 |
Хроматографическое определение
|
|
|
|
Хроматографическое определение
Полученный этанольный экстракт наносят на стартовую линию хроматографической пластинки «Силуфол», помещают в хроматографическую камеру в систему, указанную в нормативной документации. После хроматографирования хроматограмму просматривают в УФ-свете и отмечают характер флюоресценции зон адсорбции. Некоторые производные катехинов имеют слабую голубую флюоресценцию, усиливающуюся после обработки хроматограмм 1% ванилином в концентрированной соляной кислоте. Для отличия лейкоантоцианидинов от катехинов хроматограммы выдерживают в парах соляной кислоты с последующим нагреванием при 105°С в течение 2 минут, при этом лейкоантоцианидины переходят в антоцианидины розового или красно-фиолетового цвета, а катехины остаются бесцветными или желтеют.
Количественное определение
В литературе описано много способов количественного определения дубильных веществ, которые можно выделить в следующие основные группы:
1. Гравиметрические – основанные на количественном осаждении дубильных веществ желатиной, солями тяжелых металлов или адсорбцией гольевым порошком.
В СНГ и за рубежом стандартным для технических целей является гравиметрический метод с применением гольевого порошка. Полученное водное извлечение делят на 2 равные части. Одну часть извлечения пропускают через колонку или фильтр с гольевым порошком (дубильные вещества адсорбируются гольевым порошком), промывают колонку или фильтр дистиллированной водой. Раствор, прошедший через гольев порошок и промывную воду, помещают в выпарительную чашку (точно взвешенную) и упаривают. Затем высушивают в сушильном шкафу до постоянной массы. Вторую часть извлечения также упаривают и высушивают до постоянной массы, не пропуская через колонку. Разница в массе двух упаренных и высушенных до постоянной массы извлечений укажет на содержание дубильных веществ.
|
|
|
2. Титриметрические – основанные на окислительных реакциях, прежде всего с перманганатом калия. В ГФ ХI включена перманганатометрическая методика Левенталя-Нейбауера (1860 г. ) в модификации Курсанова (1941 г. ), основанная на окислении фенольных ОН-групп перманганатом калия в присутствии индигосульфокислоты, которая является регулятором и индикатором реакции. После полного окисления дубильных веществ перманганатом калия, начинает окисляться индиго до изатина, в результате чего окраска раствора из синей переходит в золотисто-желтую.
ИНДИГОСУЛЬФОКИСЛОТА ИЗАТИН
(синий цвет) (золотисто-желтый цвет)
3. Фотоколориметрические – основанные на образовании окрашенных растворов с солями окисного железа, фосфорновольфрамовой кислотой и реактивом Фолина-Дениса (реактив на фенолы – фосфорномолибденовая и фосфорновольфрамовая кислоты – окрашивание).
4. Нефелометрические и хроматоспектрофотометрические используются в основном в научных исследованиях.
Биологическое действие и применение
Дубильные вещества и содержащие их растения применяют в основном в качестве вяжущих, противовоспалительных и кровоостанавливающих средств.
Вяжущее действие таннина и других вяжущих средств связано с их способностью вызывать осаждение белков с образованием плотных альбуминатов. При нанесении на слизистые оболочки или раневую поверхность они вызывают частичное свертывание белков слизи или раневого экссудата и приводят к образованию пленки, защищающей от раздражения чувствительные нервные окончания подлежащих тканей. Уменьшение при этом болевых ощущений, местное сужение сосудов, ограничение секреции, а также непосредственное уплотнение клеточных мембран приводит к уменьшению воспалительной реакции. На этом основано их медицинское применение в виде вяжущих средств, т. к. образующаяся на слизистых оболочках пленка препятствует дальнейшему воспалению. Нанесенные на раны они свертывают кровь и поэтому действуют как местное кровоостанавливающее средство. Свойство образования пленки на языке обуславливает характерный вкус дубильных веществ.
|
|
|
Дубильные вещества применяются как вяжущее и бактерицидное средство при воспалениях слизистых оболочек рта и глотки в виде полоскания, при ожогах – в виде присыпки, при кровотечениях в виде примочек, а внутрь – при желудочно-кишечных расстройствах (поносах) и отравлениях тяжелыми металлами и растительными ядами (алкалоидами, гликозидами).
Многими исследователями установлено противоопухолевое действие дубильных веществ. Особенно характерно это свойство для предшественников дубильных веществ – катехинов и лейкоантоцианидинов. В больших дозах таннины проявляют противоопухолевое действие, в средних – радиосенсибилизирующее, а в малых – противолучевое.
Дубильные вещества можно использовать как противоядие при отравлении гликозидами, алкалоидами и солями тяжелых металлов.
|
|
|
