 |
40. Забор материала, приготовление мазков и нативных препаратов для исследования на трихомонады.
|
|
|
|
40. Забор материала, приготовление мазков и нативных препаратов для исследования на трихомонады.
Принципы лабораторной диагностики трихомониаза мало чем отличаются от таковых при гонорее.
Материал получают при помощи гинекологического пинцета, желобоватого зонда, ложечки Фолькмана, одноразовых тампонов и щеточек.
Микроскопия основана на обнаружении возбудителя в нативных или окрашенных мазках: метиленовым синим, бриллиантовым зеленым, по Граму, а также Романовскому–Гимзе, Лейшману–Романовскому.
Важно помнить, что исследовать необходимо свежевзятый материал: отделяемое уретры, секрет предстателной железы, влагалищное отделяемое.
Препарат готовят по методу «раздавленной» или «висячей» капли.
41. Забор материала и методы диагностики хламидиоза.
Необходимо тщательно протереть ватным тампоном шейку матки. В цервикс вводится щеточка, вращательными движениями получают соскоб, обязательно содержащий эпителиальные клетки, который наносится на стекло, или помещается в пробирку Эппендорфа.
Культуральный метод – выращивание хламидий в культуре клеток Мак-Коя. Метод достаточно дорог и трудоемок, применяется в специализированных центрах.
Метод ПЦР (полимеразная цепная реакция) обладает наиболее высокой чувствительностью и специфичностью, удобен в рутинной работе, на сегодняшний день является наиболее эффективным в диагностике хламидийной инфекции.
ПИФ (прямая иммунофлюоресценция) - исследование уступает методу ПЦР по точности, высок субъективный фактор при интерпретации результатов.
Цитоскопия – наименее точный метод (точность около 20 %), неприемлемый для постановки диагноза.
|
|
|
Методы серологической диагностики основаны на выявлении специфических антител и их титра в сыворотке крови. Для серодиагностики используют реакцию связывания комплемента, реакцию непрямой геммагглютинации, микроиммунофлуоресцентный и иммуноферментный анализ.
Методы РСК (реакция связывания комплемента) и РНГА (реакция непрямой гемагглютинации) обладают низкой чувствительностью (до 15%), а микроиммунофлуоресценция, имея высокую чувствительность, недостаточно специфична. ИФА (иммуноферментный анализ) высокочувствителен (60-80%), однако обладает низкой специфичностью из-за межвидовых перекрестных реакций.
Метод иммунохроматографии и ферментспецифическая реакция. Сущность метода иммунохроматографии заключается в том, что при внесении образца клинического материала, предположительно содержащего антигены хламидий, в специальный планшет, происходит взаимодействие со специфическими антителами, ковалентно связанными с цветным латексом. Образовавшийся комплекс антиген-антитело-латекс движется по полоске нитроцеллюлозного фильтра, постепенно формируя окрашенную зону в случае положительного результата. Метод чрезвычайно прост в исполнении и занимает около получаса.
В любом из перечисленных методов диагностики возможны как ложноположительные, так и ложноотрицательные результаты. Поэтому для адекватной постановки диагноза желательно использование не менее двух методик - скринингового и подтверждающего (например ИФА и ПЦР).
42. Методы диагностики микоплазмоза.
Культивирование микоплазм с последующей идентификацией.
Культуральный метод обладает абсолютной специфичностью и обеспечивает возможность получить чистую культуру, необходимую для определения чувствительности к антибиотикам.
Иммунофлюоресценция и серологические методы.
Реакция иммунофлюоресценции предназначена для детекции микоплазм в мазках, соскобах, мазках-отпечатках из цервикса, уретры и влагалища.
|
|
|
Иммуноферментный анализ определяет антительный ответ организма на микоплазмоз.
Методы молекулярной биологии;
ПЦР и РНК высоко чувствительные и специфические методы диагностики микоплазмоза.
Как и большинство алгоритмов диагностики ИППП эти методики необходимо применять в сочетании двух. Один скрининговый, другой подтверждающий.
43. Исследование бледной трепонемы в «темном поле».
Темнопольная микроскопия применяется для обнаружения возбудителя сифилиса - бледной трепонемы в отделяемом из эрозий, язв и эрозированных папул. Так как бледная трепонема может окрашиваться только специальными и сложными методами окраски, применение довольно простой и недорогой темнопольной световой микроскопии позволяет значительно ускорить и удешевить обнаружение возбудителя. Метод основан на феномене Тиндаля (в луче света, проникающем в темное помещение через узкую щель, хорошо видны частицы пыли, взвешенные в воздухе). Для этого используют темную бумагу, закрывающую доступ света в оптическую систему светового микроскопа, в которой оставляют небольшую щель.
Обнаружение бледной трепонемы является неоспоримым доказательством подтверждения диагноза сифилиса. Особо ценен метод при диагностике первичного сифилиса (при отрицательных результатах серологических исследований), при диагностике нейросифилиса (обнаружение спирохеты в ликворе) и диагностике реинфекции сифилиса.
Показаниями для исследования являются любые эрозии, язвы и эрозированные папулы в области половых органов, ануса, слизистой оболочки рта и губ.
Для проведения исследования важно получить так называемый тканевой сок, в котором содержаться бледные трепонемы. После обработки поверхности высыпного элемента (эрозии, язвы, эрозированной папулы) осторожными движениями затупленного скальпеля добиваются выделения тканевого сока - прозрачно-желтой жидкости, который немедленно забирается для исследования и просматривается в темнопольном микроскопе.
Диагноз сифилиса потверждается при обнаружении подвижных бледных трепонем с поступательными, качательными, маятникообразными и ротаторным движениями. Обращается внимание на количество равномерных завитков, которых у бледной трепонемы насчитывают от 8 до 14.
|
|
|
Все эти особенности необходимы, чтобы отличить бледную трепонему от других, так называемых сапрофитирующих (непатогенных) спирохет - S. buccalis, S. refringens, S. balantidis, S. pseudopallida, которые могут находиться в материале, особенно если он взят из полости рта.
Отсутствие бледной трепонемы в отделяемом эрозий, язв, эрозированных папул и из периферических лимфатических узлов не исключает диагноз сифилиса.
|
|
|
