Занятие 27. Туберкулез. . Бактериологическая диагностика болезни
Занятие 27. ТУБЕРКУЛЕЗ. БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА БОЛЕЗНИ Задание. 1. Освоить методику изготовления мазков из патологического материала для исследования на туберкулез мокроты, молока, мочи и кала. 2. Окрасить приготовленные мазки по Циль — Нильсену и провести их микроскопию. 3. Микроскопия готовых окрашенных мазков с возбудителем туберкулеза. Основное оборудование и материалы. Молоко, моча, кал, мок рота для исследования. Предметные стекла, набор красок для окрашивания по Циль—Нильсену, бактериологические петли, спиртовые или газовые горелки, антиформин, дистиллированная вода, ванночка, мостик для окрашивания мазков, фильтровальная бумага, мерные цилиндры, колбочки, бактериологические чашки, 25% раствор хлористого натрия, марля, воронки, спирт, эфир, серная кислота, физраствор, стерильные ступки с пестиками, микроскопы, иммерсионное масло, центрифуга с набором центрифужных стаканчиков или пробирок. Готовые мазки с возбудителем туберкулеза. Место занятия. Лаборатория техникума. А Методика проведения занятия. Преподаватель напоминает учащимся, какой патологический материал берут для исследования на туберкулез, показывает методику приготовления мазков из молока, мочи, кала и мокроты, напоминает учащимся методику окраски мазков по Циль — Нильсену, знакомит с морфологией возбудителя туберкулеза. Учащихся разбивают на группы по три человека. Каждый учащийся изготовляет мазки из молока, мочи и кала, окрашивает их по Циль — Нильсену и микроскопирует. В заключение преподаватель раздает готовые мазки с возбудителем туберкулеза; учащиеся микроскопируют их и зарисовывают микрокартину.
Изготовление мазков из патологического материала для исследования на туберкулез. Для исследования на туберкулез в лабораторию направляют следующий материал: при подозрении на туберкулез легких — мокроту, взятую от животного в кювет (тарелку) во время искусственно вызванного кашля; при подозрении на туберкулез вымени — молоко из пораженных долей вымени. 9 Посылают также кал, мочу, истечение из половых органов, сперму и т. п. От павших или убитых животных посылают кусочки пораженных органов и тканей со свежими неинкапсулированными и необызвествленным^ очагами, лимфатические узлы/Трупы птиц посылают целиком. Патологический материал доставляют в лабораторию в свежем виде или консервируют 30%-ным водным раствором глицерина. Молоко посылают в количестве 150—250 мл в стерильных флаконах. Перед взятием пробы вымя и руки тщательно промывают и дезинфицируют 70%-ньгм спиртом. Истечение из половых органов берут стерильной И1ЖКОЙ в объеме 3—5 мл после тщательного обмыва- НИИ наружных половых органов. Кал берут непосред- » I пенно из прямой кишки в количестве 30—50 г. Мочу • опирают во время мочеиспускания в стерильную по- I уду (200 мл). Мазки из мокроты, гноя и слизи готовят путем нане- м'нии на предметное стекло желтоватых или буроватых ч. нчиц (комочков), которые выбирают из исследуемого v т риала. Эти частицы раздавливают между двумя пред- \ гными стеклами и размазывают материал. Можно при- < и гнуть к методу «обогащения». Для этого мокроту починают в специальную баночку с битым стеклом и гомо- и'мизируют путем встряхивания, после чего добавляют |}- > иной объем 3—6%-ного раствора серной кислоты II снова встряхивают. Затем материал центрифугируют 10 15 мин при 2000 об/мин. Из осадка делают мазки. Молоко предварительно центрифугируют при 3000 об/ мин в течение 30 мин. Мазки готовят из верхнего слоя и из пелдка. После высушивания мазки из молока обрабатывают эфиром 30 мин для удаления жира. Для того чтобы легче было обнаружить туберкулезные микробы, молоко центрифугируют 30 мин при 3000 об/мин, средний слой удаляют, а верхний и нижний смешивают. К 5 мл мой смеси добавляют 5 мл спирта-ректификата, 5 мл > фира и 10 мл 25 %-ного раствора антиформина, взбалтывают и ставят в термостат до тех пор, пока эта смесь не приобретает гомогенный (однообразный) вид. 11осле этого доливают к смеси 25 мл физраствора и центрифугируют 30 мин при 3000 об/мин. Осадок промывают физраствором и изготовляют мазки.
Мочу многократно центрифугируют, при этом верхний слой осторожно сливают, а к осадку прибавляют новую порцию мочи. Затем к осадку добавляют 3—5 мл 3— О %-ного раствора серной кислоты, встряхивают 5—10 мин ^-центрифугируют 10 мин при 2000 об/мин. Мазки делают из осадка. Кал перед исследованием тщательно растирают в стерильной ступке и добавляют 25 %-ный раствор хлористого натрия до получения жидкой консистенции. Полученную массу фильтруют через марлю. К 5 мл фильтрата добавляют 2 мл эфира (можно бензина, лигроина) и центрифугируют при 3000 об/мин в течение 20 мин. Из осадка изготовляют мазки (с нижней части верхнего слоя). Приготовленные мазки высушивают, фиксируют и окрашивают по способу Циль—Нильсена (см. занятие 3). В окрашенных по этому способу мазках возбудитель туберкулеза имеет вид небольших тонких прямых или слегка изогнутых палочек, окрашенных в красный цвет. Некислотоустойчивые микробы при этом окрашиваются в синий цвет (цветная вкладка).
Воспользуйтесь поиском по сайту: ![]() ©2015 - 2025 megalektsii.ru Все авторские права принадлежат авторам лекционных материалов. Обратная связь с нами...
|