 |
Вит С,Д,бетакаротин,убихиноны.
|
|
|
|
Вит.С-комбинир-ный синтез,преим-но хим.процесс.Одна из стадий-транс-ция Л-сорбита в Д-сорбозу осущ-ся с уч-ем уксуснокислых бак-й Gluconobacter oxydans.Внедр-ся м-д за счет енолизации 2-кето-Л-гулоновой кислоты, кот.получают в 2ст:1 ст-окисл-Д-глю в 2,5-дикето-Д-глюконовую кислоту(2,5ДКДГК) с пом-ю м/о Aervinia. 2ст – 2,5 ДКДГК биотрансф-ся в 2-кето-Л-гулоновую кислоту с пом-юCorynebacterium.Могут прим-ся рекомбин-ные штаммы с генами для синтеза 2,5ДКДГК и ее трансф-ции в 2-КГК.Это позв-ет свести биосинтез к одной стадии.
Усл-я культивир-я при получении Л-сарбозы:продуцент Gluconobacter oxydans выращ в ферментере период д-я с мешелкой, барботером в условиях усил-ной аэрации в теч-е 20-40 часов.ПС:кукуруз.экстракт, дрожж.экстракт до 20%V.Выход 98%.Непрерыв СП-б культ-я в апп-те колонного типа в1,7 раз увелич скорость обр-я сарбозы.
Вит.Д.Биотех.путем получают предшест-к-эргостерин-осн.комп-т мембран Candida.Продуцентами м.б.:Saccaromyces cerevisia,Cryptococcus curvatus, Penicillum,Аspergillus.ПС-отходы молоч и хлопковой промыш-ти,содержитС,З, избыток сахаров и дефицит N.Фермен-ция 12-20 часов.Для увелич-я эффект-ти необх хор аэрацияДля получ-я кристалл-го вит биоМ гидр-ют, охл-ют, фил-ют, пол-ют спирт экстакт, кот омыляют, кристаллизуют, очищ-ют, растворяя в эфире, удаляют эфир. Кр.ос-к р-ют в масле,затем эргостерин облучают УФ, получая вит Д.
Кл-ция каротиноидов:каротины и ксантофиллы.Каротиноиды – это политерпены,относ-ся к природным пигментам.
Бета-каротин-м.получить тонким орг синтезом,что рентабельнее м/б синтеза,т.к.метод исп-еб мицелиальные грибы Blakslea triposa,кот имеют + и – пол.Выход 304 г/л.ПС:кукуруз-соевая,раст масло,ПАВ и стимулятор-бета-ионон.2 ст:1-+ - штаммы выращ по отдел-ти.2 – совместное выращ-е при 26 градусах и интенсив аэрации 6-7 сут.Стим-р+после интенсив-го роста биоМ.Б-каротин экстрагир-ся подсолнеч маслом.М.доб-ть целлобиозу в кач-ве ист-ка углерода-выход увелич в 7 раз и выр-ся фермент бета-глюкозидаза. Получают вит А обр-кой ферментом.
|
|
|
Убихиноны-коферменты Q.Пол-ют эктракцией из биоМ продуцента.Продуцент –кандида, преобл-етКУ-10, Gluconobacter oxydans-ку10, получают из отходов вит С.Ист-ми м.б.каллус риса, бак-и дрожжи, дрожжеподоб м/о.
Ферменты.
-это специф катализаторы белк природы, выр-мые кл-ми и тканями жив орг-мов.
Инженер.энзимология -с-ма методов пол-я, оч-кистабил-ции и примен-я ферментов. Задачи -констуир-е биоорг-х катал-в с задан-ми св-ми на основе ферментов и ферментных комплексов; разр-ка новых биотех пр-сов основанных на порим-и фермент-х кат0в.
Ф-ры выс выхода цел.прод-та:выс субстрат специф-ть фермент-го катализа,выс каталит актив-ть. Методы получ:выдел-е из тканей, хим синтез, м/б синтез.+ м/б-богат-во ассорт-та ферм-в, синт-х м/о., возмож-ть управ-я проц-м и составом, выс скорость размнож-я и недорогие субстраты.
Кл-ция:
оксиредуктазы,
трансферазы,
гидролазы (взаим-ют с пептидами, гликозидами и др. с уч-ем воды)
1.гликозидазы,-амилазы, целлюлазы и пектиназы
амилазы-декстоназа-продуцент-P/purpyrogenum,
пуллоназа-Clebsiela
Целлюлазы:инвертазы-аспергиллюс
Пектиназы:полигалактуроназа и пектинэстераза-
фузариум, эрвиниа, клостридиум.
2. протеиназы-аспергиллюс, актиномицеты, клостридии,
еш.коли и др.
3.липазы –аспергиллюс, ризопус, мукор. Кандида.
лиазы,
изомеразы,
синтетазы.
Тех-гия -2 сп-ба:1). Твердофаз поверх-ная ферм-ция, глубинная ферм-ция. ПС стерил-ют при 105-140 град 60-90 мин, охл-ют до 30 град.Параметры:В=58-60%, Т=28-32 град, Длит-ть=36-48 ч.Аппарат для ферм-ции разделен перфорир-ми пластинами.Выросшая к-ра-конгломерат из набухшх ч-ц среды,плотно связ-х разросшимся мицелием.Массу изм-ют дробилками,для предотвр-я инактивации массу подсуш-ют до ост влаги 10-20%.
|
|
|
Иммобилиз-ные фер-ты.Иммоб-ция- проц-с прикреп-я ферм-в к поверх-ти мат-ла, вкл-е в п/мер.мол-лы, полые вол-на и мембр.капсулы, а ткже поперечная хим сшивка.Глав+ им.фер-в – возм-ть отделить гетероген кат-р от реакц среды, что обуславливает:возм-ть ост-ки р-ции в люб момент. Возм-ть повтор исп-я кат-ра, воз-ть получ-я конч пр-та, не загряз-го ферм-м.
М-ды имм-ции:адсорбц связ-е фер-та с НР носит-лем, ковалент.связ-е, связ-е отдел-х мол-л с обр-ем агрегатов.Ферм-ты преобр-ют:чтаб-ть, возм-ть функц-ть в невод.среде,более шир зоны оптимума по Т и рН.
М-ды иммоб-ции:физ и хии.
Физ-отсут-е ковалент связи м/ферм и носителем.Сп-бы:адсорбция на повер-ти, включ-е в поры геля, отдел-е от смеси через мембрану, введение в 2х фазную реакц.среду, в кот он р-ся, но нах-ся в одной из фаз.
Хим:ковалент связь есть-выс проч-ть конъюгатов.Осн треб-я к мат-лам для им-ции:вы схим и биол ст-ть, мех проч-ть, достаточная прониц-ть для фермента и субстратов, бол удел поверх-ть и выс порист-ть, легкая акт-ция, выс гидрофил-ть и дешевизна.Носители:природ-целлюлоза, хитин,декстран, агар, губчатый крахмал; синт- пр-ныйе акрил к-ты.
Вакцины,сыворотки.
Вакцины-обширный класс препаратов, несущих АГ-ные приз-ки одного или неск-х возб-лей инф-го заб-я. Исп-ся для созд-я актив-го иммун-та.
Комп-ты вакцины:ДК-специфич АГ, конс-ты и стаб-ры полимер носит-ль.
АГ классич-х в-н:живые ослаб-ные м/о, убитые микроб кл-ки или виру.ч-цы, АГ-ные стр-ры извл-ные из м/о, прод-ты жизнедеят-ти м/о.
Кл-ция: живы е и неживые
Аттенуир-ные(ослаб) классич синтетич
Дивергентные молекуляр искус-х АГ
Рекомбинантные корпускуляр ген-инженер
Рибосомаль
ДНК-вак-ны
а/идиотипические
Живые: Аттен-ные – из штаммов искус-но ослаб-х путем культивир-я возб-ля в неблагопр-х усл-ях, прим вир бешенства.
Дивергентные – из естесст-х штаммов, близкородств-х бозб-лю заб-я, однако отл-ся от него низ вирулен-ю для чел-ка, прим вир оспы коров.
Рекомбинантные – с пом-ю ген инженерии.Для получ-я ис-ют штамм, в геном кот встроен ген, кодирующий чужерод белок-АГ.Выз-ет им-т и к штамму реципиенту и к встроен-му чужерод АГ.Прим, рекомб вир оспы со встроенным геном, кодир-м АГ HBs вир гепВ.
Получ-е:в феремнтере, в жид среде, V 1-3 кб метра, выращ-ся чист ослабл к-ры.Этапы:выращ-е, стаб-ция, стандарт-ция, лиофил высуш-е.Конс-т не доб-ют.Хранят 1-2 г при 0-8 град.Вирусные пол-ют культ-ем в курином эмбрионе или на культ-х кл-х жив-х.
|
|
|
Неживые:Корпускуляр – инактивир-ные физ или хим возд-ми к-ры патоген-х или вак-х штаммов.М.б.цельноклеточ и цельновирионными.Доб-ют конс-ты.Пример, коклюш, грипп, гепА, герпес, энцефалит.
Молекуляр - изолир-ные поверх-ные стр-ры м/о, обл-щие протектив-й акт-тью.Пр-во:наработка биоМ кл-к возб-ля, дезинтеграция кл-к и выд-е протектив-го АГ, оч-ка АГ, стер-ция в-ны, ст-ция и к-ль кач-ва.Низ иммуногенность,поэтому доб-ют адьюванты – гели неорг солей Аl, мурамидипептид, Фейнда – эмульсия мин.масла.
Синт. – на основе искусств-х АГ-в.Комп-ты:АГ или его детерминанта в молекуляр виде, п/мер носитель, адьювант.Получ-е:выд-е АГ, ан-з первич стр-ры мол-лы, разр-ка синтеза.
Ген-инженер. – Сод АГ возб-лей получ-х ген-инж.путем.Получ-е:выд-е или получ-е гена, внес-е гена в эспрессир-ся вектор(напр, плазмида), внедр-е вектора в кл-ку продуцента, отбор клонов, испыт-е иммуноген актив-ти АГ, культивир-е выбр-го клона, наработка и выд-е протектив-го АГ, проверка иммуноген актив-ти.
Рибосомал. – сост из рибосом м/о возб-лей.»Рибомунил» пример.Получ-е:накоп-е микроб биоМ, разруш-е бакт-х кл-к, выд-е рибосом,проверка иммунолог-й акт-ти.
Ассоциир-ные - м.вкл-ть как смеси однород Аг, так и АГ раз типов.
Сыв-ки. Сыв-ка крови – это плазма без фибриногена. Сохр-на бол часть АТ, вы ст-ть.Для созд-я пассив им-та.Пол-е:вакцинация лошадей-из крови выд-ют плазму, очищ от фибриногена.Др сп-б-из к-р кл-к жив-х.Необх.полн.стерил-ть.ПС д.сод-ть глю,ЖК, а/к-ты, неорг ионы, микроЭ, сывороточ.белки и липиды.Культивир-е при 37 град.
|
|
|
