 |
Перечень вопросов к экзамену
|
|
|
|
1. Общие принципы биохимического исследования. Биохимические исследования на различных уровнях организации живой материи.
2. Центрифуга, ее устройство. Скорость осаждения частиц. Константа седиментации. Дифференциальное центрифугирование. Центрифугирование в градиенте плотности. Методы получения ступенчатых и непрерывных градиентов плотности.
3. Разделение белков путем осаждения. Растворимость белков при низкой концентрации солей. Высаливание при высокой концентрации соли.
4. Осаждение белков органическими растворителями. Осаждение белков органическими полимерами и другими веществами. Осаждение вследствие избирательной денатурации. Осаждение нуклеиновых кислот.
5. Особенности различных видов живых организмов в качестве исходного материала биохимических исследований. Разрушение клеток и экстракция. Способы разрушения клеток.
6. Растворы, используемые для экстракции. Буферные растворы и специальные добавки.
7. Классификация хроматографических методов. Классификация по принципу фракционирования. Классификация по способу элюции. Классификация по расположению неподвижной фазы.
8. Элементы теории хроматографической элюции. Хроматографический процесс. Хроматографическая зона. Концепция теоретических тарелок. Кинетическая теория хроматографии. Разрешение близко мигрирующих зон. Оптимизация условий фракционирования. Градиентная элюция. Хроматография макромолекул.
9. Техника колоночной хроматографии. Хроматографические колонки. Резервуары для элюента. Смесители. Внесение препарата в колонку. Перистальтические насосы. Детекторы. Коллекторы фракций. Вспомогательное оборудование.
10. Гель-фильтрация. Общая характеристика метода. Очистка и фракционирование макромолекул методом гель-фильтрации. Определение молекулярной массы. Области применения гель-фильтрации.
|
|
|
11. Распределительная хроматография. Нормальнофазовая и обратнофазовая распределительная хроматография. Методические особенности обратнофазовой гидрофобной хроматографии при низком давлении.
12. Адсорбционная хроматография. Сорбенты. Особенности хроматографии на оксиаппатите.
13. Тонкослойная хроматография. Приготовление пластинок. Нанесение препарата. «Проявление» пластинок (хроматографическая элюция). Обнаружение пятен или полос. Применение ТСХ.
14. Ионообменная хроматография. Ионообменники. Элюэнт. Ионные и неионные взаимодействия вещества и сорбента. Управление силой ионного взаимодействия.Применение статической ионообменной хроматографии. Выбор условий динамической ионообменной хроматографии. Способы элюции с ионообменника.
15. Аффинная хроматография. Применение. Матрицы, их активация. Спейсеры. Активированные спейсеры. Лиганды с групповой и индивидуальной специфичностью. Посадка лигандов.
16. Принцип электрофореза. Зональный электрофорез. Теория электрофореза в ПААГ. Разделение белков в присутствии ДСН.
17. Специфические электрофоретические методы: высоковольтный, проточный, двумерный электрофорез, диск-электрофорез. Изоэлектрическое фокусирование. Изотахофорез.
18. Иммунный электрофорез. Реакции антиген-антитело. Иммуноэлектрофорез в агаровых или агарозных гелях. Диффузия и преципитация в геле. Иммунофиксация. Ракетный иммуноэлектрофорез.
19. Спектрофотометрический метод анализа. Законы поглощения электромагнитного излучения. Молярный коэффициент поглощения. Оптическая плотность. Способы определения концентраций веществ. Фотоэлектроколориметры и спектрофотометры.
20. Флюорометрические методы анализа. Различные виды люминесценции. Основные закономерности молекулярной фотолюминесценции. Практическое применение метода.
|
|
|
21. Методы меченых атомов.Радиоактивные изотопы, используемые в биологии. Измерение радиоактивности. Авторадиография. Введение радиоактивной метки в биологические препараты in vivo и in vitro. Радиоиммуноанализ.
22. Оптимизация методов выделения и очистки биологических макромолекул и соблюдение рекомендаций Оптимизация методов выделения и очистки биологических макромолекул и соблюдение рекомендаций.
Темы курсовых работ
1. Очистка ФМСФ-КП методом гель-фильтрации.
2. Очистка ФМСФ-КП методом ионно-обменной хроматографии.
3. Очистка ФМСФ-КП методом афинной хроматографии.
4. Современные биохимические анализаторы: обзор.
5. Ферментный электрод.
6. Время-пролетная масс-спектрометрия.
7. Жидкостная хроматография высокого давления.
8. Полимеразная цепная реакция.
9. Твердофазные ферментные реакции.
10. Множественные квадрупли в масс-спектрометрии: преимущества и недостатки.
11. Методы определения кинетико-термодинамических свойств ферментов.
12. Методы изучения мембранных компонентов.
13. Дифференциальное центрифугирование: способы и современное приборное обеспечение.
14. Использование радиоактивных меток в анализе.
Сведения о переутверждении программы на очередной учебный год и регистрации изменений
| Учебный год | Решение кафедры | Внесенные изменения | Номера листов (страниц) | ||
| заменен-ных | новых | аннули-рованных | |||
| 20__/20__ | Протокол № ____ от «____»____________20_ г. Зав. кафедрой ______________ | ||||
| 20__/20__ | Протокол № ____ от «____»____________20_ г. Зав. кафедрой ______________ | ||||
| 20__/20__ | Протокол № ____ от «____»____________20_ г. Зав. кафедрой ______________ | ||||
| 20__/20__ | Протокол № ____ от «____»____________20_ г. Зав. кафедрой _____________ _ | ||||
| 20__/20__ | Протокол № ____ от «____»____________20_ г. Зав. кафедрой ______________ | ||||
Учебная программа составлена на основании ГОС ВПО 2000 г. для специальности 020208 – «Биохимия»
Программу составил:
1. Соловьев В.Б., канд. биол. наук, доцент _________________________
(подпись)
|
|
|
