 |
Контроль режима работы автоклава и сухожарового шкафа.
|
|
|
|
Стерилизация паром под давлением.
Лабораторную посуду перед стерилизацией необходимо тщательно вымыть, высушить, завернуть в бумагу. Чашки упаковывают в бумагу по одной или несколько штук. В верхние концы пипеток вставляют ватные тампоны, предупреждающие засасывание материала Градуированные пипетки заворачивают в длинные полоски бумаги шириной 5 см. На бумаге отмечают объем завернутой пипетки. В пеналах пипетки стерилизуют без дополнительного завертывания в бумагу.
Острые концы пастеровских пипеток запаивают в пламени горелки и заворачивают в бумагу по 3-5 штук.
Флаконы, колбы, пробирки закрывают ватно-марлевыми пробками. Пробка должна входить в горлышко сосуда на 2/3 длины, не слишком туго, но и не свободно. Поверх пробок на сосуд надевают бумажный колпачок. Пробирки связывают по 5-50 штук и обертывают поверх бумагой.
Контроль эффективности работы автоклава
Для контроля работы автоклава и режима стерилизации используют следующие методы:
1) физические - контактные манометры, установленные на автоклаве;
2) химические - различные химические вещества, имеющие определенную температуру плавления (бензойная кислота - 121°С, антипирин - 113°С, резорцин - 110°С);
3) бактериологические тесты. Пример: в пробирки с питательной средой засевают фильтровальную бумагу, зараженную спороносной культурой. 1-я пробирка («О») автоклавируется при оптимальном режиме, 2-я пробирка («К») не автоклавируется. Обе пробирки помещают в термостат при 37°С. Результаты регистрируют через 18-24 часа.
К работе № 2
Влияние химических факторов на микроорганизмы
Химические средства неспецифического действия, применяемые для обработки помещений, оборудования и различных предметов, обозначают термином «дезинфектанты», а вещества, используемые для обработки живых тканей -«антисептики».
|
|
|
Антисептики - антимикробные средства широкого спектра действия, оказывающие губительное или статическое влияние на микроорганизмы и обладающие высокой активностью. Антисептики должны сохранять активность в присутствии продуктов тканевого распада; не должно быть местного раздражающего фактора и угнетающего влияния на процессы заживления раны.
Антисептики подразделяются по механизму действия и по химической структуре:
1. Галогеносодержащие соединения (препараты йода и хлора). Взаимодействуют с микробными белками, что сопровождается их инактивацией и денатурацией.
2. Алкоголи или спирты (этанол, изопропанол и др.) вызывают обезвоживание, денатурацию белков и вымывание липидов из клеточной стенки.
3. Окислители (перекись водорода, калия перманганат) окисляют метаболиты и ферменты микроорганизмов, либо денатурируют белки.
4. Кислоты, щелочи и соли (борная, салициловая кислоты, раствор аммиака) диссоциируют при проникновении через клеточную оболочку и вызывают денатурацию белков цитоплазмы.
5. Соединения фенола (карболовая кислота, трикрезол) денатурируют белки и нарушают структуру клеточной стенки.
6. Альдегиды (формальдегид, лизоформ, цимизоль и т.д.) - за счет присоединения к аминогруппам белка происходит денатурация белка.
7. Красители (метиленовый синий, бриллиантовый зеленый) – избирательно окрашивают ткани и обладают бактерицидным действием, соединяясь с белком или пептидогликаном бактериальной клетки, приводят к развитию бактериостатического эффекта, а в высоких концентрациях – бактерицидного.
8. Производные нитрофурана (фурацилин) тормозят клеточное дыхание микроорганизмов, действуя на дегидрогеназы.
9. Детергенты (циригель, дегмицид) вызывают изменение проницаемости цитоплазматической мембраны.
|
|
|
К работе № 3
Микробный антагонизм. При посеве исследуемого материала или смеси микробов присутствие микробов-антагонистов обнаруживается по светлым зонам, окружающим их колонии. Эти зоны свидетельствуют о подавлении роста угнетаемого микроба, причем величина зоны угнетения определяет ту или иную степень активности антагониста. Механизмы микробного антагонизма: 1) разная скорость роста микроорганизмов; 2) синтез метаболитов: экзотоксинов и бактериоцинов.
Методика.
На чашку с МПА широкой полосой засевают суточную бульонную культуру E.coli М-17. Перпендикулярно посеву вплотную подсевают суточную бульонную культуру угнетаемого микроба (вибрион). Результат учитывают через сутки пребывания в термостате: рост угнетаемого микроба отступает от полосы, заселенной антагонистом.
Практическое значение антагонизма для медицины: 1) использование микробов-антагонистов для производства антибиотиков; 2) применение пробиотиков (эубиотиков) - бактериальных препаратов, содержащих живых антагонистически действующих микроорганизмы, для угнетения патогенных и условно-патогенных микробов и лечения нарушений нормального микробиоценоза кишечника (дисбактериоза): колибактерин, бифидумбактерин, лактобактерин, бификол и т.д.
Схема описания пробиотиков:
Название препарата ………………….
Классификационное положение: пробиотик
Действующее начало: метаболиты - бактериоцины
Получение: из живых представителей нормальной микрофлоры организма человека,
высушенных лиофильно
Применение: для лечения дисбактериоза, нормализации кишечного микробиоценоза
Способ применения: перорально
К работе № 4
Диагностические и лечебно-профилактические бактериофаги. Применяемые на практике препараты бактериофагов представляют собой фильтрат бульонной культуры соответствующих микробов, лизированных фагом, содержащий живые частицы фага, а также растворённые антигены бактерий, освободившиеся из бактериальных клеток при их лизисе. Полученный препарат - жидкий бактериофаг должен иметь вид совершенно прозрачной жидкости жёлтого цвета большей или меньшей интенсивности.
Для применения с лечебно-профилактическими целями фаги могут выпускаться в форме таблеток с кислотоустойчивой оболочкой. Таблетированный сухой фаг более стабилен при хранении и удобен при применении. Одна таблетка сухого бактериофага соответствует 20-25 мл жидкого препарата. Срок годности сухого и жидкого препарата - 1 год. Жидкий бактериофаг следует хранить при температуре + 2 +10 С, сухой- не выше +1°С, но его можно хранить в холодильнике и при отрицательной температуре.
|
|
|
Принятый внутрь бактериофаг сохраняется в организме в течение 5-7 дней. Как правило, прием бактериофага не сопровождается какими-либо реакциями или осложнениями. Противопоказаний к приёму нет. Применяются в виде орошений, полосканий, примочек, тампонов, инъекций, а также вводят в полости - брюшную, плевральную, суставную и в мочевой пузырь, в зависимости от места локализации возбудителя.
Диагностические фаги выпускаются как в жидкой, так и сухой форме в ампулах. Перед началом работы сухой бактериофаг разводится. Если на ампулах указан титр, тр, ДРТ (доза рабочего титра) применяют в реакции фаголизабельности ( метод Отто) для идентификации бактерий, если указан тип фага, то для фаготипирования – определения источника инфекции.
|
|
|
