Главная | Обратная связь
МегаЛекции

Количественное определение





Для количественного определения изолирование синильной кислоты проводят из отдельной навески биоматериала.

В полноте отгонки синильной кислоты убеждаются по отрицательному результату реакции образования берлинской лазури в последней порции дистиллята.

Объемный метод

Для анализа берут 20-25 мл фильтрата, помещают в коническую колбу, добавляют 5 мл 6н азотной кислоты, 1 мл индикатора (насыщенный раствор железоаммонийных квасцов в воде (~40%)) и избыток нитрата серебра оттитровывают 0,1н (или 0,01н) раствором роданида аммония. После первого заметного изменения цвета (переход в оранжево-красный) титрование ведут очень осторожно, при сильном перемешивании жидкости, до появления коричневого оттенка, не исчезающего при сильном перемешивании жидкости в течение 5 минут.

Поправка на индикатор равна 0,01 мл 0,1н раствора AgNO3.

Расчет ведут по формуле:

где Х – количество HCN в мг;

а – количетво (мл)0,1н раствора AgNO3, взятого для осаждения;

в – количество (мл) 0,1н раствора роданида аммония, израсходованного для титрования;

К1 и К2 – коэффициенты поправок для 0,1н раствора AgNO3 и NH4CNS;

0,027 –количество (мг) HCN, соответствующее 1 мл 0,1н раствора AgNO3;

V – первоначальный объем раствора;

V1- объем раствора AgNO3, взятый для титрования;

n – навеска исследуемого материала (г).

Метод применим при исследовании свежего биологического материала.

Весовой метод

Производят отгонку синильной кислоты из объекта. Полученный после отгонки раствор подкисляют азотной кислотой до ясно кислой реакции по лакмусу, дают осадку отстояться и осадок количественно переносят на небольшой гладкий фильтр.

Если осадок серого или темного цвета, его прямо на фильтре обрабатывают 5-6мл 6н раствора аммиака (для растворения AgCN). Фильтрат подкисляют избыточным количеством 6н HNO3 и выделившийся осадок цианида серебра вновь отфильтровывают.

Осадок AgCN промывают дистиллированной водой и высушивают вместе с фильтратом; фильтр затем сжигают и осадок прокаливают во взвешенном фарфоровом тигле до постоянного веса. Остаток металлического серебра взвешивают и пересчитывают на HCN.



Формула расчета:

где Х – количество исследуемого вещества в мг;

а – вес весовой формы в мг;

F – коэффициент пересчета, равный для HCN (по Ag) 0,2505;

n – навеска исследуемого вещества.

Метод применим к исследованию как свежего, так и загнившего биологического материала животного происхождения.

 

Качественное определение

Произвести наружный осмотр дистиллятов (внешний вид, запах, наличие капель, маслянистой пленки на поверхности).

Исследовать первый дистиллят на наличие синильной кислоты. 1 мл исследуемого раствора подщелачивают 5% раствором гидроксида натрия и туда же добавляют 1-3 капли 40% раствора сульфата железа (II), содержащего следы сульфата железа (III). Смесь взбалтывают, нагревают почти до кипения, а затем охлаждают до комнатной температуры и по каплям добавляют 10% раствор соляной кислоты до слабокислой реакции (рН 3-4). Появление синего осадка или синей окраски указывают на наличие синильной кислоты.

Хлороформ

Исследовать второй дистиллят на наличие хлороформа и хлоралгидрата по реакциям отщепления хлора, реакции Фудживара и пробы с реактивом Несслера.

Реакция отщепления хлора.

В пробирку вносят 1-2 мл исследуемого раствора и 1 мл 10% спиртового раствора гидроксида натрия. Пробирку осторожно нагревают в течение 3-5 мин. После охлаждения раствора его подкисляют 10% раствором азотной кислоты до кислой реакции (рН 3-4) и прибавляют 0,5 мл 1% раствора нитрата серебра. Появляется белый осадок, растворимый в растворе аммиака. Параллельно проводят пробу в тех же условиях с 1 мл исследуемого раствора и гидроксидом натрия, но без нагревания (для исключения ионов хлора в исследуемом растворе).

Реакция Фудживара.

К 2-3 мл исследуемого раствора прибавляют 2 мл свежеперегнанного пиридина и 2 мл 10% раствора гидроксида натрия. Смесь нагревают на водяной бане 2-3 минуты, появляется красная окраска.

Хлоралгидрат

Проба с реактивом Несслера.

К нескольким каплям исследуемого раствора прибавляют 2-3 капли реактива Несслера и взбалтывают жидкость. Образуется кирпично-красный осадок, постепенно меняющий цвет на грязно-зеленый.

Формальдегид

Реакция с резорцином в щелочной среде.

В пробирку вносят 1 мл исследуемого раствора и 1 мл свежеприготовленного 1% раствора резорцина в I0% растворе гидроксида натрия (готовится перед употреблением, 1 мл 10% раствора гидроксида натрия добавляют 1 кап. 10% ра­створа резорцина) нагревают 3-5 мин. на водяной бане. Появляет­ся розовая или малиновая окраска.

Реакция не специфична (дают галогенпроизводные и др.), имеет отрицательное судебно-химическое значение.

Чувствительность реакции 0,03 мкг.

Реакция с реактивом Фелинга.

В пробирку вносят 1 мл исследуемого раствора, прибавляют 1-2 кап. 10% раствора гидроксида натрия до щелочной реакции (по лакмусу), а затеи добавляют 2-3 кап. реактива Фелинга (готовится перед употреблением путей смеши­вания равных количеств растворов Фелинга №1 и №2). Жидкость сильно взбалтывают и нагревают. При охлаждении на дне пробир­ки виден желтый или красный осадок оксида меди /I/.

Реакция не специфична (дают галогенопроизводные и другие), имеет отрицательное судебно-химическое значение.

Реакция с фуксинсернистой кислотой (реактив Шиффа).

В пробирку или в фарфоровую чашку вно­сят 1 мл исследуемого раствора и 2-3 кап.концентрированной сер­ной кислоты, взбалтывают, охлаждают и добавляют 1 мл раствора фуксинсернистой кислоты. Появляется сине- или красно-фиолетовая окраска, иногда не сразу, а через 10-15 мин.

Реакция с кодеином и концентрированной серной кислотой.

В фарфоровую чашку вносят 1 мл иссле­дуемого раствора и 5 мл концентрированной серной кислоты. После охлаждения жидкости прибавляют несколько кристаллов кодеина, через 5-10 мин. появляется сине- или красно-фиолетовая окраска.

Реакция специфична, имеет положительное судебно-химическое значение.

Чувствительность реакции 0,02 мхг.

Реакция с хромотроповой кислотой (1,8-диоксинафталин-3,6—дисульфокислота) в присутствии конц.серной кислоты.

В пробирку вносят 1 мл исследуемого раствора и 0,2 мл 1% раствора хромотроповой кислоты в концент­рированном серной кислоте, а затем прибавляют 5 мл концентриро­ванном серной кислоты и взбалтывают. Наблюдается фиолетовая или красно-фиолетовая окраска.

Реакция специфична, имеет положительное судебно-химическое значение. Чувствительность реакции I мкг.

Реакция восстановления ионов серебра.

В хорошо очищенную от жира пробирку вносят 5 кап.1% раствора нитрата серебра и по каплям добавляют 10% раствор аммиака до растворения образовавшегося осадка гидроксида серебра. К порученному раствору прибавляют 1 мл исследу­емого раствора и осторожно нагревают. На стенках пробирки появляется "серебряное зеркало". Нагревание пробирки должно быть умеренным, т.к. при высокой температуре зеркальный налет не об­разуется, а выпадает бурш осадок серебра.

Реакция не специфична, имеет отрицательное судебно-химическое значение.

Чувствительность реакции - сотые доли микрограмма.

Результаты исследований занести в рабочий журнал.

По окончании исследования дать судебно-химическую оценку полученным результатам и составить акт судебно-химического исследования по прилагаемому образцу.

 

Метиловый спирт

Реакция этерификации (образование метилсалицилата).

В пробирку вносят 1 мл исследуемого раствора, прибавляют 0,05 г салициловой кислоты и 2 мл конц. серной кислоты, смесь осторожно нагревает. Раствор охлаждают до комнатной температуры, при этом ощущается запах метилового эфира салициловой кислоты.

Чувствительность реакции 0,3 мг.

Реакция окисления до формальдегида и обнаружение последнего реакциями окрашивания.

К 5 мл исследуемого раствора добавляет 2-3 мл 10% раствора серной кислоты и жидкость охлаждают льдом. Затем по каплям добавляют 1% раствор перманганата калия до сох­раняющейся светло-розовой окраски (избегать большого избытка!). Через 15-20 мин. для обесцвечивания избытка перманганата калия добавляют кристаллическую щавелевую кислоту, жидкость делят на 2 части и проделывают реакции:

А) с кодеином в серной кислоте,

Б) с фуксинсернистой кислотой.

Чувствительность обеих реакций 0,1 мг.

Предварительная проба на метанол в биологической жидкости (моча).

К 1 мл мочи прибавляют 1 мл 10% раст­вора дихромата калия в 50% растворе серной кислоты. Появляется зеленая окраска в течение 10-45 сек. (предел обнаружения 75 мг% спирта). При нагревании реакционной смеси на водяной бане пре­дел обнаружения 20 мг%.

Реакция не специфична для метанола и имеет отрицательное судебно-химическое значение.

Этиловый спирт

Реакция этерификации (образование этилацетата).

В пробирку вносят 1 мл исследуемого раствора и 0,1 г высушенного ацетата натрия, затем осторожно по каплям прибавляет 2 мл концентрированной серной кислоты. Смесь нагревают до выделения пузырьков газа. После охлаждения пробир­ки ощущается запах этилацетата, который появляется более отчет­ливо, если содержимое пробирки вылить в 20-25 кратный объем во­ды.

Чувствительность реакции 15-20 мг.

Реакция окисления (образование ацетальдегида).

К 1 мл исследуемого раствора прибавля­ют 10% раствор серной кислоты до кислой реакции. К этой смеси по каплям прибавляют 10% раствор дихромата калия до оранжево-красной окраски. Смесь оставляют на несколько минут при ком­натной температуре. Появляется запах ацетальдегида.

Реакция образования йодоформа.

К 1 мл исследуемого раствора добавляют 2 мл 5% раствора гидроксида натрия, а затем по каплям 1% раствор йода в 2% растворе йодида калия до сохраняющейся слабо-желтой окраски. Смесь нагревают несколько минут на водяном бане /50°/, при этом ощущается запах йодоформа. При охлаждении раствора об­разуются кристаллы йодоформа в виде шестиугольников и звездочек (рассмотреть под микроскопом и зарисовать).

Изоамиловый спирт

Реакция этерификации (образование изоамилацетата).

К остатку в фарфоровой чашке прибавляет 2 кап. конц. серной кислоты и несколько крупинок ацетата натрия. При слабом нагревании ощущается запах грушевой эссенции, кото­рый становится более выраженным при разбавлении реакционной сме­си водой.

Реакция окисления (образование изовалерианового альдегида).

Остаток с фарфоровой чашки смывают в пробирку с помощью эфира, который затем упаривают досуха. К ос­татку в пробирке прибавляют 5 кап. концентрированного раствора перманганата калия и такой же объем концентрированной серной кислоты. Пробирку нагревают на кипящей водяной бане 1-2 мин. Появляется ароматный запах изовалерианового альдегида, при сто­янии переходящий в неприятный запах изовалериановой кислоты (запах "гнилого сыра").

Реакция Комаровского с ароматическими альдегидами (на выс­шие старта, содержащие более 3 атомов углерода).

А) реакция с салициловым альдегидом

К остатку в фарфоровой чашке после ис­парения эфира прибавляют 1 мл 1% раствора салицилового альдегида в этаноле и 3 мл концентрированной серной кислоты. После охлаж­дения содержимого чашки ее помещают на. 3 мин. на кипящую водяную баню. Появляется розово-красная окраска.

Б) реакция с п-диметиламинобензальдегидом

В фарфоровой чашке на остаток после ис­парения эфира наносят 5-10 кап, 5% растворе п-диметиламинобензальдегида в концентрированной серной кислоте. Появляется темно-красное окрашивание, переходящее при разбавлении водой в фиолетовое.

Ацетон

Реакция образования йодоформа.

К 1 мл исследуемого раствора прибавля­ют 1 мл 10% раствора аммиака и несколько капель раствора йода в йодиде калия. Образуется желтый осадок йодоформа.

Реакция с нитропруссидом натрия.

К 1 мл исследуемого раствора прибавля­ют 1 мл 10% раствора гидроксида натрия и 5 кап. свежеприготов­ленного 1% раствора нитропруссида натрия. Появляется оранжево-красное окрашивание, переходящее при добавлении 10% раствора уксусной кислоты в красно-фиолетовое или вишнево-красное.

Реакция о фурфролом.

К 1 мл исследуемого раствора прибавля­ют 5 кап, 1% раствора фурфурола в этаноле и 3 кап. 10% раствора гидроксида натрия. Через 3-5 мин. к этой жидкости добавляют 10-12 кап. концентрированной соляной кислоты. Появляется крае­вая окраска.

Фенол

Реакция с бромной водой (образование трибромфенола).

К 0,5-1,0 мл исследуемого раствора прибавляют 3-5 кап. бромной воды. Образуется желтовато-белый оса­док трибромфенола.

Реакция образования индофенола.

К 0,5-7,0 мл исследуемого раствора прибавляют 1 кап. анилина и 2 мл раствора гипохлорита натрия. По­является грязно-фиолетовая окраска, после прибавления раствора аммиака переходящая в синюю (щелочная соль индофенола).

Реакция с хлоридом окисного железа.

1-2 кап. раствора помещают на фарфо­ровую пластинку и прибавляют 1-2 кап. свежеприготовленного 5% раствора хлорида железа (Ш). Появляется сине-фиолетовая окрас­ка, исчезающая от добавления воды, спирта и кислот (отличие от салициловой кислоты).

Уксусная кислота

Реакция с хлоридом окисного железа.

К 2-3 мл исследуемого раствора, внесен­ным в пробирку, добавляют 1 кап. 5% свежеприготовленного раство­ра хлорида железа (Ш). Появляется красная окраска. При нагрева­нии окрашенного раствора происходит гидролиз, в результате ко­торого выпадает бурый осадок.

Реакция этерификации (образование этилацетата).

В пробирку вносят 3-5 мл исследуемого раствора и выпаривают досуха. К сухому остатку прибавляют 1 мл этанола и 2 мл концентрированной серной кислоты, а затем смесь осторожно нагревают. Появляется специфический запах этилацетата.

Реакция образования индиго.

Около половины дистиллята вносят в про­бирку и выпаривают досуха. К сухому остатку прибавляют смесь равных количеств оксида кальция и карбоната кальция. Отверстие пробирки накрывают фильтровальном бумагой, смоченной свежепри­готовленным раствором о-нитробензальдегида в 5% растворе гидроксида натрия. Затем пробирку нагревают до прокаливания ее содер­жимого. На бумаге появляется синее пятно (окраска индиго).

Этиленгликоль

Реакция окисления периодатом калия в обнаружение образовав­шегося формальдегида реакцией с фуксинсернистой кисло­той.

К 3-5 мл дистиллята прибавляют 5 кап. раствора серной кислоты, 5 кап. 5% раствора перйодата калия в 5% растворе серной кислоты и взбалтывают. Через 5 мин. прибав­ляют 3-5 кап. раствора сернистой кислоты (для связывания избыт­ка йодат- и перйодат-ионов), а затем 4 кап. раствора фуксинсернистой кислоты. Появляется красно-фиолетовое или розовое окра­шивание.

Реакция с сульфатом меди (голубое окрашивание раствора).

К 2-3 мл исследуемого раствора прибав­ляют 1-2 мл 10% раствора гидроксида натрия и несколько капель 10% раствора сульфата меди. Появляется голубая окраска.

 

АКТ

Химико-токсикологического исследования № 1

На основании направления кафедры фармацевтической химии и фармакогнозии Нижегородской медицинской академии от (дата) мною, студентом (номер группы, ФИО) (дата начала исследования) на кафедре фармацевтической химии и фармакогнозии Нижегородской медицинской академии начато судебно-химическое исследование внутренних органов (печень) трупа гражданина Х с целью обнаружения ядовитых и сильнодействующих веществ, изолируемых перегонкой с водяным паром.

Обстоятельства дела: неизвестны, письменных сопроводительных документов не поступало.

Наружный осмотр: на исследование поступил объект (описание тары, укупорки и надписей). Содержимое склянки представляет собой кусочки печени весом (указать вес), (цвет, запах, наличие инородных включений, рН, консервация).

Химическое исследование: содержимое банки 100 г печени измельчили, смешали с дистиллированной водой до кашицеобразного состояния (и далее методика проведения дистилляции с указанием количества и объема дистиллятов, отметить характерный вид и запах дистиллятов, если они имеются).

Исследование первого дистиллята: (методика и результаты исследования).

Исследование второго дистиллята: (методики и результаты исследований).

Заключение: на основании проведенного судебно-химического исследования внутренних органов (печень) трупа гражданина Х, направленных с кафедры фармацевтической химии и фармакогнозии Нижегородской медицинской академии (дата отправления) с целью обнаружения ядовитых и сильнодействующих веществ, изолируемых из биологического материала дистилляцией с водяным паром найдены (не найдены) (перечисляются все вещества, на которые производилось исследование).

 

Анализ проводил ФИО (подпись)

_(дата составления акта)_

 

ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОПРОВЕРКИ

1. Какие вещества могут быть отнесены к группе «летучих» ядов?

2. Какие группы органических веществ и какие именно вещества при ХТА изолируются дистилляцией с водяным паром?

3. Почему при дистилляции паром биоматериал подкисляют слабой органической кислотой?

4. Почему первый дистиллят собирают в раствор едкой щелочи?

5. В чем преимущество реакции образования берлинской лазури перед другими качественными реакциями обнаружения синильной кислоты?

6. На чем основан метод количественного определения синильной кислоты?

7. Почему объемный метод неприменим при исследовании гнилостного биоматериала?

 

ЛИТЕРАТУРА

1. Крамаренко В. Ф. Токсилогическая химия. – Киев: Вища школа, 1989.

2. Белова А.В. Руководство к практическим занятиям по токсикологической химии. – М.: «Медициа», 1976.

3. Швайкова М.Д. Токсикологическая химия. – М.: «Медицина», 1975.

4. Токсикологическая химия: учебник для вузов / под ред. Т.В.Плетеневой.- 2-е изд., М.: 2005. – 512с.


 





Рекомендуемые страницы:

Воспользуйтесь поиском по сайту:
©2015- 2019 megalektsii.ru Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав.