 |
Контрольні питання. Заняття № 2. Зміст заняття. Самостійна робота студентів. Оснащення заняття. Методика виконання завдання
|
|
|
|
КОНТРОЛЬНІ ПИТАННЯ
· Основні правила роботи і техніки безпеки в мікробіологічній лабораторії;
· Механічні частини світлового мікроскопу;
· Оптичні частини світлового мікроскопу;
· Як підготувати мікроскоп до роботи?
· Принцип роботи електронного мікроскопу;
· Будова люмінесцентного мікроскопу;
· Одиниці вимірювання розмірів бактерій, дріжджів, рикетсій, мікоплазм та вірусів;
· Визначення загального збільшення світлового мікроскопу;
· Хід світлових променів в сухому та імерсійному об'єктивах;
· Які фізичні властивості скла, повітря і імерсійної олії враховуються під час мікроскопії з імерсійною системою?
· Техніка мікроскопії бактерійних препаратів з імерсійною системою;
· Основні форми бактерій (кулясті, паличкоподібні, звивисті);
· Що дає імерсійна система під час мікроскопії бактерійних препаратів?
· Хто вперше виготовив мікроскоп?
· Вклад в розвиток ґрунтової мікробіології в Росії С. Н. Виноградського, В. Л. Омелянського, С. П. Костичева, В. С. Буткевича;
· Значення мікробіології у природі та сільському господарстві;
· Місце мікробіології у системі звичайних та спеціальних наук;
· Значення робіт Л. Пастера, Р. Коха, І. Мечнікова, Ценковського в розвитку мікробіології.
Заняття № 2.
Тема: Виготовлення мікробіологічних препаратів - мазків і фарбування їх простим способом.
Мета заняття:
1. Ознайомити студентів з фарбами, які використовуються для фарбування бактеріальних препаратів-мазків простим способом.
2. Засвоїти техніку виготовлення бактерійних препаратів — мазків і фарбування їх простим способом.
ЛІТЕРАТУРА: II. 42-46; VI. 21-24; VІІ. 35-36
|
|
|
ЗМІСТ ЗАНЯТТЯ
Викладач проводить опитування студентів з пройденого та наступного матеріалу знайомить з правилами використання фарб, показує техніку виготовлення препаратів — мазків з чистої культури мікроорганізмів, а також з зубного нальоту, демонструє техніку фарбування їх простим способом.
САМОСТІЙНА РОБОТА СТУДЕНТІВ
Кожен студент самостійно:
- готує препарати з чистої культури бактерій і з зубного нальоту; фарбує їх простим способом; мікроскопує та робить малюнки у зошиті.
-
ОСНАЩЕННЯ ЗАНЯТТЯ
Забезпечити кожного студента:
- мікроскопом, предметним склом, бактеріологічною петлею, спиртівкою, імерсійною олією, фільтрованим папером, практикумом та методичними вказівками.
Забезпечити кожних 2-3 студентів:
- культурою мікроорганізмів, склянкою з дезрозчином для використаних препаратів, фарбуючими розчинами (метиленова синь, карболовий фуксин), олівцем по склу, ванночкою з місточком, пастерівськими піпетками, водою для промивання.
МЕТОДИКА ВИКОНАННЯ ЗАВДАННЯ
Виготовлення бактеріального препарату — мазка. Бактерійний препарат — мазок готують на чистому знежиреному предметному склі. Знежирення здійснюється такими способами:
а) зануренням скла в розчин спирт — ефір 1: 1;
б) над полум'ям спиртівки (проводячи над полум'ям поверхню скла);
в) протиранням скла серветкою обробленою господарським милом.
Для рівномірного розподілу культури мікроорганізмів взятих з щільного поживного середовища, використовують краплину дистильованої води.
Культуру мікробів розподіляють бактеріологічною петлею по склу рівномірним тонким шаром на площі 1-2 см2.
Під час взяття культури мікроорганізмів з рідкого середовища використовують пастерівську піпетку або бактеріологічну петлю.
Відбір всього матеріалу для дослідження проводять над полум'ям спиртівки, бактеріологічну петлю до і після використання пропалюють. Потім препарат висушують на повітрі при кімнатній температурі.
|
|
|
Наступний етап - фіксація препарату-мазка, який виконується фізичним або хімічним методом.
Хімічний метод заснований на здатності деяких речовин віднімати воду (гідрофільні властивості) - спирти, ацетон, ефіри або їх суміші.
Фізичний метод - термічна обробка препарату (60оС), який використовується шляхом прогрівання зворотної сторони препарату 3-5 разів над полум'ям спиртівки.
Контроль за температурою здійснюється шляхом доторкування предметного скла до тильної сторони долоні.
Фіксація препарату переслідує мету: закріпити мікроби на склі, вбити бактерії для запобігання зараження і забруднення мікрофлорою оточуюче середовище, розруйнувати оболонку клітини для кращого проникнення фарби.
Фарбування.
Розрізняють прості, складні і спеціальні способи фарбування мікроорганізмів.
Просте фарбування дозволяє побачити форму і розмір бактерій, взаємне розміщення, дати родову назву мікроорганізмам.
Простий спосіб фарбування передбачає використання однієї фарби: карболового фуксину (експозиція 1-2 хвилини) або метиленової сині (експозиція 3-4 хвилини).
Після закінчення зазначеного терміну фарбу змивають, препарат висушують фільтрованим папером і проводять мікроскопію. Роблять малюнки у зошиті.
|
|
|
