Главная | Обратная связь | Поможем написать вашу работу!
МегаЛекции

Определение влияния ионов металлов на активность каталазы




 

Теоретическая часть

Каталазная активность наблюдается почти во всех животных клетках и органах. Эта активность также обнаруживается во всех растительных материалах и в большмнстве микроорганизмов, кроме облигатных анаэробов.

Каталаза – оксидоредуктаза, действующая на H2O2 в качестве акцептора. Она является сложным ферментом, состоящим из белкового комплекса и простетической группы, содержащей железо. Каталаза расщепляет перекись водорода на молекулярный кислород и воду:

каталаза

2H2O2 ––––––––® O2 + 2H2O

Одна молекула каталазы может разложить 44000 молекулы H2O2 в секунду (Ершов, 2003).

Предлагаемый метод определения активности каталазы основан на учете количества разложившейся перекиси под действием ферментного препарата методом титрования перманганатом.

Экспериментальная часть

Оборудование и реактивы:

Колбочки на 100 мл; мерные колбочки на 100 мл; пипетки; бюретка; фарфоровая ступка; СаСО3; H24 10%-ная; 0,1 н. КМnО4; CuSO4; Pb(CH3COO)2; Fe2(SO4)3 c = 0,1 М; 3% раствор перекиси водорода (приготовленный из таблетки).

Ход работы:

Навеску 5 г свежего растительного материала растирают в ступке со стеклянным песком и 0,3 г СаСО3, затем добавляют 20 мл воды и снова тщательно растирают до получения однородной массы. После этого растертую массу водой количественно переносят в мерную колбу на 100 мл и доводят объем болтушки до метки. Через 30 – 40 минут смесь фильтруют. Четыре порции чистого фильтрата (по 20 мл) помещают в колбы на 100 мл. В три колбы добавляют по 1 мл растворов солей. В четвёртую 1 мл воды. Во все колбы приливают по 20 мл воды и по 3 мл 1%-ного раствора перекиси во­дорода. Время инкубации от 20 до 30 минут. По оконча­нии инкубации к содержимому всех колб добавляют 4 – 5 мл 10%-него раствора H2SO4 и титруют 0,1 н. раствором KMnO4 до слабо-розовой окраски, не исчезающей в течение минуты. По разности между контрольным и опытными титрованиями определяют количество разложившейся перекиси водорода за время инкубации в расчете на 1 г исходного растительного вещества.

,

где c – активность каталазы в миллиграммах Н2О2, разложившейся за время инкубации на 1 г растительного вещества;

а – миллилитров 0,1 н. раствора КМnO4, израсходованного на холостое титрование;

б – миллилитров 0,1 н. раствора КМnО4, пошедшего на опытное титрование;

Т – поправка к титру 0,1 н. КМnO4;

1,7 – количество миллиграммов H2O2, соответствующее каждому миллилитру 0,1 н. КмnO4;

Н – навеска растительного материала.

Оцениваем влияние различных ионов на активность каталазы.

Делаем выводы.

Контрольные вопросы

1. К какому клаасу ферментов относится каталаза?

2. Напишите уравнение реакции расщепления пероксида водорода при участии каталазы.

III. ХИМИЯ АТМОСФЕРЫ

Лабораторная работа №1

Определение серы в топливе

Теоретическая часть

В настоящее время основным источ­ником энергии на Земле является химическая энергия топлива. Топливо подразделяется по агрегатному состоянию на твердое, жидкое и газообразное, по способу получения — на естествен­ное и искусственное. К твердому виду топлива относятся камен­ный и бурый угли, горючие сланцы, торф, а также дрова. К жид­кому виду топлива относятся нефть и продукты переработки топли­ва: бензин, керосин, мазут, сланцевое масло и др. К газовому виду топлива относятся природный газ и газообразные продукты переработки жидкого и твердого топлива (Мингулина, 1990).

В состав различных видов топлива входит сера. Есть основания полагать, что ежегодные выбросы SO2 в атмосферу будут возрастать в связи с ростом потребления топлива. SO2 составляет более 95% всех техногенных выбросов серосодержащих веществ в атмосферу. Около 96% мирового выброса SO2 приходится на северное полушарие. Сравнительно большая доля стран Восточной и Западной Европы по этим видам за­грязнения атмосферы объясняется высоким уровнем использования бурого угля в энергопроизводстве.

Присутствие оксидов серы в атмосфере оказывает негативное влияние на жизнедеятельность животных и растений: диоксид серы взаимодействует с кислородом воздуха с образованием SO3 и в конечном счете Н2SO4:

2SO2 + О2 = 2SO3

SO3 + Н2О = Н2SO4

Установлено, что в индустриальных регионах до 60% почвенной кислотности опреде­ляется образованием в атмосфере серной кислоты (Гусакова, 2004).

Принцип метода основан на том, что сернистый газ, образующийся при сгорании топлива, поглощается раствором гидроксида калия. Сульфит-ион (SО32-) окисляют перманганатом калия (КМпО4) до сульфат-иона. По количеству перманганата, пошедшего на титрование рассчитывают содержание сульфит-иона в растворе и соответственно, серы в топливе.

S + O2 = SO2

23 + 2KMnO4 + 3H2SO4 = 2MnSО4 + 6K2SO4 + 3H2O

 

Экспериментальная часть

Оборудование и реактивы:

Образцы топлива; ступка с пестиком; весы; разновесы; поглотительный раствор—раствор гидроксида калия; 0,1 н. раствор перманганата калия; концентрированная серная кислота; промывная склянка; бюретка; пипетки; конические колбы.

 

Ход работы:

1. Взвешивают порцию топлива массой 5 г.

2. Растираю в ступке.

3. Помещают в стеклянную трубку для сжигания.

4. Сжигают его в стеклянной трубке в токе воздуха. Воздух, содержащий оксид серы, протягивают через поглотительную склянку, наполненную раствором гидроксида калия объёмом 50 мл со скоростью 0,5 л/мин.

5. Порцию раствора объёмом 10 мл помещают в колбу для титрования, добавляют по каплям концентрированную серную кислоту до слабокислой реакции среды.

6. Титруют 0,1 н раствором перманганата калия.

7. Рассчитывают количество вещества сульфит-иона в растворе, подвергшемся титрованию; поглотительном растворе; образце топлива.

8. Рассчитывают массовую долю серы в образце топлива.

Контрольные вопросы

1. Какие виды топлива Вам известны?

2. В какие химические реакции вступает диоксид серы в атмосфере?

Лабораторная работа №2

Поделиться:





Воспользуйтесь поиском по сайту:



©2015 - 2024 megalektsii.ru Все авторские права принадлежат авторам лекционных материалов. Обратная связь с нами...