Использование рыб в экспериментальной работе

В настоящее время EPA продолжает использовать тесты in vitro для оценки острой токсичности у рыб. Одна из альтернатив, была описана в TETRATOX, в которой используется Tetrahymena, как биологический маркер в оценке экологического риска загрязнения воды. Биохимия и физиология Tetrahymena была изучена еще в 1950-х гг., и Tetrahymena, и особенно, T.pyriformis, широко используется с 1970-х гг. для определения токсичности в тестах воды. Более того, геномы организмов хорошо изучены. Популяция T.pyriformis растет в тесте быстро, инэкстенсивно и широко. Данные, полученные в TETRATOX демонстрируют высокую степень соответствия данным, полученным в исследованиях рыб.

Последние годы интенсивно развиваются исследования на рыбах Danio rerio и теляпиях, в том числе для оценки токсичности лекарств и ксенобиотиков. В мире существует примерно 20000 видов рыб, это примерно половина от всех живущих на Земле позвоночных. Рыбы сильно варьируют по своим размерам, таксономии, морфологии, генетике, поведению, физиологии и экологии. Поэтому невозможно дать одно руководство по их содержанию и разведению. Однако можно выделить отдельные общие принципы.

Отбор видов рыб, независимо от того, морские, пресноводные или рыбы солоноватой воды, сопровождается необходимостью организации системы поддержки жизнедеятельности.

Приобретение рыб возможно только в легальных источниках. Если в работе используют рыб, выловленных в открытых водоемах, то требуется заключение ветеринарной службы. Отлов рыб для клинических испытаний проводят в соответствии с существующими стандартами и законодательством.

Транспортировка рыб должна проводиться только с соблюдением требований по снижению стресса. В США и Канаде перед транспортировкой рыб не кормят за 2-4 дня до перевозки, чтобы снизить вероятность загрязнения воды, и столько же дней дают ограниченное количество корма, чтобы затем перейти на обычный рацион.

Научно-исследовательский и обслуживающий персонал должен обладать соответствующей квалификацией по содержанию рыб, чтобы предотвратить стресс и возможные ранения рыб при их вынимании. В руках рыб надо держать как можно более короткое время. Сети и другое оборудование, которое применяют для отлова рыб, должно быть мягким, неповреждающим кожу рыбы. При необходимости можно использовать химические средства для обездвиживания.

Акклиматизация рыб должна проводиться с минимальным стрессом. Температура воды в танках для содержания рыб должна быть такой же, как и в транспортных контейнерах и в природных водоемах. Рыбы лучше переносят понижение температуры, чем ее повышение. В первые дни рыб лучше не тревожить.

Карантин необходим для новых партий рыб, кроме случаев, когда рыб получают из тех же источников. Практикуется полное отделение рыб. Для минимизации вероятности получения патогенов может быть проведена стерилизация: химическим способом, озонацией или ультрафиолетом.

Танки и другое оборудование для перевозки должны иметь такую конструкцию и быть изготовлены из таких материалов (пластик или фибра), чтобы минимально травмировать рыб. Размеры и конкретная конструкция подбираются в соответствии с видом рыб. Конструкции не должны содержать медь, никель, кадмий или латунь. При использовании поливинила надо следить за тем, чтобы он не выделял ацетона, метилэтиленкетонов и тетрагидрофуранов.

Качество воды должно определяться в процессе биологической, механической и химической фильтрации и дезинфекции. В течение дня необходимо контролировать рН, содержание кислорода, азота, аммония, окиси углерода, солей и твердых примесей.

Температура воды влияет на репродуктивные способности, здоровье, поведение, особенности кормления рыб. Температура зависит от вида рыб и подбирается в процессе акклиматизации.

Освещение как естественное, так и искусственное зависит от вида рыб. Хотя большинство рыб нормально себя чувствуют при 12-часовом дне и 12-часовой ночи, для большинства рыб достаточно 8-10-часового дня, 12-14-часовой день необходим для тропических рыб. Дня установления циклов освещенности используют таймер. В аквариумах обычно ставят флуоресцентные лампы для искусственного освещения.

Плотность поголовья рыб и движение воды зависят от их вида. Слишком большие пространства могут быть нежелательны для самочувствия рыб. Оптимальное количество рыб в аквариуме зависит от многих факторов, включая качество, движение и температуру воды. При более высокой температуре снижается содержание кислорода, что может потребовать снижения количества рыб. Воды должно быть достаточно, чтобы рыбы могли плавать свободно.

Кормление рыб. Некоторые виды рыб являются травоядными, некоторые – плотоядными, некоторые – всеядными. В соответствии с этим подбирается тип кормления. Можно использовать приготовленные промышленным способом корма. Кормление осуществляют 1 или 2 раза в день в течение 5 рабочих дней, хотя может потребоваться и более частое кормление, а также кормление в выходные дни. Кормление с рук при соблюдении всех гигиенических требований приветствуется, так как позволяет выявить возможные проблемы.

Программа контроля здоровья осуществляется ветеринаром или квалифицированными работниками, знакомыми с особенностями лечения рыб. Персонал необходимо обучить и снабдить необходимым оборудованием для мониторирования здоровья рыб.

Аналгезия, анестезия и инвазивные процедуры проводятся квалифицированным персоналом в случаях, когда необходимо успокоить, обездвижить или обезболить рыбу, особенно при инвазивных процедурах. После применения анестезии рыбы должны быть помещены в аквариумы, обогащенные кислородом без анестезии.

Эвтаназия, если она необходима, должна быть гуманной. Методы эвтаназии включают гипотермию, электрошок, большие дозы Tricaine Methanesulfonate (Finquel, MS-222) или диоксид углерода, или отсечение головы острым ножом. MS-222, введенный в дозе 500 мг/л может вызвать боль и стресс. При использовании химических средств в процессе эксперимента можно применять физические методы эвтаназии. Во всех случаях надо проконсультироваться с ветеринарной службой.

Опасные виды и зоонозы. В процессе работы надо избегать возможных трав персонала при работе с опасными видами, а также возможности заражения болезнями, переносимыми рыбами. Надо применять правила техники безопасности для снижения этих рисков.