 |
Методы оценки функциональной активности фагоцитирующих клеток
|
|
|
|
Одной из основных функций гранулоцитов (полиморфноядерных лейкоцитов) и моноцитов крови является эндоцитоз - захват различных объектов: инертных частиц (латекс, уголь), живых или убитых микроорганизмов (бактерии, дрожжеподобные грибы). Количественную оценку фагоцитарной активности гранулоцитов и моноцитов проводят в цельной крови, в лейкоцитарной взвеси или в обогащенных фракциях фагоцитирующих клеток. В качестве стандартных объектов фагоцитоза используют монодисперсные частицы латекса диаметром от 1,0 до 2,0 мкм, суспензию убитых нагреванием клеток бактерий или дрожжеподобных грибов.
Показателями клеточных факторов неспецифической защиты организма являются: активность фагоцитоза (АФ) и фагоцитарный показатель (ФП).
Определение:
- обнаруживают под микроскопом 10-20 лейкоцитов, передвигая предметное стекло так, чтобы под объективом находился край препарата из исследуемой крови;
- подсчитывают число микробов, захваченных каждым обнаруженным лейкоцитом.
ФП - среднее число микробов в одном лейкоците. Норма 4,2.
АФ - процент лейкоцитов, участвующих в фагоцитозе. Норма 60%.
Дано: препараты-мазки, таблицы
Результат:___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ Вывод:_________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Теоретическая справка
Работа № 3
Бактерицидная функция кожи
Важным фактором неспецифической резистентности является функция кожи как механического барьера для внедрения паразита. Отторжение верхних слоев эпидермиса, секреты сальных и потовых желез способствуют их удалению с поверхности кожи. Существенную роль в элиминации микробов с поверхности кожи играют различные микробоцидные субстанции (молочные и жирные кислоты и др.), обеспечивающие ее «самоочищение». Поэтому различные микроорганизмы, не являющиеся ее постоянными обитателями, не могут в течение продолжительного времени сохраняться на коже. Бактерицидность кожных секретов зависит от их кислотности.
|
|
|
Работа № 4
Бактерицидная активность лизоцима слюны
Лизоцим – фактор неспецифической защиты, фермент. Специфичность его заключается в разрушении связи между N-ацетилмурамовой кислотой и N-ацетилглюкозамином в мукополисахариде, образовывающем оболочку многочисленных микробов. Бактериологическая функция – высокая концентрация в слезах, слюне, бронхиальном секрете, нейтрофильных гранулоцитах и моноцитах, также богата лизоцимом слизь носа, низкий уровень в грудном молоке, сыворотке крови, кожи. Лизоцим попадает в кровь из распадающихся нейтрофилов.
Работа № 5
Бактерицидная активность сыворотки крови (БАСК)
Бактерицидная активность сыворотки крови (БАСК) является показателем естественной способности крови к самоочищению. В 1886 г. Высокович обнаружил, что различные бактерии, введенные в кровь кроликов и собак, не удаляются из организма выделительными органами, если эти микробы не повреждены. Исчезновение их из организма связано с наличием в сыворотке особых веществ, убивающих и растворяющих микробные клетки. Бактерицидное действие сыворотки крови распространяется как на грамположительные, так и на грамотрицательные бактерии.
Работа № 6
Фагоцитоз
Фагоцитоз (от греч. phagos - пожираю, cytos - клетка), открытый и изученный И.И. Мечниковым, является одним из основных мощных факторов, обеспечивающих резистентность организма, защиту от инородных веществ, в том числе микробов. Это наиболее древняя форма иммунной защиты. Механизм фагоцитоза состоит в поглощении, переваривании, инактивации инородных для организма веществ специализированными клетками - фагоцитами.
|
|
|
Фагоцитарная реакция осуществляется поэтапно. При завершенном фагоцитозе, заканчивающемся разрушением микроба, различают 4 стадии:
1) приближение фагоцита к объекту (положительный хемотаксис) обусловлено наличием специфических рецепторов на мембране фагоцита;
2) прилипание (адгезия) также осуществляется за счет соответствующих рецепторов;
3) поглощение (эндоцитоз, захват) - основная физиологическая функция фагоцитов. Захват крупных частиц происходит за счет обтекания их псевдоподиями без участия специфических рецепторов (фагоцитоз). Бактерии, дрожжеподобные грибы и др. микроорганизмы захватываются посредством рецепторов фагоцитов, распознающих углеводные компоненты поверхностной структуры микроорганизмов (пиноцитоз). В результате захвата образуется фагоцитарная вакуоль - фагосома;
4) переваривание - слияние фагосомы с лизосомой и разрушение микроорганизмов лизосомальными ферментами. Если микробные антигены разрушаются частично, вслед за фагоцитозом начинается антителообразование.
Незавершенный фагоцитоз отличается отсутствием последней стадии - переваривания. Многие вирулентные бактерии часто не погибают и могут длительно находиться внутри фагоцита и даже размножаться внутри них, вызывая их гибель. Выживание микроорганизмов внутри фагоцитов обеспечивают следующие механизмы:
1) одни патогенные агенты способны препятствовать слиянию лизосом с фагосомами (токсоплазмы, микобактерии туберкулеза);
2) другие обладают устойчивостью к действию лизосомальных ферментов за счет наличия микрокапсул (гонококки, стрептококк А);
3) третьи после эндоцитоза покидают фагосому, избегая действия микробоцидных факторов и могут длительно находиться в цитоплазме фагоцитов (риккетсии).
Иммуномодуляторы
Иммуномодуляторы – природные или синтетические вещества, способные оказывать регулирующее действие на иммунную систему. По характеру влияния на иммунную систему их подразделяют на иммуностимулирующие и иммуносупрессивные.
Иммуностимуляторы
|
|
|
| Препараты | Механизм действия |
| Полиоксидоний Сальмозан Рибомунил Метилурацил | Повышают функциональную активность моноцитов/ макрофагов |
| Продигиозан Пирогенал Миелонид | Повышают активность В-лимфоцитов |
| ИЛ-4, ИЛ-5 | Запускают и стимулируют дифференцировку В-лимфоцитов |
| Иммунофан Декарис | Корректируют функции Т-лимфоцитов |
| Дибазол Арбидол | Активируют синтез интерферона |
| Интерфероны: ИНФ-α (лейкоцитарный) | Обладает противовирусным действием. Непосредственно на вирус вне клетки не действует, а связывается со специальными рецепторами клеток и влияет на репродукцию вируса в клетке на стадии синтеза белков. Связываясь со здоровыми клетками, защищает их от вирусов. |
| ИНФ-β (фибробластный) | Обладает противоопухолевым действием Задерживает пролиферацию (размножение) опухолевых клеток. Также обладает противовирусным действием. |
| ИНФ-γ (иммунный) | Обладает иммуномоделирующим действием Стимулирует фагоцитоз, естественные киллеры, регулирует антителообразование. |
Препараты различного происхождения и механизма действия:
• Витамины (А, Е, С)
• Минеральные элементы (Zn, Se, Си, Fe, Mg, Mn)
• Адаптогены (алоэ, каланхоэ, элеутерококк, жень-шень, лимонник)
• Препараты направленного действия:
Тималин, Т-активин, Тимоген - на клеточное звено;
В-активин, Спленин - на гуморальное звено
Иммунодепрессанты
Препараты физической, химической и биологической природы, применяемые для подавления иммунной системы при аллергии и других иммунопатологических процессах.
| Препараты | Механизм действия |
| Цитостатики | |
| Меркаптурин Метотрексат Азотиаприн Батриден | Торможение пролиферативной фазы иммунного ответа, подавление синтеза антител (IgG), торможение клеточных иммунных реакций |
| Циклофосфан Хлорбутин | Подавление Т-супрессоров, Т-хелперов, В-клеток, ЦТЛ |
| Глюкокортикоиды | |
| Кортизон Кортизол Гидрокортизон Преднизолон Дексаметазон Ультран Ингакорт | Торможение функции Т-клеток памяти, В-клеток памяти, Т-хелперов, высвобождение цитокинов. Подавление взаимодействия Т- и В-лимфоцитов |
| Антилимфоцитарные антитела | |
| Антилимфоцитарная сыворотка | Элиминация Т-лимфоцитов, инактивация Т-клеточных рецепторов |
|
|
|
Общие принципы применения иммуномодуляторов в целом:
1. Иммуномодуляторы назначают в комплексной терапии одновременно с антибиотиками, противогрибковыми, противопротозойными или противовирусными средствами.
2. Целесообразно раннее назначение иммуномодуляторов, с первого дня применения химиотерапевтического этиотропного средства.
3. Иммуномодуляторы, действующие на фагоцитарное звено иммунитета, можно назначать больным как с выявленными, так и невыявленными нарушениями иммунного статуса, т.е. основанием для назначения препарата является клиническая картина.
4. При наличии в лечебно-профилактическом учреждении соответствующей материально-технической базы применение иммуномодуляторов целесообразно осуществлять на фоне иммунологического мониторинга, который следует проводить независимо от наличия или отсутствия исходных изменений в иммунной системе.
5. Иммуномодуляторы можно назначать в виде монотерапии при проведении иммунореабилитационных мероприятий, в частности при неполном выздоровлении после перенесённого инфекционного заболевания.
6. Понижение какого-либо параметра иммунитета, выявленное при иммунодиагностическом исследовании у практически здорового человека, не является основанием для назначения ему иммуномодулирующей терапии. Эти лица должны находиться на учете в соответствующем лечебно-профилактическом учреждении, составляя группу наблюдения по иммунному статусу.
Схема классификации препаратов:
Название
|
|
|
