Диагностика губкообразной энцефалопатии крупного рогатого скота.

Установление диагноза на губкообразную энцефалопатию крупного рогатого скота включает:

- изучение клинических признаков;

- изучение эпизоотологической ситуации;

- проведение патогистологических исследований;

- проведение электронно-микроскопического исследования;

- проведение иммунохимических исследований (иммуноблотинг);

- проведение биопробы на лабораторных животных.

Для диагностических исследований в специализированную лабораторию по изучению губкообразной энцефалопатии крупного рогатого скота посылают:

-мозг крупного рогатого скота после исследования на бешенство и другие вирусные инфекции после неподтверждения диагноза;

-мозг крупного рогатого скота из мясокомбинатов (0,01% от забитых животных старше 3-х лет).

Порядок отбора проб мозга для диагностических исследований. Диагностика губкообразной энцефалопатии крупного рогатого скота проводится только после гибели или вынужденного убоя животных. В этой связи важным условием является правильный отбор проб, их фиксация, транспортировка и хранение.

Патологический материал (головной мозг) берут от животных с клиническими признаками поражения центральной нервной системы). При этом мозг для гистологических, электронно-микроскопических и иммунохимических исследований необходимо брать у животных сразу после их убоя или гибели до наступления лизиса тканей или размножения другой сопутствующей микрофлоры.

Животных с клиническими признаками губкообразной энцефалопатии умерщвляют различными способами: введением избыточной дозы барбитурата – 2-3 г барбамила (в растворе), внутримышечным введением 1-2 г гемоспоридина (в растворе), 20-30 мл 25% раствора сернокислой магнезии транстаракально в области сердца.

Голову отделяют от шеи по атланто-затылочному сочленению. Труп животного сбрасывают в забетонированную яму Беккари глубиной не менее 3-х метров и засыпают хлорной известью. Наиболее эффективным способом утилизации трупов является их сжигание. Отделенную от трупа голову упаковывают в металлическую пленку, помещают в металлический контейнер, желательно со льдом, транспортируют при температуре +2 +15^оС в ветеринарную лабораторию или специализированную лабораторию по изучению губкообразной энцефалопатии крупного рогатого скота. Работу выполняют с соблюдением Санитарных правил 1.2.011 от 04.05.1994 г. РФ “Безопасность работы с микроорганизмами 1 и 2 групп патогенности”. При проведении работ по отделению, упаковке и транспортировке головы, а также при закапывании или сжигании трупа животного необходимо исключить травмирование рук и попадание брызг крови на кожу. Чтобы избежать этого, надевают халат, прорезиненный фартук, анатомические перчатки из плотной резины, резиновые сапоги, водонепроницаемый капюшон и защитную маску из оргстекла, закрывающую лицо от брызг крови. По окончании работ инструменты, которыми проводили отделение головы, укладываются стерилизатор с 2% раствором гипохлорита натрия не менее чем на 1 час (инструменты должны быть погружены в раствор полностью). Сапоги, фартук, капюшон, маску и перчатки также обрабатывают с 2% раствором гипохлорита натрия. Халаты обрабатывают автоклавированием при 134-138^оС в течение 20-30 минут. Горючие отходы сжигают.

Голова должна быть доставлена в исследовательскую лабораторию в течение 12-36 часов, поскольку в результате размножения микроорганизмов в тканях мозга или автолиза мозг становится непригодным для гистологического исследования. Замороженный при транспортировке или при хранении в холодильнике мозг также непригоден для проведения анализа, т.к. в результате замораживания возникают артефакты, мешающие диагностике. При длительной транспортировке или в жаркую погоду целесообразно в контейнер положить лед.

Сразу после доставки в исследовательскую лабораторию с дорсальной части головы крупного рогатого скота удаляют кожу. Имеется два способа извлечения головного мозга из черепной коробки (Рис.1). При первом способе голову зажимают в тиски, а при втором – проводят ручную фиксацию на столе на листе бумаги, который ложится для предотвращения скольжения. После фиксации осторожно, чтобы не повредить мозг, распиливают лобную кость с помощью анатомической пилы. Затем производят надрезы лобной кости с каждой стороны от точек, находящихся на оси глазных ям, продлевая их каудально до наружных слуховых проходов. Продлевают эти разрезы каудально до большого затылочного отверстия также осторожно, чтобы исключить повреждение мозга. Делают сагитальный разрез посредине лобной и затылочной костей до большого затылочного отверстия. Затем разделяют и удаляют распиленные левую и правую части черепной коробки. Рассекают и снимают твердую мозговую оболочку. Затем необходимо перевернуть голову, чтобы под действием силы тяжести мозг отделился от основания черепа. Продолжить работу, продвигаясь от каудального надреза вперед; для перерезания нервов вентральной стороны черепа использовать скальпель. После извлечения мозга его целиком необходимо поместить в фиксирующий раствор или путем фиксации несплошных разрезов мозга на пластины (Рис.2,3).

 

Рисунок 1. Схема распилов черепа крупного рогатого скота

 

Рисунок 2. Схема участков головного мозга животных

 

Рисунок 3. Схема разрезов головного мозга

Примечание:

Ромбовидный мозг:

I – срез продолговатого мозга на уровне верхнего отдела;

II – срез стволовой части на границе продолговатого мозга и варолиевого моста;

III – срез варолиевого моста на кровне начала верхних ножек мозжечка.

Средний мозг:

IV – срез четверохолмия на уровне появления красных ядер.

Промежуточный мозг:

V – срез в области эпиталамуса на уровне раскрытия сильвиева водопровода в III желудочек мозга;

VI – срез в области таламуса на уровне эпителиальных бугров и залегающих в них ядер;

VII – срез в области гипоталамуса на уровневые воронки.

Концевой мозг:

VIII – срез бокового желудочка на уровне головки хвостатого ядра;

IX, Х– срезы полушарий большого мозга в области моторных полей туловища, грудных и тазовых конечностей.

 

Для фиксации мозга целиком готовят фиксирующий раствор по следующей прописи:

№№ п/п	Наименование компонентов	Химическая формула	Количество
	Однозамещенный фосфат натрия, моногидрат	NaH2PO4 .H2O	4,0
	Двузамещенный фосфат натрия, безводный	Na2HPO4	6,5
	Формалин	40% НСНО	100,0
	Дистиллированная вода		900,0

 

Растворить соли в воде, добавить формалин и размешать, При этом рН раствора должен быть нейтральным, около 7,0.

Фиксация мозга путем использования несплошных поперечных разрезов.

Учитывая особенность проявления губкообразной энцефалопатии (отечность и расплавление нейроглии), фиксация мозга должна быть экстренная и жесткая, позволяющая исключить артрефакты и обеспечить максимально достоверную диагностику.

Для достижения этого на извлеченном головном мозге необходимо сделать несплошные поперечные разрезы в виде пластин толщиной 5-8 мм. Более толстые пластины делать нельзя, т.к. формалин проникает и фиксирует ткани только на толщину не более 8 мм. Между пластинами ткани проложить гигроскопический материал (вату, марлю, фильтровальную бумагу)

Для фиксации головного мозга, разрезанного на прордольные полосы рекомендуется использовать 15-20% раствор нейтрального формалина (150-200 мл формалина и 800 – 850 мл воды, параформа – соответсвенно в 2,5 раза меньше. Срок фиксации – 3-4 суток.

Зафиксированный мозг помещают в ударопрочную емкость, при этом объем фиксирующего раствора должен быть в 10 раз больше объема мозга. В таком виде материал должен храниться не менее 2 недель, после чего его необходимо доставить в диагностическую лабораторию.

Патогномоничными для губкоообразной энцефалопатии крупного рогатого скота являются следующие критерии (рис.4-7):

- диффузная вакуолизация и расплавление нейроглии (в виде множественных разной формы и величины сот) (рис.4, 5):

- каогуляция цитоплазмы в нейронах, проявляющаяся в виде плотного сгустка с повышенной оксифильностью (красного цвета);

- наличие пикноза, рексиса и частичного лизиса ядер нейронов, иногда криброза цитоплазмы (множественные мелкие вакуоли)(рис.6);

- гипертрофия эндотелия кровеносных сосудов я вялениями кариопикноза и репсиса);

- наличие периваскулярных круглоклеточных астроцитных и макрофагальных элементов типа негнойного энцефалита (напоминающие “висна” у овец);

- явления вакуолизации нейронов (перстневидные клетки) встречаются редко и слабо выражены, тогда как у “скрепи” овец это более выражено;

- наличие вокруг нейронов явлений отека и вакуолизации.

Рисунок 4.

Рисунок 5

Рисунок 6.

Подтвержденным на для губкоообразную энцефалопатию крупного рогатого скота диагноз следует считать только на основании комплексного анализа эпизоотологических, клинико-анатомических и патогистологических исследований. При этом следует сравнивать гистопрепараты отделов головного мозга, полученных от заведомо здоровых животных (контроль).

Сомнительным считается диагноз при наличии ассиметричных признаков вакуолизации в нейроглии или в нейронном околоядерном пространстве.

Отрицательный диагноз ставится в случае отсутствия гистологических изменений в основных участках головного мозга, необходимых для диагностики, а при подозрении и остальных участков мозга.

Примечание: В настоящее время в странах мира применяются следующие методы иммунологической диагностики губкообразной энцефалопатии:

иммуноблотинг (тест-система «Прионикс-Чек»),

-иммуноферментный анализ (тест-система «Биорад»);

-иммунолюминисцентный методы (тест-система «Прионикс-Лиа»);

- метод иммунострипов (тест-сситема «Прионикс-стрип»);

-электронно-микроскопический метод;

-иммуногистохимический метод выявления патологических PrP ^sc- белков в обычных фиксированных в формалине срезах;

-биопроба (заражение подозрительнам материалом хомяков и мышей).

Дифференциальный диагноз. Губкообразную энцефалопатию крупного рогатого скота необходимо дифференцировать от бешенства, листериоза, болезни Ауески, нервной формы инфекционного ринотрахеита, злокачественной катаральной горячки, а также отравлений фосфорорганическими, хлорорганическими, ртутьорганическими соединениями, фосфидом цинка, мышьяком, поваренной солью.

Основным отличительным признаком от губкообразной энцефалопатии крупного рогатого скота является короткий латентный период (от 5 до 15 дней) острое или подострое течение, повышение температуры тела, отказ от корма и другие симптомы, присущие указанным заболеваниям, биопроба, данные вирусологических, бактериологических и токсикологических исследований.

Бешенство – острая контагиозная болезнь различных видов животных и человека, характризующаяся параличами, агрессией, водоборязнью.

Возбудитель - рабдовирус.

Бешенство крупного рогатого скота чаще протекает в буйной форме и характеризуется возбуждением, извращением аппетита, расширением зрачков, обильным слюноотделением. Агрессивность по отношению к человеку и животным наблюдается редко. К концу болезни развиваются параличи –спазм гортани и глотки, затем передних и задних конечностей. Смерть наступает на 3-6 день. При тихой форме бешенства симптомы возбуждения выражены в незначительной степени, но очень рано развиваются параличи.

Необходимо отметить, что прижизненная дифференциальная диагностика губкообразной энцефалопатии крупного рогатого скота и бешенства, несмотря на всю ее значимость, имеет лишь ориентировочное значение. Основное практическое значение имеет посмертная диагностика, основанная на данных морфологического, серологического исследования и биопробы.

Гистологические изменения головного и спинного мозга при бешенстве характеризуются рассеянным энцефаломиелитом, проявляющимся воспалительными изменениями сосудов и поражением нервных клеток. Указанные изменения для бешенстве неспецифичны и при диагностике играют второстепенную роль. Специфическим является обнаружение в цитоплазме нейронов головного мозга особых образований, названных тельцами Бабеша-Негри, наиболее часто они обнаруживаются в клетках аммонова рога, реже – в других отделах. Тельца Бабеша–Негри представляют собой полиморфные образования со сложной внутренней структурой: в середине одно или несколько плотных гранул, по периферии – более мелкие зернышки. Размеры телец колебаются от 0,25-1 до 20-25 мк. В одной клетке может быть одно или несколько телец различной величины и формы (рис.7)

.

Рисунок 7. Тельца Бабеша-Негри у больного животного в головном мозге.

Для обнаружения телец Бабеша-Негри в гистосрезах, мазках и отпечатках мозга предложено множество способов окраски последних: по Михину, Муромцеву, Манну, Ленцу, Адуцкевичу и др.

Из серологических методов исследования наиболее специфичным при бешенстве является метод флюоресцирующих антител, позволяющий выявлять при наличии вируса в мозге специфическое свечение (разной величины и формы гранулы яркого желто-зеленого цвета в величиной от едва заметных образований до 15-20 мк.

При отрицательных результатах, полученных морфологическими и серологическими методами, для окончательной постановке диагноза проводится биологическая проба, основанная на заражении исследуемым материалом лабораторных животных, главным образом белых мышей. С этой целью суспензией мозга 1:10 с добавлением антибиотиков заражают в мозг в дозе 0,03 мл 5-6 белых мышей весом 4-6 г. Наблюдение за животными проводят в течение 14 дней. В случае падежа животных их мозг исследуют на наличие телец Бабеша-Негри. Если в течение 14 дней у зараженных животных не будут выявлены тельца Бабеша-Негри, то результат считается отрицательным.

Болезнь Ауески (псевдобешенство) – контиагиозная болезнь домашних и диких животных, в том числе и крупного рогатого скота, сопровождается поражением центральной нервной системы и органов дыхания.

Возбудителем является герпесвирус. Вирус обладает пантропностью, Инкубационный период от 1 до 15 дней. У крупного рогатого скота вначале повышается температура тела до 41,9^оС, прекращается жвачка, появляется сильный зуд в области ноздрей, губ, щек или глаз, реже – на других участках тела. Животные вялые, отказываются от корма, беспокоятся, непрерывно лижут зудящие места, трутся об окружающие предметы. Возбуждение нарастает, глаза выражают испуг, животное мычит, стонет, рвется с привязи (агрессивности не проявляет). Нередко наблюдаются судорожные сокращения жевательных и шейных мышц.

При вскрытии у животных расчесы в области головы, спины, конечностей. На месте расчетов кожа гиперемирована, края раны отечные, подкожная клетчатка геморрагически инфильтрирована. При гистологическом исследовании в мозге отмечается картина негнойного менингоэнцефалита. Он характеризуется образованием диффузной и очаговой пролиферации клеток глии, периваскулярной инфильтрацией, клетками ретикулоэндотериального типа, вакуолизацией и пикнозом ганглиозных нервных клеток, нейрофагией, многорядовой пролиферацией клеток мозговых оболочек и боковых желудочков (Рис.8.)

Рисунок 8. Негнойный энцефалит у больных болезнью Ауески животных.

Лабораторная диагностика болезни Ауески заключается в обнаружении и идентификации возбудителя болезни в патологическом материале (РИФ или ИФА), выделении вируса на культуре клеток с последующей его типизацией, в также обнаружении противовирусных антител в сыворотке крови от больных и переболевших животных в РНГА, ИФА, РН.

Листериоз – инфекционная болезнь, протекающая с признаками сепсиса, поражения центральной нервной системы, половых органов и молочной железы.

Возбудителем инфекции является Listeria monocytogenes.

Инкубационный период длится 1-4 недели. Течение болезни бывает острое, подострое и хроническое. Листериоз может проявляться несколькими формами: нервной, септической, смешанной, бессимптомной или выражаться в виде поражения половых органов и молочной железы. У крупного рогатого скота и овец отмечается преимущественное центральной нервной системы. Их первых признаков характерно угнетение, снижение аппетита, в дальнейшем - (1-7 дней) проявляются некоординированность движений, круговые движения, потеря равновесия, судороги, парезы отдельных групп мышц, потеря зрения, конъюнктивит, стоматит, оглумоподобное состояние, иногда приступы буйства. В начальной стадии болезни температура тела может быть несколько повышена или не превышать физиологической нормы, длительность болезни 7-10 дней и большинстве случаев животные погибают.

При вскрытии у крупного рогатого скота отмечают острую венозную гиперемию и отек легких, гистогнойный энецефалит (стволовая часть головного мозга и шейная часть спинного мозга) (рис. 9).

Рисунок 9. Гнойный энцефалит у больного животного

Диагноз на листериоз устанавливают на основе эпизоотологических, клинических, патологоанатомических и лабораторных методов исследований.

Основание для постановки диагноза является выделение возбудителя на питательных средах, его идентификация, биопроба на белых мышах и кроликах. Для серологической диаоностики используют сыаороки крови от больных и переболевших животных. Наличие антител выявляют в РА, РСК, ИФА. Для ускорения диагностики используют люминисцентную микроскопию с использованием гипериммунной антилистериозной сыфоротки, меченой флюорохромами.

Злокачественная катаральная горячка крупного рогатого скота – острая инфекционная болезнь крупного рогатого скота, характеризующаяся поражением слизистой оболочки головы, глаз и нервной системы.

Возбудитель – герпесвирус.

Начальная стадия заболевания характеризуется высокой температурой в течение 1-2 дней, воспалением слизистых оболочек ротовой и носовой полостей. Из носа появляются истечения слизистого, затем гнойно-кровянистого секрета. Повышенная температура тела (40-42^оС) держится на постоянном уровне на протяжение болезни. Смерть может наступить через 24 часа, иногда длится до 2-х недель и более. Летальность – 90%.

Патологоанатомические измерения зависят от тяжести и продолжительности заболевания и характеризуются катарально-гнойным конъюнктивитом и кератитом, некрозом эпидермиса носового зеркальца и слизистой оболочки ротовой полости, гнойно-фибринозным ринитом, ларингитом, крупозно-геморрагическим или дифтеретическим колитом. При гистологическом исследовании головного мозга – негнойный менингоэнцефалит.

Методы диагностики основаны на выделении и идентификации вируса на культуре клеток и обнаружения специфических антител в РИД, РНГА или ИФА.

Инфекционный ринотрахеит – острое инфекционное заболевание крупного рогатого скота, характеризующееся поражением органов дыхания и пищеварения у молодняка и половых органов у взрослых животных, также менингоэнцефалитом у телят.

Возбудитель – герпесвирус.

Заболеваемость животных инфекционным ринотрахеитом зависит от локализации вируса, его вирулентности, возраста, пола и физиологического состояния животного. Отмечены респираторная, энтеральная, генитальная, конъюнктивальная и нервная формы течения инфекционного ринотрахеита. Наиболее часто встречается у новорожденных телят энтеральная форма, у телят старше 1 месяца - респираторная, конъюнктивальная, реже – нервная формы, у взрослых – генитальная форма.

Нервная или менингоэнцефалитная форма инфекционного ринотрахеита возникает у животных после проникновения вируса через гематоэнцефалический барьер. Ее наблюдают редко и, как правило, у молодняка 2-6 месяцев.. Она характеризуется расстройством двигательных функций и нарушением равновесия. Болезнь сопровождается мышечным тремором, мычанием, скрежетом зубов, конвульсиями, слюнотечением.

На вскрытии у животных с менингоэнцефалитной формой инфекционного ринотрахеита в головном мозге гиперемия сосудов, отечность тканей и мелкие кровоизлияния. При гистологическом исследовании – хорошо выраженный лимфоцитарный менингоэнцефалит. Ему сопутствуют периваскулярная лимфоцитарная инфильтрация в различных отделах полушарий и мозжечка, сильная инъекция сосудов и отечность вещества мозга. У животных, которые погибают, в веществе мозга преобладают кровоизлияния, а при затяжном течении болезни – дегенеративные изменения нервных клеток и клеточно-пролиферативные процессы глиальных элементов.

Диагноз на инфекционный ринотрахеит ставят путем выделения и идентификации вирусов на культуре клеток, обнаружении противовирусных антител в сыворотках крови больных и переболевших животных в РН, РНГА, ИФА.

Отравления мочевиной характеризуется сильным угнетением. Потливостью, атаксией, слюнотечением, клоническими и тетаническими судоргами. Отравлению подвержены в основном взрослые животные. Температура тела в норме. Заболевают едничные животные до 30-40%-го поражения стада.

На вскрытии – геморрагический гастроэнтерит, вздутие рубца (при разрезе ощущается резкий запах аммиака), зернистая (жировая) дистрофия печения и некрозы в ней. Основанием для постановки диагноза являются лабораторные исследования содержимого рубца на наличие в нем мочевины.

Отравление ртутьорганическими соединения характеризуется резким угнетением, сильной саливацией, поносом, полиурией, угнетением сердечной деятельности, атаксией, парезами, параличами. Температура тела в норме. Заболевают едничные животные до массовых случаев поражения стада.

На вскрытии серозно-катаральный гастроэнтерит, некротический некроз, зернистая (жировая) дистрофия миокарда и печени, крупозно-дифтеретический колит, кровоизлияния в серозных оболочках пищеварительного тракта.

Основанием для постановки диагноза являются лабораторные исследования содержимого рубца на наличие в нем соединений ртути.

Отравление хлорорганическими соединениями - характеризуется резким угнетением или возбуждением, сильной саливацией, поносом, полиурией, судоргами, сердечной недостаточностью, парезами, параличами. Температура тела в норме. Заболевают едничные животные до массовых случаев поражения стада.

На вскрытии – катарально-геморрагический гастроэнтерит, кровоизлияния в слизистой оболочке бронхов, плевре, под эпи- и эндокардом, зернистая дистрофия и венозная гиперемия в миокарде, печени, почках, венозная гиперемия и отек легких.

Основанием для постановки диагноза являются химико-токсикологические лабораторные исследования содержимого рубца на наличие в нем хлорорганических соединений.

Отравление фосфорорганическими соединениями - характеризуется расстройством нервной системы, повышенной возбудимостью, затем угасанием рефлексов, атаксией, сильной саливацией, поносом, судоргами, сердечной недостаточностью. Температура тела в норме. Заболевают едничные животные до массовых случаев поражения стада.

При вскрытии – обильная саливация в ротовой полости, цианоз слизистых оболочек глаз и ротовой полости, венозная гиперемия печени и легких (отек легких), гиперемия и отек головного мозга, сужение зрачков, кровоизлияния под эпи – и эндокардом, в слизистой оболочке очевого пузыря, щитовидной и поджелудочной железах, головном мозге.

Основанием для постановки диагноза являются химико-токсикологические лабораторные исследования содержимого рубца на наличие в нем хлорорганических соединений.

Наряду с поражением крупного рогатого скота губкообразной энцефалопатией, аналогичные изменения отмечаются и у овец при скрепи, аденоматозе, висна.

При аденоматозе овец наряду с головным мозгом поражаются и легкие. При этом отмечают метаплазию альвеолярного эпителия в виде онкоподобных аденом на фоне расплавления межальвеолярных перегородок и образования эмфизематозных полостей.

При заболевании овец висна отмечают периваскулярный инфильтрат крупноклеточных элементов в стволовой части продолговатого мозга.

При скрепи овец имеются различные стадии поражения головного мозга. Отмечают кариопикноз, каогуляцию и пониженную оксифилию цитоплазмы нейронов, цитокариолизис нейронов, хроматолизис ядра и вакуолизация цитоплазмы нейронов, лизис цитоплазмы и оттеснение остатков ядра к периферии нейрона. Иногда отмечают наиболее характерный патогномоничный признак – перстневидный нейрон (рис.10).

Рисунок 10. Перстневидный некроз в мозге овец.

При меди овец отмечается пролиферация круглоклеточных элементов в интерстициальной ткани легких, перибронхим, расплавление межальвеолярных перегородок и образование эмфиземоподобных полостей (рис.11).

Рисунок 11. Поражение легких у больных овец.

При проведении гистологических исследований в нормальных участках головного мозга преобладают волокна нейроглии, заметны нейроны. При микроскопии гистосрезов из мозжечка здоровых животных при микроскопии видны грушевидные клетки Пуркинье, зернистый слой с мелкими нейронами, модекулярный слой (немиелизированные волокна) нейроны.

Установление окончательного диагноза на губкообразную энцефалопатию крупного рогатого скота. Подтвержденным на для губкоообразную энцефалопатию крупного рогатого скота диагноз следует считать только на основании комплексного анализа эпизоотологических, клинико-анатомических и патогистологических исследований. При этом следует сравнивать гистопрепараты отделов головного мозга, полученных от заведомо здоровых животных и от животных с различными поражениями центральной нервной системы.

Подтверждением диагноза на губкообразную энцефалопатию крупного рогатого скота является заключение Региональной референтной лаборатории Международного Эпизоотического Бюро, расположенной во Всероссийском НИИ защиты животных (г.Владимир, Российская Федерация) путем исследования иммуногистохимическим методом наличия патологических PrP- белков в обычных фиксированных в формалине срезах участков головного мозга крупного рогатого скота с наиболее характерными патогномоничными признаками, характерными для этого заболевания, выявленными после патогистологических исследований

Меры безопасности при работе с патологическим материалом при проведении диагностических исследований. При работе с патологическим материалом, содержащим возбудитель губкообразной энцефалопатии крупного рогатого скота необходимо учитывать высокую устойчивость возбудителя к физико-химическим факторам и в этой связи строго соблюдать правила техники безопасности.

Все работы, связанные с распиловкой головы, извлечением головного мозга, отбору проб для патогистологических, бактериологических и вирусологических исследований следует проводить в соответствии с требованиями Санитарных правил 1.2.011 от 04.05.1994 “Безопасность работы с микроорганизмами I и II групп патогенности” которые являются до настоящего времени действующими на территории государств СНГ.

Специалист, который проводит исследования, должен иметь халат, прорезиненный (лучше хлорвиниловый) фартук с нарукавниками, анатомические перчатки, резиновые сапоги, водонепроницаемый капюшон, защитную маску из оргстекла для исключения попадания на лицо или глаза брызг крови, осколков костной ткани и интрацеребральной жидкости.

По окончании работ необходимо обработать настойкой йода или бриллиантовой зелени ногти и различные царапины или травмы рук.

Также по окончании работ инструменты, которыми проводили отделение головы, укладываются стерилизатор с 2% раствором гипохлорита натрия не менее чем на 1 час (инструменты должны быть погружены в раствор полностью). Сапоги, фартук, капюшон, маску и перчатки также обрабатывают с 2% раствором гипохлорита натрия. Халаты обрабатывают автоклавированием при 134-138^оС в течение 20-30 минут. Горючие отходы сжигают.

Труп животного, а также и голову (после отбора мозга) рекомендуется утилизировать в яме Беккари, или обильно засыпав хлорной известью сжигать. Неиспользованные участки головного мозга целесообразно сжечь в муфельной печи, а при ее отсутствии утилизировать как труп животного.

Инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота

(Rinotracheitis infectiosa bovinum)

Определение. Инфекционный ринотрахеит (пузырьковая сыпь, инфекционный вульвовагинит, инфекционный некротический ринотрахеит, инфекционный ринит, красный нос, инфекционный катар верхних дыхательных путей) — остро протекающая контагиозная болезнь крупного рогатого скота, характеризующаяся поражением дыхательных путей, лихорадкой, общим угнетением и конъюнктивитом. В некоторых случаях появляется пустулезный вульвовагинит и баланопостит при попадании вируса в половые органы животных. У беременных животных неизбежны аборты.

Историческая справка. Впервые болезнь зарегистрирована в США в 1950 г. у откормочного скота N.G.Miller (1955). Вирус выделен H.Madin et al. (1956) из носовых истечений телят с острым респираторным заболеванием. После этого инфекционный ринотрахеит (ИРТ) обнаружен в различных странах мира.

В бывшем СССР сходное по клиническим и патологоанатомическим признакам заболевание наблюдал в 1938 г. Ф.М.Пономаренко (1940). Вирус впервые выделил Н.Н.Крюков в 1969 г. от больных телят из хозяйств Тамбовской области. В результате проведенных исследований установлено, что ИРТ имеет тенденцию к более широкому распространению в животноводческих хозяйствах мясо-молочного направления и особенно в хозяйствах с высокой концентрацией сборного поголовья.

Эпизоотологические данные. В естественных условиях инфекционным ринотрахеитом болеет крупный рогатый скот, особенно тяжело - телята и молодняк на откорме. Кроме того, генитальная форма заболевания установлена у беловежских зубров. При серологическом обследовании различных видов копытных жвачных антитела к вирусу ИРТ установлены в Танзании у взрослых буйволов. Лабораторные животные к вирусу не чувствительны, однако в ВИЭВ были проведены исследования по адаптации вируса инфекционного ринотрахеита к белым мышам (Н.Н.Крюков, А.Г.Глотов, 1987). При этом у них отмечались характерные клинические признаки.

Источником возбудителя инфекции являются больные и переболевшие животные, выделяющие вирус 6—12 мес. после выздоровления. Очень опасны быки-производители, переболевшие генитальной формой и длительное время содержащие вирус в сперме.

Из организма животных вирус выделяется с секретом из носа и глаз, истечениями из половых органов, со спермой, молоком, мочой, калом. Заражение происходит аэрогенным, контактным путем и при случке. Факторами передачи возбудителя инфекции служат инфицированные воздух, корма, подстилка, предметы ухода за животными, одежда и руки обслуживающего персонала, инструментарий и др.

Нами (П.А.Красочко, П.П.Фукс и соавт., 1994) установлено, что одним из путей сохранения в природе и передачи чувствительным животным являются бактерии, в частности, Bacillus alvei — возбудитель европейского гнильца пчел, который в своем геноме содержит нуклеиновую кислоту вируса ИРТ. Инокуляция телятам убитой и дезинтегрированной бактериальной массы вызывает заражение, подтверждающееся клинически и серологически.

Заболевание не имеет выраженной сезонности. На комплексах по выращиванию крупного рогатого скота (нетелей или откорму бычков) инфекционный ринотрахеит проявляется в виде периодических вспышек, возникающих на 5—7-й день после завоза сборного поголовья телят, предназначенных для комплектования групп животных в помещениях комплексов и ферм. Вначале заболевают отдельные животные, затем количество их быстро нарастает, достигая максимума на 9—14-й день. Вспышка заболевания длится до 21—24 дней, в течение которых подвергается заражению до 95% животных. При инфекционном ринотрахеите летальность достигает 25%.

Для ИРТ характерным является осложнение секундарной микрофлорой, что обусловливает более тяжелое течение заболевания и более высокую летальность (до 40%). В неспециализированных хозяйствах и мелких фермах инфекция протекает значительно слабее и бессимптомно.

К вирусу инфекционного ринотрахеита чувствителен плод крупного рогатого скота: внутриутробное заражение приводит к его гибели или возникновению иммунологической толерантности.

Нами (П.А.Красочко, 1985—1999; И.А.Красочко, 1989—1997) проведено серологическое обследование крупного рогатого скота и овец из животноводческих хозяйств Республики Беларусь и беловежских зубров на наличие антител к вирусу ИРТ. Результаты исследований представлены в табл. 6.

 

Таблица 6

Результаты исследования сывороток крови от копытных жвачных на наличие антител к вирусу инфекционного ринотрахеита

 

	Клиническое состояние и возраст	Исследо-вано проб	Положительный результат (%)	Клиническое состояние и возраст	Исследовано проб	Положи-тельный результат (%)
	Крупный рогатый скот	Беловежские зубры
	Коровы, 3—10 лет, клинически здоровые		62,4	Самцы, начальная стадия некротического баланопостита 1—10 лет		66,7
	Телята, 1—6 мес., больные ОРЗ		37,9	Самцы, больные некротическим баланопоститом 1—10 лет		76,2
	Телята, 1—6 мес., переболевшие ОРЗ		60,6	Самцы, клинически здоровые, старше 10 лет		80,0
	Телята старше 6 мес., клинически здоровые		65,9	Самцы, клинически здоровые, 1—7 лет		57,1
	Телята до 1 мес., клинически здоровые		29,5	Самки, клинически здоровые, старше 10 лет		53,9
	Коровы абортировавшие		77,4	Самки, клинически здоровые, 1—7 лет		44,4
				Овцы
	Коровы с гинекологическими заболеваниями		83.3	Взрослые овцы в возрасте 1—5 лет		76,7
	Коровы, многократно перегуливающие		94,9	Ягнята, переболевшие ОРЗ		29,5

 

Представленные в таблице данные свидетельствуют о достаточно широком распространении инфекционного ринотрахеита в Беларуси и его роли в заболеваемости животных с различной патологией.

Биологические свойства возбудителя. По современной классификации возбудителем ИРТ является ДНК-геномный вирус, принадлежащий к семейству Herpetoviridae, роду Herpesvirus I. Свойства вируса ИРТ общие для всех представителей рода Herpesvirus и включают: центральное ядро двухцепочнонй ДНК, окруженное икосаэдрическим капсидом, состоящим из 162 камсомеров; формирование капсидов в ядре клетки-хозяина и почкование их на ядерной мембране при созревании; наличие трехслойной оболочки, состоящей из компонентов вируса и клетки-хозяина; продуцирование внутриядерных телец-включений; способность к длительной персистенции, лате

⇐ Предыдущая12345678910Следующая ⇒

Поделиться:

Воспользуйтесь поиском по сайту: