 |
Обладнання заняття. Методика виконання завдання. Техніка посіву. Етап II. Самостійна робота студентів. Поживні середовища і характер росту мікроорганізмів
|
|
|
|
ОБЛАДНАННЯ ЗАНЯТТЯ
Забезпечити кожного студента: спиртівкою, бактеріологічною петлею, штативом, скляним шпателем, пастерівською піпеткою, стерильними середовищами в пробірках і бактеріологічних чашках МПБ, МПА, МПЖ, картопля, знежирене молоко та чистими культурами №183 - Вас. mycoides, №86 - Вас. anthracoides, №104 - Вас. pseudoantracis, №720 - Вас. sublitis, №181 - Вас. mesentericus, №31- Escherichia coli.
Викладача забезпечити тим же у одному екземплярі.
МЕТОДИКА ВИКОНАННЯ ЗАВДАННЯ.
В бактеріологічних лабораторіях мікроорганізми культивують на поживних середовищах. Для того, щоб отримати чисту культуру, досліджуванні мікроорганізми висівають у стерильних умовах на стерилізовані поживні середовища.
Для посіву необхідно мати поживне середовище в лабораторній посудині, зручної для роботи, і інструменти посіву - бактеріологічну петлю, пастерівські піпетки, скляний або металевий шпатель.
Викладач демонструє інструменти та техніку посіву на рідкі, напіврідкі і густі поживні середовища.
Після висіву пробірки і чашки ставлять в термостат (шафа, в якій автоматично підтримується. постійна температура). Звичайно посіви витримують при 370С впродовж доби.
Для культивування анаеробів пробірки або чашки розміщують в ексикаторі, який з`єднаний з вакуум-насосом або має на дні хімічний поглинач кисню. Ексикатор ставлять в термостат.
Інколи анаероби культивують в герметичне закритій посудині разом з аеробами. Аероби використовують весь кисень, і тільки тоді починається ріст анаеробів.
ТЕХНІКА ПОСІВУ
Етап І.
1. Пробірку з бактеріальною культурою беруть у ліву руку знизу так, щоб поверхню середовища було добре видно.
|
|
|
2. У праву руку як олівець беруть петлю або піпетку.
3. Петлю або піпетку фламбірують.
4. Мізинцем правої руки виймають пробку.
5. Петлю охолоджують об край агару або скла.
6. Петлею набирають наліт мікроорганізмів.
7. Закривають пробірку і ставлять її в штатив.
Етап II.
1. Пробірку з чистим поживним середовищем беруть у ліву руку знизу так, щоб поверхню середовища було гарно видно.
2. Мізинцем правої руки виймають пробку.
3. Петлю вводять в пробірку і матеріал на густому поживному середовищі розтирають по поверхні зигзагоподібними рухами, у рідкому середовищі -круговими рухами, а у напіврідкому (МПЖ) проколом до дна пробірки (посів стовпчиком).
Посів з рідкого поживного середовища роблять пастерівськими піпетками. Пипетку фламбірують. Стерильним пінцетом відламують кінець. Стерильно набирають досліджуваний матеріал. Переносять його на стерильне поживне середовище. Пипетку опускають у дез розчин.
САМОСТІЙНА РОБОТА СТУДЕНТІВ
Кожний студент проводить висів 5-ти бактеріальних культур на 5 поживних середовищах. Результати роботи студенти заносять у нижче наведену таблицю.
ПОЖИВНІ СЕРЕДОВИЩА І ХАРАКТЕР РОСТУ МІКРООРГАНІЗМІВ
| Назва поживного середовища | Назва мікроорганізмів, що висіваються (латинська) | № штамів | Характер росту мікроорганізмів |
Примітка: стовпчик 4 заповнюється на наступному занятті.
КОНТРОЛЬНІ ПИТАННЯ
1. Який лабораторний посуд використовується для культивування мікроорганізмів?
2. Які інструменти використовують для посіву мікроорганізмів на поживні середовища?
3. Порядок дій під час посіву мікроорганізмів з щільного на щільне поживне середовище.
5. Порядок посіву з щільного поживного середовища на рідке.
6. Порядок посіву з рідкого поживного середовища на рідке.
7. Фізичний метод вирощування анаеробів.
|
|
|
8. Хімічний метод вирощування анаеробів.
9. Біологічний метод вирощування анаеробів.
Заняття № 7
Тема: вивчення культуральних та біохімічних властивостей мікроорганізмів, яких вирощено на поживних середовищах.
Мета заняття:
1. Засвоїти методи опису, характеру росту бактерій на рідких і щільних поживних середовищах (макроскопічні та мікроскопічні).
2. Вивчити деякі біохімічні властивості мікроорганізмів.
3. Навчитися визначати вид бактерій за характером росту на поживних середовищах.
4. Ознайомитися з методами виділення чистої культури мікроорганізмів.
ЛІТЕРАТУРА:
ІV 64-68; VІ 107-11О;
САМОСТІЙНА РОБОТА СТУДЕНТІВ
Кожен студент вивчає макро- та мікроскопічні культуральні та біохімічні ознаки бактерій, які зросли на рідких та щільних поживних середовищах, готує мазки з кожної культури, забарвлює їх за методом Грама. Мазки розглядають під мікроскопом і замальовують у зошит.
ОСНАЩЕННЯ ЗАНЯТТЯ.
Забезпечити кожного студента: культурами, які зросли на поживних середовищах: МПА, МІІБ, МПЖ, картоплі, молоці, бактеріологічною петлею, мікроскопом, спиртівкою, фільтрувальним папером, предметним склом, пастерівською піпеткою, пінцетом.
На дві людини - набір фарб, полоскальницею, сірниками, імерсійною олією, дезрозчином, спиртом, стерильною водою.
Тим самим забезпечити в одному примірнику викладача.
|
|
|
