Бактериальные инфекции сельскохозяйственных животных

БАКТЕРИАЛЬНЫЕ ИНФЕКЦИИ крупного рогатого скота

М И К О Б А К Т Е Р И О З Ы

 

Микобактериозы - болезни или скрытые инфекции, вызываемые микобактериями. Микобактерии вызывают туберкулез, лепру и некоторые другие хронические заболевания с некрозом и гранулематозными процессами. Непатогенные микобактерии могут вызывать у животных и человека состояние повышенной чувствительности к туберкулину и аллергенам из таких микобактерий.

Род Муcobacterium относится к семейству Mycobacteriacae, порядку Actinomycetales и включает более 50 видов и подвидов патогенных и непатогенных микобактерий /Bergy/. Как правило, представители рода - тонкие прямые или слегка изогнутые неподвижные палочки длиной 0,8-10 мкм и шириной 0,2-0,6 мкм, располагающиеся в мазках одиночно или группами, но могут быть в форме кокков или образовывать разветвленные ните-, мицелиоподобные и шаровидные формы. Микроаэрофилы спор и капсул не образуют, кислотно-спиртоустойчивые, поэтому окрашиваются по Циль-Нильсену в рубиново-красный цвет.

Для микобактерий характерно высокое содержание липидов, воска и миколовых кислот /Т.В Каронелли,1984/. В определителе Bergy представители рода условно поделены на «медленно растущие» и «быстро растущие» при оптимальной температуре роста - +30... +40°С.

По способности вызывать заболевания человека и животных микобактерий можно разделить на 3 группы: патогенные, условно патогенные и сапрофитные /Зыков М.П., Ильина Т.Б.,1978; Garcia S.J. et.al., 1977; Petersen K.F.,1989; Tsukamura M., 1983/. В группу патогенных (опасных) для человека и животных микобактерий входят: М. tuberculosis, M.africanum и M. bovis- возбудители туберкулеза у человека и животных; M. leprae - возбудитель проказы, M.paratuberculosis, - возбудитель паратуберкулеза, M.avium – возбудитель туберкулеза у птиц. Группу потенциально патогенных микобактерий составляют: M. avium, M.intracellulare, M. kanssasii, M. malmoense, M. xenopi, M. fortuitum, M. chelonai.

К третьей группе относятся сапрофитные микобактерии, которые свободно живут в окружающей среде и, как правило, не опасны для человека. Они широко распространены в почве, воде, траве, на предметах, загрязненных нефтепродуктами /А.И.Завгородний, 1987; А.М.Кадочкин, 1983; О.В.Мартма, К.К.Тяхнас, 1978; В.Е.Щуревский и др.,1984/. Могут встречаться в тканях теплокровных и холоднокровных животных и рыб.

КРАТКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ

РОДА MUCOBACTERIUM

Типовым видом рода Mycobacterium является M. tuberculosis. Микобактерии этого вида вызывают туберкулез у человека, а также патогенны для многих видов сельскохозяйственных и лабораторных животных. У крупного рогатого скота заражение М.tuberculosis чаще проявляется незначительными изменениями, имеющими тенденцию к обратному развитию. Возбудитель медленно растет на питательных средах только при 37 … 40° С, образует шероховатые колонии. Характерным является синтез ниацина.

M. bovis - патогенен для крупного рогатого скота, свиней, кроликов, морских свинок, белых мышей, коз, овец, лошадей, дики животных. У человека чаще вызывает внелегочные форы болезни. Отличается медленным ростом на питательных средах с образование; мелких сухих колоний, плохо эмульгируемых в физиологическом растворе. Биохимическая активность не высокая. Пробы на никотинамидазу, восстановление нитратов, ниациновый тест - отрицательные.

M. africanum - занимает промежуточное положение между М. tuberculosis и M. bovis. Вызывает туберкулез у людей в тропической зоне Африки. Патогенен для морских свинок, мышей, отчасти кроликов. Растет только при 37°С на яичных и агаровых средах с бычьей сывороткой. Не образуют ниацин, однако, в отличие от M. bovis содержат никотинамидазу и пиразинамидазу.

M. leprae - возбудитель проказа человека. Не растет на искусственных питательных средах, однако хорошо размножается в тканях броненосцев.

Эпизоотологическое и эпидемиологическое значение имеют также нетуберкулезные (атипичные) микобактерии, обладающие потенциальной патогенностью. В ослабленном организме они могут вызывать самостоятельные заболевания – микобактериозы. Однако чаще атипичные микобактерии являются обитателями окружающей среды, которые способны вызывать у крупного рогатого скота повышенную чувствительность к туберкулину /А.С.Донченко, 1987; А.М.Кадочкин, 1983; Р.В.Тузова, 1983; А.Н.Шаров, 1989/. Отличаются от микобактерий туберкулеза по культуральным и биохимическим свойствам, обладают естественной лекарственной устойчивостью к большинству противотуберкулезных препаратов.

Медленнорастущие атипичные микобактерии, в зависимости от способности образовывать пигмент на свету и в темноте, Runyon /1956/ разделил на три группы: фотохромоганные, скотохромогенные и нефотохромогенные.

Основные представители фотохромогенных микобактерий /1-группа/: М. kansassii, М.marinum. Образуют желто-оранжевый пигмент на свету.

M. kansassii - растут при 25 … 40° С, образуя гладкие или шероховатые колонии желто-оранжевого цвета. Содержат никотинамидазу и редуцируют нитраты. Не патогенны для лабораторных и сельскохозяйственных животных, но

могут быть причиной парааллергических реакций на туберкулин. У человека нередко вызывают хроническое заболевание легких, сходное с туберкулезом.

M. marinum - оптимальный рост при +28 … 32°С. При +37° С рост очень скудный или вовсе отсутствует. Колонии обычно гладкие, каталазная активность незначительная. У человека может вызывать поверхностные кожные поражения. Нередко встречается в бассейнах с теплой водой.

Скотохромогенным микобактериям /II - группа/ характерен оранжевый или красный, не зависящий от освещения, цвет колоний. Типичные представители: М.scrofulaceum, M.gardonae.

М.scrofulaceum – образуют гладкие желтые колонии. Раст появляется на 7 сутки, при температуре 35-37°С. Не патогенны для лабораторных животных, но имеют значение в патологии человека, вызывая лимфадениты у детей. Выделаны из объектов внешней среды и от реагировавшего на туберкулин крупного рогатого скота.

M.gardonae - медленно растут при +25... 40°С. В отличии от М. scrofulaceum содержат арилсульфатазу, гидролизуют твин-80, но не содержат уреазу, никотинамидазу и пиразинамидазу. Являются кислотоустойчивыми сапрофитами, распространенными в природе.

Среди нефотохромогенных микобактерий /III -группа/ могут быть неокрашенные и окрашенные в желтый цвет культуры. Наиболее значимые виды: M. avium, M. intracellularae, M. gastri, M. terrae, M. triviale, M. xanopi, М. ulcerans.

M. avium - возбудитель туберкулеза птиц. Патогенен для кур, кроликов, свиней. Потенциально патогенен для человека. Температурный оптимум - +42°С. Образует гладкие, блестящие колонии, хорошо эмульгирующиеся в воде. В отличие от M.intracellularae не обладает арилсульфатазной активностью /Р.В.Тузова, 1983/.

M. intracellularae имеют температурный диапазон от +25° до +45°С. По биохимическим свойствам почти не отличим от M.avium. Поэтому их объединяют в единый комплекс, к которому в последнее время добавляют М. scrofulaceum, M. avium - intracellularae - scrofulaceum /MAIS/. Для их идентификации наряду с биохимическими исследованиями, необходима биопроба на кроликах. Занимают важное место в развитии гиперчувствительности к туберкулину у животных. У свиней вызывают развитие микобактериозов, характеризующихся наличием в лимфатических узлах поражений, подобных туберкулезным.

M. gastri - медленнорастущие при +25... 37°С микобактерии. Гидролизуют твин-80, содержат уреазу и никотинамидазу. В 6,6% случаев их выделяют из патматериала от реагирующих на туберкулин животных.

M. terrae - растут при +25... 40°С. Обладают каталазной активностью, восстанавливают нитраты, гидролизуют твин-80. Иногда их выделяют от реагирующих животных и из объектов внешней среды.

M. triviale - обладают в основном теми же свойствами что и М. terrae, однако содержат арилсульфатазу и растут на питательной среде с содержанием 5% NaCI.

M. xanopi -. нефотохромогенные макобактерии, впервые были выделены из поражений водяной жабы. Культуры окрашены в желто-оранжевый цвет, не растут при +25°С. Встречаются у людей как возбудители легочных заболеваний, имеющих клиническую картину близкую к туберкулезу.

М. ulcerans - выделяют при кожных поражениях людей в тропических и субтропических странах. Растут только при +25°С, медленно, образуя пигмент. Имеют слабоположительный ниациновый тест.

Наряду с медленнорастущими микобактериями существует большая группа быстрорастущих микобактерий /IY - группа/, дающих макроскопический рост колоний при температуре +25... 40°С в течение 7 дней после посева. Они отличаются полиморфизмом, часть микобактерий не образует пигмент, другие пигментированы. Не требовательны к питательным средам. Благодаря этому, представители данной группы находят благоприятные условия для существования во внешней среде. Тем не менее, они играют значительную роль в сенсибилизации животных к туберкулину. Быстрорастущие микобактерий выделяют из патматериала от реагирующих на туберкулин животных в 30-60% случаев /А.И.Завгородний, 1987; А.М.Кадочкин, 1983; О.В.Мартма, К.К.Тяхнас, 1978; В.Е.Щуревский и др.,1984/. Основные представители быстрорастущих микобактерий: М. fortuitum,M. phlei, M.vaccae, M. smegmates, M.chelonei.

Наибольшее эпизоотологическое значение имеют М. fortuitum и M.chelonei, которые способны в определенных условиях вызывать маститы, абсцессы, артриты, а также реакции на туберкулин к крупного рогатого скота.

M. smegmates являются нормальными обитателями сальных желез человека в животных. На яичных средах через 2-3 дня роста образуют тонкие складчатые колонии светло-кремового цвета.

Имеются сообщения о выделении M.vaccae и M. phlei из патматериала от коров, реагирующих на туберкулин. Могут расти при 22 …50°С, через 2-3 суток после посева появляются гладкие колонии от желтого до оранжевого цвета.

Суммируя данные о роде Муcobacterium можно сделать вывод о том, что в состав рода входят несколько патогенных видав, из которых для ветеринарной медицины наиболее значимы M.bovis и М.tuberculosis, а также многочисленные представители потенциально-патогенных микобактерий, способных стимулировать повышенную чувствительность к туберкулину. Так как механизм развития парааллергических реакций у крупного рогатого скота это сложный процесс, то присутствие в организме атипичных микобактерий не всегда ведет к развитию ГЧЗT к туберкулину. Тем не менее, роль атипичных микобактерий достаточно очевидна. Для совершенствования прижизненной диагностики туберкулеза необходимо достаточно четко различать потенциально-патогенные и патогенные виды и дифференцировать иммунный ответ на них.

 

ТУБЕРКУЛЕЗ

Определение. Туберкулез (от лат.tuberculum – бугорок) - х роническое инфекционное заболевание большинства видов животных и человека, характеризующееся развитием клеточной аллергии, специфическими воспалительными изменениями с образованием гранулём в различных органах и тканях, полиморфной клинической картиной, наклонностью к хроническому течению. Туберкулез преследует человечество на протяжении всей истории. К нему восприимчивы многие виды домашних и диких животных, а также птицы. Среди сельскохозяйственных животных туберкулез особенно широко распространен у крупного рогатого скота /А.С.Донченко, 1989; Ю.Я. Кассич,1990; Р.В.Тузова,1983/.

Возбудители болезни. Туберкулез у млекопитающих вызывают микобактерии комплекса M.tuberculosis, M.bovis, M.africanum, у птиц - M.avium. Возбудитель туберкулеза бал открыт Р.Кохом в 1882 году, который выделил возбудителя в чистой культуре из пораженной туберкулезом ткани человека и животных. Заражая экспериментальных животных этой культурой, Кох получил аналогичное поражение туберкулезом и из пораженных органов вновь выделил исходную культуру.

Как уже отмечалось ранее M.tuberculosis - возбудитель туберкулеза человека, но может вызывать инфекцию у животных. M.bovis- возбудитель туберкулеза бычьего вида вызывает заболевание у большинства млекопитающих и человека, чаще является причиной заболевания крупного рогатого скота. M.africanum - промежуточный тип между M.tuberculosis и M.bovis, встречающийся в Африке.

Морфология и тинкториальные свойства. Возбудители туберкулеза имеют обычно форму тонких палочек, иногда прямых, но чаще слегка изогнутых с округленными концами, 0,2-0,6 мкм в ширину и 1-6 мкм в длину. Бактерии одного и того же штамма, даже одного возраста, могут быть различной длины и ширины. Они неподвижны, спор не образуют, жгутиков не имеют. Характерной особенностью морфологии бактериальной клетки является наличие в ней зернистости. Количество зерен в цитоплазме колеблется. Предполагается, что они играют важную роль в процессах обмена веществ палочки, обуславливают ее кислотоустойчивость, принимают участие в размножении. Для микобактерий туберкулеза характерен полиморфизм. В старых культурах появляются нитевидные, ветвистые или зернистые формы, достигающие 20 мкм. Микобактерии обладают хорошо выраженной клеточной стенкой со значительным содержанием липидов. Это обусловливает характерный для микобактерий признак - кислото- спиртоустойчивость, т.е. при окраске основными красителями (карболовый фуксин) они не обесцвечиваются 95% этанолом с 3% соляной кислоты. На этом основан метод дифференциальной окраски по Циль-Нильсену. В результате микобактерии окрашиваются в рубиново-красный цвет, а все остальные микроорганизмы и окружающий субстрат - в синий.

Для нормального роста и развития бактериальной клетки необходимо достаточное количество кислорода, однако они могут расти и при недостатке или отсутствии последнего.

Для микобактерий туберкулеза характерно наличие особого липоида - корд-фактора, который обуславливает вирулентность и их склеивание в форме жгутов или шнуров. Микобактерии птичьего вида и атипичные микобактерии не способны к корд-образованию, что является их отличительной особенностью.

Микобактерии туберкулеза обладают хорошей устойчивостью, могут сохранять жизнеспособность при очень низких температурах и при подогреве в течение 5 минут могут выдерживать температуру до 80°С. Все это затрудняет дезинфекцию при туберкулезе. При интенсивном облучении солнцем и при высокой температуре окружающей среды жизнеспособность микобактерий резко снижается и, напротив, в темноте, холоде и сырой атмосфере выживаемость их весьма значительна.

Культуральные свойства. Возбудители туберкулеза при посеве патологического материала растут медленно. Колонии микобактерий туберкулеза бычьего и человеческого вида появляются через 20-60 дней, а птичьего вида через 15-30 дней после посева. При адаптации к питательной среде скорость роста может возрастать.

Оптимальная температура роста 37-38⁰С. M. avium могут расти при 45⁰С.

Для нормального развития микобактерий требуются питательные среды богатые органическими веществами. Предпочтительнее применять питательные среды, в состав которых входят глицерин, картофель, аспарагин. Аспарагин является основным источником азота. Для выявления микобактерий из патматериала в лабораторной практике наиболее часто используют плотные питательные среды: Левенштейна-Иенсена, Гельберга, Петраньяни, Павловского, Финн – 2, Фаст-ЗЛ и т.д /Л.М.Ходун, 1996; И.И.Румачик, 1997; Takimura Y., Thompson J.R., 1969/. После адаптации они могут расти на жидких синтетических и полусинтетических средах, с использованием в качестве источника азота аспарагина (среда Сотона) или щавелевокислого аммония (среда Моделя).

Возбудитель туберкулеза бычьего вида в диагностических посевах на яичных средах растет медленнее, чем возбудитель человеческого вида, и дает скудный рост в виде сухих мелких колоний (0,5-1 мм) с неровными краями и зернистой поверхностью, светло-серого цвета, иногда в виде колоний незначительно выступающих над поверхностью среды (R-форма).

Возбудитель туберкулеза человеческого вида дает более пышный рост в виде полиморфных колоний: грубых, приподнятых, шероховатых, со складчатой поверхностью, неровными краями. Часто колонии имеют кремовый оттенок, однако, в большинстве случаев по виду их нельзя отличить от M.bovis. В жидкой питательной среде рост начинается сверху в виде пленки, которая от края простирается на всю поверхность среды, по мере роста подымается кверху по стенке колбы и частично осаждается на дно.

M.avium дает гладкие блестящие, часто тюрбаноподобные колонии, хорошо эмульгирующиеся в водных растворах (S форма колоний).

В качестве дифференцирующих культуральных тестов наиболее часто используют:

- способность роста на МПБ и МПА (M.bovis, M.tuberculosis не растут, атипичные микобактерии в большинстве случаев дают рост);

- рост на плотных яичных средах при 20⁰, 37⁰, 45⁰ С (M.bovis и M.tuberculosis растут только при 37⁰С, M.avium - при всех указанных режимах.

Нередко только с помощью культурального метода удается поставить диагноз. Тем не менее, выделение культуры возбудителя остается трудоемким и не всегда эффективным процессом. Это связано с медленным ростом микобактерий туберкулеза, требовательностью последних к питательным средам и несовершенством самих сред.

Для улучшения культивирования микобактерий разрабатываются новые варианты питательных сред. Современные методы с использованием высокоселективных сред позволяют выращивать культуры за 1-2 недели, но идентификация микроорганизма требует дополнительного времени.

Биохимические свойства позволяют различить виды и варианты микобактерий внутри комплекса M.tuberculosis-M.bovis, а также отличать их от атипичных микобактерий. В клетках М. tuberculosis содержатся такие энзимы, как никотинамидаза, пиразинамидаза, уреаза, эстераза, липаза, нитроредуктаза и др. В клетках М. bovis нитроредуктаза и никотинамидаза отсутствуют, но имеется уреаза, М. avium содержат никотинамидазу и пиразинамидазу. Чаще всего исследуют способность суспензий микобактерий (5-10 мг/мл) в физиологическом растворе или специальном буфере образовывать ниацин, редуцировать нитраты, вызывать гидролиз твина 80, разлагать амиды, расти на питательных средах с добавлением некоторых химических веществ. Так, например, М. tuberculosis содержит в 10 раз больше никотиновой кислоты, чем микобактерии бычьего вида и атипичные. Никотиновую кислоту определяют с помощью ниацинового теста, который позволяет отличать микобактерии человеческого вида от других видов.

Атипичные микобактерии дают рост, а микобактерии комплекса M.tuberculosis не растут на яичных средах с добавлением паранитробензойной кислоты (500мг/л). Микобактерии человеческого вида обладают способностью восстанавливать нитраты, чем отличаются от микобактерий бычьего и, птичьего и некоторых атипичных.

В таблице 1 дана дифференциация видов комплекса M.tuberculosis- M.bovis по биохимическим свойствам /по Grange, Yates, 1994/.

Таблица 1 - Дифференциация видов комплекса M.tuberculosis- M.bovis по биохимическим свойствам

Вид микобактерий	Чувствитель-ность к ТСН	Редукция нитратов	Пиразинами-дазная активность	Образование ниацина
M.tuberculosis	Устойчивы	+	+	+
M.bovis	Чувствительны	-	-	-
M.africanum	-	±	+	±

ТСН- tiophen-2-carboxylic acid hydraсside

 

Патогенность для разных видов животных. Решающим критерием, позволяющим определять принадлежность микобактерий к тому или иному типу, является их неодинаковая патогенность для различных видов животных.

Патогенность для лабораторных животных определяется путем подкожного или внутривенного введения по 1 мг (влажного веса) бактериальной массы кроликам, морским свинкам и курам (таблица 2). Микобактерии птичьего вида очень патогенны для птиц, однако морские свинки, наоборот, практически невосприимчивы к заражению данным видом. Морские свинки одинаково чувствительны к микобактериям человеческого и бычьего видов, в то время как кролики очень чувствительны к М. bovis и значительно меньше поражаются M.tuberculosis, даже заражение большой дозой вызывает у них только местные поражения без генерализации процесса.

Таблица 2 - Патогенность микобактерий для разных видов животных

 

Виды животных	M.tuberculosis	M.bovis	M.avium
Морские свинки	Гибель через 1-3 месяца	Гибель через 1-3 месяца	не патогенен
Кролики	Локализован-ные пораже-ния	Гибель через 1-3 месяца	После внутривенного заражения может развиться сепсис (тип Иерсена), приводящий к гибели животных
Куры	не патогенен	не патогенен	Множественные поражения печени, селезенки, кишечника

 

Патогенность для сельскохозяйственных животных. M.bovis вызывает заболевание у крупного рогатого скота, свиней, норок, маралов, коз, овец, лошадей, диких животных и человека.

M.tuberculosis вызывает заболевание у человека, свиней и редко у других животных. Может инфицировать крупный рогатый скот, но инфекция протекает латентно, как правило, без развития макроскопических изменений. Инфицированные животные могут выделять возбудитель с молоком.

M.avium вызывает туберкулез у птиц, может вызывать туберкулезоподобные лимфодениты у свиней. При инфицировании M.avium крупного рогатого скота развиваются аллергические реакции на туберкулины.

Непатогенные штаммы возбудителя туберкулеза. Французские исследователи Кальмет и Герен в начале 20 века добились стойкого исчезновения патогенности у штамма возбудителя туберкулеза бычьего вида после более 200 пассажей на глицериновом картофеле с 5% бычьей желчи. Штамм, названный по первым буквам фамилий ученых BCG (БЦЖ) обладал выраженными иммуногенными свойствами, но не был патогенен для человека и животных. До настоящего времени штамм БЦЖ используется для изготовления противотуберкулезной вакцины, применяемой для профилактики туберкулеза человека.

Трансформированные микобактерии. Под влиянием воздействия различных факторов внешней среды возбудитель туберкулеза проявляет широкий диапазон изменчивости морфологии бактериальных клеток от мельчайших фильтрующихся частиц и зерен до гигантских, ветвистых форм с огромными почковидными выпячиваниями и колбообразными вздутиями. Многообразие форм возбудителя, с одной стороны, отражает различные стадии и фазы развития его бактериальных клеток, а с другой – указывает на его филогенетические связи с другими представителями простейших растительных форм /И.Р. Дорожкова,1974/.

В организме человека и животных, бактериальные формы возбудителя туберкулеза, нередко трансформируются в Л-формы. Этому способствуют антибиотики, блокирующие синтез клеточной стенки, а также иммунозащитные системы макроорганизма, такие как фагоцитоз, антителообразование, воспаление /З.С.Земскова, И.Р.Дорожкова,1984; М.И.Гертман, 1988; И.В.Коваленко, 1989/. В основе Л-трансформации лежит нарушение биосинтеза муреинов, составляющих основу клеточных стенок микобактерий. Морфологические элементы L-форм микобактерий туберкулеза представлены гигантскими телами, выполненными зернистыми структурами, скоплениями крупных и мелких зерен, вакуолями, шаровидными образованиями типа сферопластов и единичными светопреломляющими телами. L-формы обладают низкой патогенностью, но способны выживать в неблагоприятных условиях. В связи со значительной редукцией клеточной стенки, L-формам свойственна высокая хрупкость всех составляющих их элементов и необходимы особые требования к условиям культивирования. Общепринятыми методами бактериологической диагностики эта форма микобактерий не выявляется, так как L-формы не растут на обычных питательных средах и требуют специальных элективных питательных сред. Для их выявления используют специальную модифицированную среду Школьниковой. В.В.Власенко с соавторами (1998) разработана среда ВКГ со стимулятором роста, позволяющие культивировать измененные формы микобактерий со сниженной жизнеспособностью и ферментативной активностью и, проводить прижизненную, ускоренную диагностику болезни (3-10 дней), однако исследования в данном направлении продолжаются.

Из-за отсутствия или повреждения их клеточной стенки они не воспринимают обычно применяемые для выявления микобактерий красители и, потому их не удается обнаружить бактериоскопически в мазках из очагов поражения. Наряду с изменением морфологических и культуральных свойств, у них изменяются и другие биологические свойства, в том числе антигенный состав, а также утрачивается вирулентность для животных или, наоборот, появляется способность вызывать поражения, не свойственные исходной культуре либо по характеру патологического воздействия, либо по органной локализации.

Достоверно установлена их роль в латентном течении туберкулеза и в возникновении рецидивов туберкулеза у животных и человека. Л-формы способны персистировать в организме человека и животных, как в стабильном, так и условно стабильном состоянии. Считается, что этот процесс в значительной степени обеспечивает поддержание иммунного состояния. Тем не менее, всегда сохраняется возможность реверсии возбудителя в бациллярную форму и развития болезни, особенно при возникновении дефектов в звеньях иммунной системы /А.Ж Мусин, 1985; В.С.Федосеев и др., 1985/. Доказано, что рецидивы туберкулеза у человека в пожилом возрасте, а также у инфицированных вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), возникают за счет активации и реверсии Л-форм возбудителя туберкулеза в остаточных туберкулезных изменениях. Это же явление лежит и в основе повторного возникновения туберкулеза в ранее оздоровленных стадах крупного рогатого скота.

Антигенный состав микобактерий туберкулеза. Антигены - генетически чужеродные вещества, индуцирующие иммунный ответ. Как правило, это высокомолекулярные соединения с массой порядка нескольких килодальтон (кДа). Специфичность иммунного ответа определяется особенностями последовательности аминокислот в молекуле антигена, наличием специфических остатков сахаров, а также формой молекулы, которые формируют антигенные детерминанты (эпитопы).

Микобактерии обладают весьма сложным антигенным составом и стимулируют иммунный ответ на множество антигенных компонентов, проявляющийся гиперчувствительностью замедленного типа, синтезом антител и некоторой устойчивостью к последующему заражению. Первые исследования позволили обнаружить у микобактерий разных групп общие и специфические антигены, определить белковую, полисахаридную, липидную природу некоторых из них.

Антигенный состав - важная таксономическая характеристика микобактерий туберкулеза. Его изучают с помощью поликлональных кроличьих, козьих, бычьих антисывороток, а также моноклональных антител /Сloss O et. al., 1980; Daniel T.M., Janicki B., 1978/. Важный момент получения антисывороток и проведения исследований - это использование препаратов с минимальной степенью денатурации, возникающей при инактивации микобактерий. Среди антигенов микобактерий обнаружены антигены, обще для представителей рода Mucobacterium, общие для определенных групп, специфичные для вида и даже для определенного штамма /А.П.Лысенко, Г.А.Карпова, Т.Н.Агеева, 1992; А.П.Лысенко, 1994; Harboe M. et. al., 1990/

Антигенный состав возбудителей туберкулеза достаточно постоянен и его вариации в пределах вида незначительны. Обнаружено более 100 индивидуальных антигенов, однако, лишь 20-25 играют роль в иммунном ответе при инфицировании крупного рогатого скота /Т.Н.Агеева, 1993; А.П.Лысенко, 1994/.

M.bovis, M.tuberculosis имеют 90-95% антигенного родства, в свою очередь с M.avium у указанных видов оно не превышает 70-80% и их можно четко дифференцировать по антигенному составу в серологических тестах.

Номенклатура индивидуальных антигенов зависит от метода их выявления, свойств и вида микобактерий. Так, антигены M.bovis идентифицированные по электрофоретической подвижности обозначаются MPB с указанием показателя подвижности (например, MPB 70), определенные в перекрестном электрофорезе с референс-сывороткой и антигеном BCG обозначаются, как, например, BCG60. В том случае, если установлена молекулярная масса белкового антигена он обозначается, как Р (protein), например Р24.

К важнейшим антигенам возбудителей туберкулеза относят антиген BCG60, являющийся липопептидогликаном с массой более 200 кДа. Антиген локализуется преимущественно в клеточной стенке, стимулирует выраженный иммунный ответ и встречается практически у всех видов микобактерий /Farbe I. et.al., 1986/.

Антиген 78 BCG, выделенный с помощью аффинной хроматографии, считается более специфичным для М.tuberculosis и M.bovis /Daniel T.M. et.al,.1982/. Представляет собой термолабильный гликопротеин с массой 28,5 – 35 кДа. Однако, по данным М.Нагboe (1985) он может давать перекрестные реакции с М. avium и M.smegmatis.

Особое значение для диагностики имеют видоспецифические антигены (характерные только для одного вида). Так, антиген MPB70 присущ только штаммам возбудителя туберкулеза бычьего вида и не встречается у M.avium и атипичных микобактерий, поэтому может использоваться для точной дифференциации причин иммунного ответа /Harboe M. et. al., 1990/. Антигены БЦЖ10, 81, 78, также как и 70, относят к группе преимущественно специфичных для возбудителей туберкулеза млекопитающих.

Нагревание разрушает многие термолабилъные антигены. Исследования Harboe (1984) показали, что при нагревании культурального фильтрата БЦЖ до 120⁰С большая часть антигенов теряет способность образовывать видимые преципитаты. В гретом культуральном фильтрате, как и в альттуберкулине Коха, превалировали антиген БЦЖ60 и антигенные компоненты, в основе которых были d-арабино-d-маннан и d-арабино-d-галактан.

Эпизоотология туберкулеза. Туберкулёз, вызываемый Mycobacterium bovis, одна из значимых проблем инфекционной патологии крупного рогатого скота. Серьезную опасность болезнь представляет здоровью других видов животных и человеку. Из 155 Стран-Членов МЭБ в 34, в том числе и в Беларуси, M. bovis спорадически выявляется у человека.

Считается, что в Республике Беларусь проблема приобрела особую актуальность после Великой отечественной войны и была связана с завозом крупного рогатого скота, поступавшего по контрибуции из Германии. Распространению инфекции способствовала разруха народного хозяйства. В 1949 году число неблагополучных пунктов достигла максимального значения – 2300.

Интенсивные мероприятия по борьбе с туберкулезом в республике начались в конце 50-х годов прошлого века и в основном базировались на регулярной туберкулинизации, изоляции или сдаче на убой реагирующих животных. Благодаря планомерной работе по борьбе с туберкулезом, эпизоотическая ситуация постепенно улучшалась, хотя периодически отмечался подъемы заболеваемости. Существенный перелом наступил в конце 80-х годов.

Объективно характеризует эпизоотическую ситуацию обнаружение туберкулеза на секции. Число случаев туберкулеза уменьшилось с 1988 года с 5077 до 282 случаев в 2000 г, а количество неблагополучных пунктов снизилось до 6-10.

Снизилось также и количество реагирующих на туберкулин животных, так если в 1989 году их было выявлено 76 тысяч реагирующих коров и из них 63 тысячи сданы на убой, то к 2000 году эти показатели заметно уменьшились и составили соответственно, 27 тысяч и 14 тыс. голов.

Основной особенностью эпизоотической ситуации по туберкулезу в республике является то, что основную массу реагирующих животных, выявляют в благополучных по туберкулезу хозяйствах /А.П. Лысенко и др., 1997; А.А.Холод и др., 1997; А.П. Лысенко, 2003/.

Установлено, что значительный вклад в развитие повышенной чувствительности крупного рогатого скота к туберкулину в благополучных хозяйствах вносят атипичные микобактерии, широко распространенные во внешней среде. При исследовании более тысячи проб из разных районов республики, была выявлена исключительно высокая насыщенность внешней среды, животноводческих ферм и кормов микобактериями. В ряде случаев на 1 см ² поверхности разных объектов ферм (кормушки, полы, поилки, проходы, почва выгульных дворов) находилось более 500 тысяч микобактерий /А.Э.Высоцкий, 2002/. Обнаружена корреляция степени загрязнения ферм микобактериями с числом положительно реагирующих на туберкулин животных. Однако во многих хозяйствах наряду с инфицированием атипичными микобактериями, встречаются также животные с высокой вероятностью инфицирования возбудителем туберкулез /Ю.Я. Кассич; А.П.Лысенко, 1994/. Причиной этого может быть высокая устойчивость возбудителя во внешней среде, приспособляемость к скрытому выживанию в организме, способность изменять вирулентность в зависимости от условий существования. Кроме того, существование неучтенных факторов эпизоотического процесса, слабое воздействие на звенья эпизоотической цепи, при осуществлении противотуберкулезных мероприятий, возможное влияние роста заболеваемости туберкулезом человека на эпизоотическую ситуацию в скотоводстве обуславливает высокую вероятность рецидивов болезни.

 

ДИАГНОСТИКА ТУБЕРКУЛЕЗА.

В комплексе мер борьбы с туберкулезом диагностике заболевания придается основное значение. Диагноз на туберкулез устанавливается комплексно на основании результатов аллергических, патологических и бактериологических исследований с учетом эпизоотологических данных. Клинические признаки заболевания в настоящее время встречаются редко; если даже и встречаются, то они нехарактерны (кашель, исхудание, увеличение лимфатических узлов и т.д.).

В качестве дополнительных методов диагностики туберкулеза применяют симультанную аллергическую пробу, серологическое и гистологическое исследование.

Диагноз на туберкулез крупного рогатого скота считается установленным в следующих 3-х случаях:

Ø Если у реагирующих на туберкулин животных при проведении контрольного диагностического убоя обнаруживают изменения, характерные для туберкулеза, о чем комиссионно составляется акт.

Если при убое на общем конвейере мясокомбинатов реагирующего на туберкулин скота обнаруживаются туберкулезные изменения на секции, о чем ОПВК мясокомбинатов информирует ветслужбу районов (сигналы) в графе «Обнаружены туберкулезные изменения у реагирующего на туберкулин скота», то такие моменты приравниваются к контрольному убою. Диагноз на туберкулез считается установленным.

При обнаружении изменений у скота на общем конвейере мясокомбинатов, числившегося по сопроводительным документам как здоровый скот, поступали в соответствии с указанием ГУВ Госагропрома БССР от 28.10.1986 года № 13-1/96 «О порядке действий при обнаружении туберкулеза в тушах убойных животных».

Если обнаруженные изменения характерны для туберкулеза, то с тушей поступают в соответствии с правилами ветеринарно-санитарной экспертизы: а) при незначительном поражении – только лимфатических узлов - и нормальной упитанности тушу, после зачистки отправляли в стерилизацию; б) при значительном поражении – генерализованная форма – или плохой упитанности тушу направляли в утилизацию. Давается «сигнальное» сообщение об обнаружении в туше из данного хозяйства туберкулезоподобных гранулем. Ветеринарная служба района совместно с ветеринарными специалистами хозяйства обязана в двухнедельный срок провести аллергическое обследование всего поголовья хозяйства на туберкулез, принять все меры по дифференциальной диагностике туберкулеза.

Ø При выделении микобактерий по культуральным, морфологическим и биологическим свойствам, характерным для возбудителя туберкулеза бычьего или человечьего видов (M. bovis или M. tuberculosis), у птиц – птичьего вида (M.avium). Причем у последних и при обнаружении микобактерий (т.е. красных палочек) в мазках-отпечатках из пораженных органов, то есть даже без культурального исследования.

Ø При положительных результатах биопробы с материалом от реагировавших на туберкулин животных, как следствие инфицирования морских свинок с материалом, содержащим M. bovis и M. tuberculosis, а при заражении материалом от птиц – гибель кур (биопроба на 6-9 месясчных курах), как следствие присутствия в материале возбудителя туберкулеза птичьего вида - M. avium.

У свиней диагноз на туберкулез у

⇐ Предыдущая567891011121314Следующая ⇒

Поделиться:

Воспользуйтесь поиском по сайту: