 |
Хід роботи. Клініко – діагностичне значення. Якісна реакція на кров’яні пігменти. (бензидинова проба). Якісна реакція на кров’яні пігменти
|
|
|
|
ХІД РОБОТИ
У пробірку наливають 0, 5 мл сечі, додають 0, 5 мл розчину їдкого натрію і 5-7 крапель нітропрусиду натрію. Спостерігають за появою червоного забарвлення. Підкислюють розчин декількома краплями концентрованої оцтової кислоти. Червоне забарвлення набуває вишневого відтінку.
КЛІНІКО – ДІАГНОСТИЧНЕ ЗНАЧЕННЯ
Кетонурія спостерігається при цукровому діабеті, дефіциті вуглеводів у харчуванні, перепродукції гормонів-антагоністів інсуліну (кортикостероїдів, тироксину, гормонів передньої долі гіпофізу та інших). Зниження кількості кетонових тіл не має клінічного значення. В ранньому дитячому віці тривалі розлади шлунково-кишкового тракту (токсикоз, дизентерія) можуть зумовити кетонемію в результаті хронічного голодування.
ЯКІСНА РЕАКЦІЯ НА КРОВ’ЯНІ ПІГМЕНТИ
(БЕНЗИДИНОВА ПРОБА)
ПРИНЦИП МЕТОДУ . Базується на окисленні бензидину атомарним киснем, який утворюється при розпаді перекису водню кров’яним пігментом – гемоглобіном, який має пероксидазну активність.
ХІД РОБОТИ
До 20 крапель сечі додають рівний об’єм розчину бензидину в оцтовій кислоті і декілька крапель перекису водню. При наявності кров’яних пігментів сеча забарвлюється в синьо-зелений колір.
КЛІНІКО – ДІАГНОСТИЧНЕ ЗНАЧЕННЯ
В разі появи в сечі крові (вірніше еритроцитів) говорять про гематурію, а при наявності кров’яних пігментів – про гемоглобінурію.
Сеча при гематурії непрозора, має червонуватий відтінок. Гематурія спостерігається при пораженні сечовивідних шляхів (сечові камені, рак сечового міхура, цистіт).
Гемоглобінурія спостерігається при отруєнні гемолітичними отрутами і при ряді захворювань, які пов’язані з гемолізом еритроцитів.
|
|
|
ЯКІСНІ РЕАКЦІЇ НА ЖОВЧНІ ПІГМЕНТИ
(УНІФІКОВАНА ПРОБА РОЗІНА)
ПРИНЦИП МЕТОДУ. Під дією йоду білірубін сечі окислюється в білівердин.
ХІД РОБОТИ
В пробірку наливають 4-5 мл сечі і обережно по стінках пробірки нашаровують розчин йоду. Поява на межі двох рідин зеленого кільця свідчить про наявність білірубіну.
КЛІНІКО-ДІАГНОСТИЧНЕ ЗНАЧЕННЯ
Поява жовчних пігментів в сечі може спостерігатися при механічному перешкодженні відтоку жовчі і ураженнях печінки (гепатити, цирози), гемолітичних станах та захворюваннях кишечника (ентерити, кишкова непрохідність, схильність до запорів). Білірубінурія спостерігається при паренхіматозній та обтураційній жовтяницях.
ЯКІСНА РЕАКЦІЯ НА ФЕНІЛПІРОВИНОГРАДНУ КИСЛОТУ
ПРИНЦИП МЕТОДУ . Фенілпіровиноградна кислота утворює з іонами трьохвалентного заліза комплексну сполуку забарвлену в синьо-зелений колір.
ХІД РОБОТИ
До 2 мл свіжовідфільтрованої сечі наливають 8-10 крапель 10% розчину FeCl3. При наявності в сечі фенілпіровиноградної кислоти через 30-60 секунд з’являється синьо-зелене забарвлення, яке поступово блідне і вицвітає через 5-30 хвилин в залежності від концентрації фенілпіровиноградної кислоти в сечі.
Аналогічну пробу можна проводити на фільтрувальному папері і на дитячій пеленці: смужку фільтрувального паперу змочують сечею, висушують на повітрі і наносять краплю 10% розчину FeCl3. Позитивна проба дає синьо-зелене забарвлення. Аналогічну пробу проробляють з сухою або мокрою пеленкою.
КЛІНІКО – ДІАГНОСТИЧНЕ ЗНАЧЕННЯ
Вроджена відсутність у дітей в печінці ферменту 4- фенілаланінгідроксилази приводить до того, що фенілаланін не гідроксилюється і не перетворюється в тирозин.
Накопичення фенілаланіну та продукту його розпаду фенілпіровиноградної кислоти в крові і тканинах зумовлює інтоксикацію та порушення нормального розвитку мозку і появи тяжких розладів психіки дитини. Доказом цього спадкового захворювання – фенілпіровиноградної олігофренії є виявлення підвищеного вмісту фенілаланіну в крові і наявність фенілпіровиноградної кислоти в сечі.
|
|
|
Література
- Гонський Я. І., Максимчук Т. П. Біохімія людини. Тернопіль: Укрмедкнига, 2001. – 736с.
- Губський Ю. І. Біологічна хімія. – Київ-Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – 508с.
- Гонський Я. І., Максимчук Т. П., Калинський М. І. Біохімія людини. Підручник. – Тернопіль: Укрмедкнига, 2002. – 744с.
4. Скляров О. Я. Клінічна біохімія. – Київ: Здоров`я, 453с.
Обговорено і затверджено на засіданні кафедри, протокол №1 від 28. 08. 2008р.
Зав. кафедрою проф. Ерстенюк А. М.
1. Якісна реакція на білок (із сульфосаліциловою кислотою).
Осадження концентрованими кислотами.
Принцип методу. При дії на білок концентрованих мінеральних і органічних кислот відбувається денатурація білка внаслідок дегідратації та утворення комплексних сполук. В більшості мінеральних кислот осад денатурованого білка може розчинитися при надлишку кислоти, хоча білок не повертається до нативного стану. Тільки в присутності азотної, сульфосаліцилової та трихлороцтової кислот утворюється стійкий осад і це застосовується в медичній практиці для визначення вмісту білка в біологічних рідинах.
Хід роботи. В чотири пробірки наливають по 1 мл кислот: в першу - концентрованої азотної кислоти; в другу - концентрованої сірчаної кислоти; третю - 10% розчину трихлороцтової кислоти, четверту - 2% розчину сульфосаліцилової кислоти. Обережно по стінці в кожну пробірку наливають рівний об’єм розчину білка. При додаванні надлишку азотної, трихлороцтової і сульфосаліцилової кислот осад не розчиняється, а при додаванні надлишку сірчаної кислоти осад розчиняється.
|
|
|
