоническом растворе натрия хлорида и полученной взвесью внутрибрюшинно заражают белых мышей. Животные погибают через 18-72 ч от септицемии. Чистую культуру пневмококка выделяют посевом капельки крови из сердца, эмульсии внутренних органов и перитониаль-ной жидкости в чашку Петри с кровяным агаром и в пробирку с сывороточным бульоном. Для дифференциации от зеленящих стрептококков 1 мл бульонной культуры вносят в 0,5 мл бычьей желчи. Через 10-15 мин пребывания в термостате стрептококки пневмонии лизируются. При отсутствии лизиса определяют способность пневмококка ферментировать инулин.
Воспользуйтесь поиском по сайту: ![]() ©2015 - 2025 megalektsii.ru Все авторские права принадлежат авторам лекционных материалов. Обратная связь с нами...
|