 |
Определение групп крови с помощью стандартных сывороток
|
|
|
|
Определение количества гемоглобина в крови по методу Сали
Определяют уровень НЬ в крови колориметрическим методом, основанном на сравнении цвета исследуемого раствора с цветом стандартного.Для этого используется гемометр Сали, состоящий из темного стекла,штатива, трех пробирок. В Среднюю пробирку наливается исследуемый раствор. В двух крайних находится стандартный раствор хлорида гематина, содержаший 167 г/л (16,7г%) гемоглобина.
В среднюю пробирку наливаем 0,1 нормальный раствор соляной кислоты до цифры 2. В капилляр гемометра набирается кровь до единственной круговой метки- 20 куб.мм. и осторожно выдуть кровь в пробирку Содержимое пробирки встряхивать, ударяя пальцем по ее концу. Пробирку с исследуемой кровью поместить в гемометр и выжидать 5-10 мин. Затем раствор в пробирке развести дистиллированной водой, пока цвет не сравняется со стандартным,примешивая палочкой. Цифры на средней пробирке гемометра, стояшие на уровне нижнего мениска полученного раствора гематина, показывают абсолютное содержание НЬ в исследуемой крови.
Вычисление цветового показателя крови
Цветовой показатель крови (ЦП) показывает содержание гемоглобина в одном эритроците исследуемой крови по сравнению с нормой.
ЦП=Hb/число эр в 1 мкл (первые 3 цифры) * 3
Норма=0,8-1,0
Если цветовой показатель больше 1,0 то это Гиперхромия
Если меньше 0,8 то Гипохромия
3.Подсчёт лейкоцитарной формулы, её состав
Лейкоцитарной формулой называют процентное соотношение отдельных форм лейкоцитов крови. Для точного ее вычисления нужно просмотреть не менее 200 лейкоцитов. Лейкоциты в зависимости от плотности распределяются в мазках неравномерно: нейтрофилы, базофилы, эозинофилы — по периферии, ближе к краям; моноциты, лимфоциты — ближе к середине.
|
|
|
По Шиллингу определяют количество лейкоцитов в четырёх участках мазка (четырёхпольный метод). Проводят подсчет по верхнему и нижнему краю мазка, передвигая мазок по зигзагообразной линии. Считают три поля по самому краю в горизонтальном направлении, затем — три поля, направляясь к середине мазка, и т. и. Всего в мазке подсчитывают 100—200 клеток.
Лейкоцитарная формула:
Нейтрофилы- 60 %: сегментоядерные 56%
Палочкоядерные 4%
Лимфоциты- 25-30%
Моноциты- 8-10%
Эозинофилы- 2%
Базофилы 0-1%
Гемолиз. Изучение различных видов гемолиза.
Для определения в клинической практике осмотической резистетности каплю крови помещают в растворы различной степени гипотетнсоти,через час наблюдают налтчие или отсутсвие гемолиза. Показателем стойкости является определенная концетрация гипотонического раствора в которой происходит гемолиз,различают:
· Минимальную границу осмотической стойкости-это такая концетрация в которой гемолизируют самые стойкие эритроциты(0,48-0,44% раствор NaCl)
· Максимальная граница осмотичекой стойкости-это та,концетрация раствора NaCl
в которой гемолизируют все эритроциты.(0,28-0,34 % раствора NaCl)
При наличии гемолиза раствор становится розово- прозрачным,
При отсутсвие гемолиза раствор становится розово- мутный.
Определение границ осмотичекой стойкости эритроцитов
Наливаем в пробирки раствор NaCl различной концетрации и смотрим результат:
1. 5 мл 0,9% раствор NaCl- Гемолиза нет
2. 5 мл 0,7% раствор NaCl-Частичный Гемолиза
3. 5 мл 0,48% раствор NaCl- Частичный Гемолиза
4. 5 мл 0,28% раствор NaCl- Гемолиза есть
5. 5 мл дистиллированная вода- полный гемолиз(лаковая кровь)
6. 4 мл 0,9% раствор NaCl+1 мл эфира – полный Гемолиз
Определение границ осмотической резистентности эритроцитов
|
|
|
Для работы необходимы штатив с пробирками, растворы поваренной соли 0,9%, 0,7%, 0,48%, 0,32%, эфир, капилляр для взятия крови. В 4 пробирки наливают по 5 мл раствора поваренной соли указанных концентраций, в 5 пробирку наливают дистиллированную воду, в 6 пробирку - 4 мл 0,9% р-р NaC1 + 1 мл эфира. Во все пробирки добавляют по 20 куб.мм крови, перемешивают и оставляют в штативе на час. По истечении часа наблюдают изменения в пробирках.
В 1 и 2 пробирках с концентрацией NaC1 0,9% и 0,7% раствор мутный, гемолиз не наблюдается в связи с тем, что гемолиз начинается только с концентрации NaC1, равной 0,48% (это минимальная граница осмотической стойкости эритроцитов).
В 3 пробирке раствор менее мутный, но не полностью прозрачный, при концентрации NaC1 происходит гемолиз нестойких эритроцитов, т.е. неполный гемолиз.
В 4 пробирке (NaC1 0,32%) происходит полный гемолиз (максимальная граница осмотической стойкости эритроцитов).
В 5 пробирке происходит полный осмотический гемолиз.
В 6 пробирке имеет место химический гемолиз.
Определение групп крови с помощью стандартных сывороток
| группа | Антигены | антитела |
| I (0) | - | α, β |
| II (A) | A | B |
| III (B) | B | A |
| IV (AB) | A,B | - |
Для определения группы крови необходимы стандартные сыворотки
1,2,3 групп крови.
1. Добавить в каждую каплю сыворотки каплю крови, перемешать(соотношение сыворотки и крови 10:1).
2. Подождать пять минут, периодически покачивая пластинку. Группу крови определяют по наличию реакции агглютинации.
4.Если реакция агглютинации не произошла ни в одной капле сыворотки
– значит группа крови 1, если реакция произошла 1 и 3 капле сыворотки – это группа крови 2. Если реакция
произошла в 1 и 2 каплях – группа 3. И наконец, если реакция произошла во
всех трех каплях сыворотки – это значит кровь имеет 4 группу.
|
|
|
